正交实验法对碱性磷酸酶活性测定的优化

碱性磷酸酶(ALP)是一种非特异性磷酸单酯酶,碱性条件下几乎能催化所有磷酸单酯的水解。采用正交实验法研究兔肝ALP的活性,在单因素实验的基础上,利用Minitab对碱性磷酸酶的催化条件(pH值、反应温度、酶量、底物量)进行4因素3水平的正交实验设计。正交实验结果表明,4种因素对酶活性的影响由大到小排列顺序为pH值>温度>底物>酶,最佳组合为A3B3C1D1,即酶量为0.4 mL,底物量为0.8 mL,温度50℃,pH值为10时兔肝ALP的活性最强。