妊娠期高血压疾病孕妇血清、脐血及胎盘组织中热休克蛋白70的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）在妊娠期高血压疾病孕妇血清、脐血及胎盘组织中的表达及其在发病中的作用。方法收集2011年8月至2012年12月在徐州市妇幼保健院产科住院分娩的妊娠期高血压疾病孕妇90例，其中妊娠期高血压组30例，轻度子痫前期组30例，重度子痫前期组30例。选择同期分娩的健康孕妇30例为对照组。采用ELISA法检测各组孕妇血清、脐血中HSP70水平；用免疫组化sP法检测胎盘组织中HSP70蛋白表达水平；用逆转录（RT）．PCR技术检测胎盘组织中HSP70mRNA表达水平。结果（1）轻度子痫前期组孕妇血清及脐血中HSP70水平分别为（2．61±0．98）及（0．78±0．27）μg／L，重度子痫前期组分别为（3．10±1．18）及（0．96±0．28）μg／L，两组孕妇血清及脐血中HSP70水平均分别高于对照组分别为（1．88±0．79）及（0．61±0．15）μg／L]及妊娠期高血压组[分别为（2．13±0．71）及（0．64±0．18）μg／L]，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；重度子痫前期组均分别高于轻度子痫前期组，差异也有统计学意义（P〈0．05）；妊娠期高血压组虽高于对照组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）妊娠期高血压组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组胎盘组织中的HSP70蛋白表达总阳性率分别为83％（25／30）、90％（27／30）及100％（30／30）1均高于对照组（43％，13／30），分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；重度子痫前期组高于妊娠期高血压组及轻度子痫前期组，差异也均有统计学意义（P〈0．05）。（3）妊娠期高血压组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组胎盘组织中HSP70mRNA表达水平（分别为0．82±0．27、0．92±0．26及1．36±0．29）明显高于对照组（0．45±0．18），分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；重度子痫前期组高于妊娠期高血压组及轻度子痫前期组，分别比较，差异也均有统计学意义（P〈0．05）。结论妊娠期高血压疾病孕妇血清、脐血及胎盘组织中HSP70表达水平明显升高，且随疾病程度加重其表达水平明显升高。提示HSP70在妊娠期高血压疾病发病中可能起一定作用。

早发型重度子痫前期孕妇血浆及胎盘组织中血栓调节蛋白的表达

目的 探讨孕妇血浆和胎盘组织中的血栓调节蛋白（TM）表达与早发型重度子痫前期发病的关系.方法 选择2012年6月至2014年2月在徐州医学院附属徐州市妇幼保健院住院分娩的重度子痫前期孕妇60例.其中,早发型重度子痫前期孕妇30例为早发型组,晚发型重度子痫前期孕妇30例为晚发型组,选择同期健康孕妇并根据其孕周不同分为早发型对照组（孕周28-33周＋6）23例和晚发型对照组（孕周≥34周）30例.采用ELISA法检测各组孕妇血浆中TM的水平,免疫组化SP法检测胎盘组织中TM蛋白的表达,逆转录（RT）-PCR技术检测胎盘组织中TM mRNA的表达.结果（1）早发型组孕妇血浆TM水平为（90.8 ± 6.9）μg/L,晚发型组为（87.5 ± 7.0）μg/L,早发型对照组为（37.7±2.3）μg/L,晚发型对照组为（37.7±2.5）μg/L.早发型组孕妇血浆TM水平分别高于其他3组,但早发型组与晚发型组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;早发型组与早发型对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;晚发型组高于晚发型对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）.（2）TM蛋白主要定位于胎盘合体滋养细胞和血管内皮细胞的胞膜及胞质中,早发型组胎盘组织中TM蛋白的阳性表达率（47%,14/30）显著低于晚发型组（90%,27/30）、早发型对照组（91%,21/23）及晚发型对照组（93%,28/30）,分别比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;晚发型组与晚发型对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;早发型对照组与晚发型对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.（3）早发型组胎盘组织中TM mRNA的表达水平为0.14±0.06,晚发型组为0.89±0.23,早发型对照组为0.88±0.22,晚发型对照组为0.93±0.19,早发型组胎盘组织中TM mRNA表达水平显著低于对其他3组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;晚发型组与晚发型对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;早发型对照组与晚发型对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 孕妇胎盘组织中TM表达水平降低可能与早发型重度子痫前期的进展有关;早发型重度子痫前期的发病机制可能与晚发型有所不同.

二甲双胍对雌激素诱导的子宫内膜癌细胞增殖及ER表达的影响

目的 探讨二甲双胍对雌激素诱导的子宫内膜癌细胞增殖及ER表达的影响.方法 不同浓度（分别为0.5、1、5、10、15、20、25、30 mmol/L）二甲双胍作用于子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞不同时间（分别为24、48、72 h）后,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测Ishikawa和HEC-1A细胞的增殖情况.17β雌二醇（1×10-6mol/L）单独及联合二甲双胍（5 mmol/L）分别作用Ishikawa和HEC-1A细胞24 h后,通过5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记法检测Ishikawa和HEC-1A细胞的增殖情况;不同浓度（分别为1、5、15 mmol/L）二甲双胍作用24 h后,实时荧光定量PCR技术检测Ishikawa和HEC-1A细胞中原癌基因c-fos和c-myc mRNA的表达水平,蛋白印迹法检测Ishikawa和HEC-1A细胞中ERα和ERβ蛋白的表达水平.结果 MTT比色法检测显示,与对照（仅加入培养基）细胞比较,上述不同浓度的二甲双胍作用不同时间后,Ishikawa和HEC-1A细胞增殖的抑制率均明显增加（P＜0.05）,且随着二甲双胍浓度的增加及作用时间的延长,其抑制作用呈明显的剂量及时间依赖性（P＜0.05）.BrdU标记法检测显示,17β雌二醇联合二甲双胍作用后Ishikawa、HEC-1A细胞的增殖率分别为（62±7）％、（72±6）％,分别与17β雌二醇单独作用后的Ishikawa、HEC-1A细胞的增殖率[分别为（124±16）％、（109±5）％]比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）.实时荧光定量PCR技术检测显示,不同浓度（分别为1、5、15 mmol/L）二甲双胍作用后,Ishikawa、HEC-1A细胞中c-fos和c-myc mRNA表达水平均逐渐降低,除HEC-1A细胞中1 mmol/L的二甲双胍作用后c-myc mRNA表达水平与相应对照（即二甲双胍浓度为0）细胞比较差异无统计学意义（P=0.074）外,其余浓度分别与相应对照比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;蛋白印迹法检测显示,随着二甲双胍浓度的增加,Ishikawa、HEC-1A细胞中ERα蛋白的表达水平逐渐下降,而ERβ蛋白的表达水平逐渐增加,其浓度为5 mmol/L和15 mmol/L时分别与相应对照细胞比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 二甲双胍能抑制雌激素对子宫内膜癌细胞的促增殖作用,其作用机制可能与二甲双胍调节ER的表达进而影响原癌基因表达有关.