医学院校生物科学专业应用型人才培养模式的研究与探索

生物科学是当代自然科学中发展最快的学科之一。目前我国生物科学人才发展的总体水平同世界先进水平相比还有较大差距,在支撑我国生物技术科技与产业发展方面还有许多不相适应的地方。本文以徐州医学院为例,阐述在生物科学专业筹建和建设过程中的一些体会和想法,以期为其他地方医学院校生物科学专业建设提供一些参考和借鉴。

医学微生物学理论教学中的几点体会

医学微生物学是医学院校重要的一门专业基础课,只有通过多种方法激发学生的学习兴趣,改善课堂教学,才能有效地提高教学质量。

浅谈成教医学微生物学与免疫学教学中的体会

医学微生物学与免疫学是高等医学院校的重要基础学科之一,针对成教学生的特点,通过合理编排教学内容,实施科学的教学方法,减轻了学生的压力,调动了学生学习的积极性,提高了教学效果。

留学生《医学微生物学》教学的体会与思考

为了适应我国医学教育国际化发展趋势,我校于2005年开办了第一届医学专业留学生全英文教学班,学员多数来自尼泊尔、印度、巴基斯坦。这些学生在学习方法和能力上与中国学生相比有很大的差异。本教研室于2006-2007学年第二学期开始承担了留学生医学微生物学的全英文理论及实验教学。

本科医学免疫学教学的几点体会

医学免疫学是高等医学院校的重要基础课程和必修课程之一,对于初学者来说,普遍感到困难,难以理解和掌握。为了有效地提高本科医学免疫学理论教学质量,我们在教学中采用多种教学方法和教学手段,激发了学生的学习兴趣,调动了学生的学习积极性,从而有效地提高教学质量。

开设微生物学与免疫学综合性实验教学的体会

医学微生物学与免疫学是一门重要的医学基础课,具有较强的实践性和应用性。实验教学是其重要的组成部分,是理论联系实际的重要环节。在实验教学中增加综合性实验的内容,有效的提高了学生综合运用理论知识和实验技能分析和解决实际问题的能力、培养学生的创新意识、创新能力和科研思维方式,有助于进一步提高教学质量,培养实用型人才。

医学生科研素质训练的实践探索

高等医学教育的最终目的是培养符合社会需要的医学人才,培养能适应医学教育国际化、全球化趋势的、优秀的临床医学工作者。医学生专业的特殊性、科研能力的重要性及社会要求的高标准性,促使"科研创新能力"成为衡量优秀医学本科生的新标准。我们以寄生虫学兴趣小组为平台所倡导的"学、研结合"模式培养创新型医学生取得了良好的成效,学生基础知识得到巩固与拓展,动手实践能力得到增强,科研创新能力得到迅速提升,综合能力明显提高。"学、研结合"模式有必要在全校范围内逐步推广到其他学科,涉及更多专业,辐射更多本科医学生。"学、研结合"模式的进一步推广有利于我校学生的长远发展,有利于提高我校科研创新能力,有利于早日实现我校"人才强校"的战略目标。

浅谈多媒体技术在医学免疫学教学中的应用

医学免疫学是一门重要的医学基础课，其特点是理论性强、逻辑性强、内容抽象，更新较快。对于初次接触免疫学的医学生来说，学习时感到枯燥难懂，不容易理解和掌握，教学效果常常是事倍功半。近年来，随着计算机技术的迅猛发展，以计算机多媒体为主的现代教学技术得到了广泛的应用.多媒体教学具有图文并茂、信息量大等特点，它改变了传统教学模式，对提高医学课程的教学效果发挥了重要作用。

医学免疫学实验教学体会

医学免疫学是一门重要的医学基础课,实验教学是其重要的组成部分,是理论联系实际的重要环节。因此,在加强理论教学的同时应加强实验教学,以进一步提高教学质量,培养实用型人才。

医学留学生人体寄生虫学教学方法探讨

留学生教学的研究成为各高校一个崭新的课题,其教学模式、教学方法及教学手段等问题都具有极大的探索价值。本文结合在人体寄生虫学教学过程中的一些体会,探讨医学院校基础课开展医学留学生全英语教学的可行性和必要性,并提出了自己的一些建议。

华支睾吸虫感染小鼠模型的建立及比较

目的观察3个品系小鼠分别感染不同剂量华支睾吸虫囊蚴后其粪便巾虫卵检出率及肝组织的病理变化。方法分别以10、20、30个囊蚴／鼠经口感染BALB／c（Ⅰ）、C57BL／s（Ⅱ）、昆明鼠（Ⅲ）各3组。同时设不感染对照组。于感染后第20～30d采用NaOH消化法粪检虫卵，感染30d后剖杀部分小鼠，取肝脏作组织切片。各组剩余小鼠继续观察至感染后12周。结果BALB／c（Ⅰ）、C57BL／s（Ⅱ）、昆明鼠（Ⅲ）粪检虫卵阳性率分别为79．17％、12．50％和37．50％，差异有显著性（P〈0．005）。受染BALB／c和昆明鼠肉眼可见肝脏肿大，镜下均见胆管扩张、管壁增厚、炎细胞浸润，并随感染度增加程度加重，C57BL／s肝脏未见明显病理改变。结论BABL／c对华支睾吸虫感染的敏感性最高，昆明鼠次之，C57BL／6不敏感。动态观察小鼠宿主状态及相关研究的适宜感染剂量为每鼠30个囊蚴。

不同品系小鼠感染华支睾吸虫后IgG及亚类的动态观察

目的观察不同品系小鼠感染华支睾吸虫后，血清中特异性抗体IgG、IsGI／IgG2a的动态变化。方法NaOH消化法粪检虫卵，ELISA法测定不同品系小鼠感染后4、8和12w血清中抗体IsG、IsGI／IgG2a的动态变化。结果三个品系小鼠血清IsG均于感染后第4～8w升高，约在第10w达到高峰，此后开始下降并维持至观察结束的第12w；IgGI／IgG2a比值感染后逐渐增高，并持续至第12w。结论华支睾吸虫感染的免疫应答发生了由Th1免疫应答向Th2免疫应答转变的趋势。

小鼠异基因骨髓移植γ线清髓性照射对骨髓内皮龛的损伤研究

本研究探索异基因骨髓移植清髓性γ线照射预处理对受鼠骨髓内皮的损伤程度。体外培养小鼠骨髓单个核细胞,经5-7天检测其表面标记、吞噬Dil-Ac-LDL和结合FITC-UEA-1鉴定,并行CFSE标记。分析正常组、清髓性照射组、内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)移植组及照射联合EPC移植组小鼠外周血中白细胞变化、骨髓内皮的改变及CFSE标记EPC的骨髓内分布。结果发现,培养细胞鉴定证实为CD31+CD133+CD45low/-,且具有吞噬Dil-Ac-LDL和结合FITC-UEA-1能力。小鼠清髓照射后外周血白细胞迅速减少,与正常组相比,有显著差异(p<0.05)。照射后3天,骨髓中大量出血,内皮细胞和基底膜间连接被损坏。清髓照射后输注CFSE标记EPC,18小时后小鼠骨髓中可见CFSE+细胞,其细胞量是正常小鼠单纯EPC输注组的58倍(p<0.05)。结论:移植清髓照射预处理引起严重骨髓内皮龛损伤,该损伤驱动外源性EPC的归巢。

大肠杆菌致小鼠急性腹膜炎模型的建立

目的建立一种简便、稳定、符合临床特征的小鼠感染大肠杆菌致细菌性腹膜炎的模型。方法小鼠腹腔分别注射9种浓度的2株大肠杆菌菌液,分别于4、6、8、16、24h记录小鼠外周血白细胞总数的变化;记录实验组小鼠死亡时间,并解剖死亡小鼠,观察其腹腔情况以及肝、脾组织的病理变化。结果各实验组小鼠均表现出细菌性腹膜炎临床征象,高于2×108cfu/ml浓度的实验组小鼠细菌性腹膜炎尤为典型;小鼠外周血白细胞总数随着注射菌液后时间的延长呈现先升高后降低的趋势;病理检查显示实验组小鼠肝、门管、脾窦内有不同程度的中性粒细胞浸润。标准菌株的MLD为3×108cfu/ml。结论小鼠大肠杆菌细菌性腹膜炎模型建立成功;小鼠死亡率因不同菌株、不同浓度而有所差异。

乙肝病毒X基因对人肝癌细胞株HepG2凋亡的影响

目的探讨乙肝病毒X基因(hepatitis B virus,HBX)对人肝癌细胞株HepG2凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将HBX真核表达载体pcDNA3.1-X转入人肝癌细胞HepG2中,建立表达HBX的HepG2/HBX细胞模型;以转染空载体pcDNA3.1的HepG2/pcDNA3.1细胞为对照,于转染后24、48、72、96 h收集细胞标本,行流式细胞术分析肝细胞凋亡率变化情况,RT-PCR、Western blot分别检测肝癌细胞内HBX和凋亡相关基因Fas、FasL表达以及JNK、c-Jun蛋白磷酸化水平情况。结果转染24 h后HepG2/HBX细胞中即检测出HBX表达,且其表达量随时间延长而逐渐增高(P<0.05);对照组细胞中各时间点均无HBX的表达。转染后各时间点,HepG2/HBX细胞与对照组细胞相比,细胞凋亡率均升高(P<0.05),Fas、FasL表达量和JNK、c-Jun蛋白磷酸化水平亦均增高(P<0.05);且HBXmRNA表达量与细胞凋亡率、Fas和FasL表达量以及JNK、c-Jun的磷酸化水平均呈正相关(P<0.05)。结论HBx可通过上调JNK、c-Jun蛋白磷酸化水平而促进FasL蛋白的表达,从而诱导HepG2细胞凋亡。

HBx小鼠肿瘤细胞株的建立及初步鉴定

目的建立稳定、高效的HBxAg体外表达细胞株,以便进一步研究HBX基因和HBxAg的致癌作用及机理。方法用RT-PCR技术扩增出了HBX的cDNA,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,通过脂质体介导将pcD-NA3.1-HBX转染到小鼠肿瘤细胞株(EL4)中。结果RT-PCR及蛋白质印迹的实验结果表明,HBX基因在小鼠肿瘤细胞EL4细胞中得到了表达。结论本研究成功构建了表达HBx的小鼠肿瘤细胞株,为进一步研究HBX基因和HBx的致癌作用及机制奠定了实验基础。

尘螨与过敏性疾病的关系

目的进一步调查徐州市区人群尘螨感染情况,了解尘螨的生物学特性及其与临床过敏性疾病的关系,为管理部门制定决策及公众采取预防措施提供依据。方法采用尘螨变应原皮肤点刺试验(skin prick test,SPT),并以组胺当量标准检测健康人群及临床过敏患者的阳性率;检测居民室内尘螨并计数。结果检测在校大、中、小学生和幼儿307人,阳性50人(16.3%);临床过敏患者997例,阳性713例(71.5%)。健康人群与患者组内各年龄段之间SPT阳性率差异无统计学意义(P>0.05),但各组女性SPT阳性率均高于男性(P<0.05);检测居民卧室30户,螨检阳性23户(76.7%)。结论徐州市区居民室内尘螨孳生多见,易引起过敏,患者四季均可发病。加强居室环境螨类控制,是减轻螨病症状和减少过敏发作的重要预防措施。

流体动力学法表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型的建立

目的建立表达乙肝病毒X蛋白的小鼠模型。方法实验动物分成模型组和对照组,模型组利用已构建的含有HBX基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX,对照组以等量生理盐水代替,采用流体动力学法将质粒经尾静脉高压注入小鼠体内,24h后取小鼠肝组织,行免疫荧光、RT-PCR和Western blot法从不同水平检测HBX在小鼠肝组织内的表达情况。结果模型组小鼠RT-PCR显示肝组织内有HBX mRNA的存在,免疫荧光和Western blot检测均有HBX蛋白的表达;对照组小鼠则无HBX表达。结论成功建立了表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型,为进一步探讨HBX蛋白在动物体内的生物学作用提供实验基础。

抗肠道病毒71型外壳蛋白1卵黄抗体的制备和鉴定

目的 克隆肠道病毒71型（EV71）BrCr株外壳蛋白1（VP1）基因,构建原核表达载体PET28a/VP1,表达VP1重组蛋白,以VP1免疫产蛋母鸡,获得抗VP1的鸡免疫球蛋白（IgY）.方法 培养Vero细胞,利用Vero细胞增殖肠道病毒EV71 BrCr株,提取病毒总RNA,利用RT-PCR扩增出VP1目的基因,目的基因插入克隆载体pGEM-T,提取重组质粒,经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切获得目的基因,插入原核表达载体pET-28a,重组子同时BamHⅠ,EcoRⅠ双酶切和测序鉴定,转化入感受态工程菌E.coli BL21（DE3）,获得阳性重组工程菌,经IPTG诱导获得表达融合蛋白,试剂盒纯化蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,用VP1蛋白免疫开产母鸡,收集鸡蛋,利用EGG stractTM IgY Purification System试剂盒提取卵黄抗体IgY,间接ELISA测滴度,SDS-PAGE和Western blotting验证其表达量和免疫活性.结果 本实验成功扩增出肠道病毒EV71 BrCr株VP1基因,获得了含重组表达质粒pET28a/VP1的阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1蛋白,VP1经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,利用纯化后VP1蛋白免疫产蛋母鸡,提取的IgY经ELISA 鉴定后其滴度为1：104,SDS-PAGE和Western blotting证实为抗VP1的特异性IgY.结论 成功的从EV71 BrCr株扩增出VP1基因,构建了PET28a/VP1表达载体,获得高效表达融合蛋白,免疫产蛋母鸡后制备高效价抗VP1蛋白的特异性IgY.

幽门螺杆菌临床菌株主要蛋白抗原表达及其诱导宿主产生抗体差异性的研究

建立了基于幽门螺杆菌重组蛋白抗原rUreB、rHpaA、rVacAr、CagA1、rNapA、rFlaA和rFlaB的ELISAs,用于检测幽门螺杆菌临床菌株上述抗原表达率和幽门螺杆菌感染病人血清IgG阳性率,另采用PCR检测临床菌株中上述抗原编码基因携带率,以期为选择幽门螺杆菌基因工程疫苗抗原提供依据.实验结果显示,rUreB、rHpaA、rVacAr、CagA1、rNapA、rFlaA和rFlaB表达量分别约为细菌总蛋白的35%、32%、15%、23%、56%、25%和20%.各重组抗原均能与商品化幽门螺杆菌抗血清(DAKO)产生阳性Western Bolt结果,免疫家兔能产生特异性抗体.从332例慢性胃炎或消化性溃疡病人胃黏膜活检标本中,分离获得145株幽门螺杆菌,其阳性率为43.8%.所有幽门螺杆菌临床菌株均表达UreB、HpaA、FlaA和FlaB,52.4%、91.7%和93.1%菌株分别表达VacA、CagA和NapA.145例幽门螺杆菌感染的病人血清中,UreB、HpaA、VacA、CagA、NapA、FlaA和FlaB的IgG抗体阳性率分别为100%、86.9%、42.8%、70.3%、89.7%、84.8%和79.3%.此外,不同胃疾病标本中幽门螺杆菌分离率均无显著性(P>0.05),但菌株VacA和NapA表达率与疾病严重程度相关(P<0.05).综合分析实验结果,UreB是研制幽门螺杆菌基因工程疫苗首选抗原,其次是NapA和HpaA;各病种与幽门螺杆菌感染率无关,但与菌株毒力有关.