《2015年世界卫生组织慢性乙型肝炎病毒感染预防、关怀和治疗指南》解读:慢性乙型肝炎的抗病毒治疗策略比较

自2014年世界卫生组织（WHO）发布了第一部关于HCV的筛查、管理和治疗指南后,2015年3月WHO颁布了首部关于HBV的预防、管理和治疗指南,2015年5月15日国内发布了WHO慢性乙型肝炎病毒感染预防、关怀和治疗指南政策简报,指南原文共166页,政策简报封面照片隐含了指南主要针对全球中低收入国家（LMIC）。

血清趋化因子对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者经聚乙二醇干扰素α治疗后持续病毒学应答的影响

目的研究HBe Ag阳性慢性乙型肝炎患者聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)治疗过程中血清γ-干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、γ-干扰素诱导单核因子(Mig)及调节激活正常T淋巴细胞表达和分泌因子(RANTES)水平变化特点及其对PEG-IFN疗效的预测价值。方法收集2012年2月-2013年12月于徐州医学院附属医院接受PEG-IFNα-2b治疗的HBe Ag阳性CHB患者53例,其中46例完成48周治疗后继续随访24周,根据有无出现持续病毒学应答(SVR)分为A组(出现SVR,n=17)和B组(未出现SVR,n=29)。测定患者基线,治疗12、24、48周及治疗后24周外周静脉血清IP-10、Mig、RANTES、HBV DNA、HBs Ag及ALT水平。计量资料两组间比较采用t检验,组内两两比较采用配对t检验,相关性采用Pearson相关系数分析。计数资料组间比较采用χ2检验。结果患者基线血清IP-10、Mig水平A组显著高于B组,HBs Ag水平A组则低于B组,差异均有统计学意义(t值分别为2.696、2.963、2.401,P值均<0.05)。患者基线IP-10、Mig与ALT水平呈正相关,差异均有统计学意义(r值分别为0.570、0.317,P值均<0.05)。与基线比较,治疗12、24周时的血清HBV DNA、HBs Ag、ALT和Mig水平均显著降低,差异均有统计学意义(12周时t值分别为2.126、2.217、2.376、2.776,24周时t值分别为2.635、2.453、2.627、2.803,P值均<0.05)。46例患者治疗前、治疗12及24周时2组患者的IP-10、Mig水平比较差异均有统计学意义(P值均<0.05);A组内,与基线比较,12、24周时的Mig水平显著降低,差异有统计学意义(t值分别为3.061、3.105,P值均<0.01);B组内,与基线相比,24周时血清Mig水平显著降低(t=2.632,P<0.01)。基线血清IP-10、Mig和HBs Ag水平对SVR均有预测价值(P值均<0.05)。46例患者中基线Mig>80 pg/ml的20例患者中获得SVR 12例(60.0%),基线Mig<80 pg/ml的26例患者中仅有5例(19.2%)实现SVR,两者相比差异有统计学意义(χ2=8.06,P<0.01);46例患者中基线IP-10>120 pg/ml的25例患者中获得SVR有12例(48.0%),基线IP-10<120pg/ml的21例患者中5例(23.8%)实现SVR,两者相比差异有统计学意义(χ2=3.86,P<0.05)。结论基线血清IP-10、Mig水平对经PEG-IFNα治疗的HBe Ag阳性CHB患者获得SVR有一定的预测价值,其中Mig预测价值较高。

慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后TRECs含量的变化

观察慢性乙型肝炎(CHB)患者经抗病毒治疗前后T细胞受体重排删除环(TRECs)含量的变化。利用实时荧光定量PCR方法检测15例干扰素、13例阿德福韦酯治疗前后的CHB患者及27例健康体检者外周血单个核细胞(PBMCs)中TRECs的含量。CHB患者中TRECs含量为(7.29±2.26)copies/103PBMCs,低于健康体检者TRECs水平(10.48±6.90)copies/103PBMCs,P<0.05;TRECs含量与HBV载量直线相关分析r=0.06,P=0.975;干扰素组治疗后TRECs含量(12.77±5.25)copies/103PBMCs,高于治疗前(7.14±2.69)copies/103PBMCs,P<0.05;阿德福韦酯组治疗后TRECs含量(8.63±3.26)copies/103PBMCs与治疗前(7.46±1.73)copies/103PBMCs比较,P>0.05,差异无统计学意义。CHB患者组中TRECs含量低于正常对照组,TRECs含量与HBV载量无明显相关性,干扰素治疗能提高CHB患者中TRECs的含量,而阿德福韦酯无此作用。

740例HBV感染者血清HBV逆转录酶区耐药位点分析

目的：了解乙型肝炎病毒（HBV）感染者 HBV 基因型的构成状况及 HBV P 区基因变异的特点。方法对2010年8月～2011年10月送检的740份 HBV 感染者血清，采用 ABI 基因测序仪检测 HBV 耐药位点和基因型，应用 SPSS15.0软件进行统计分析。结果在740例 HBV 感染者中，检出 HBV B 基因型40例（5.41%），C 基因型695例（93.92%），D 基因型5例（0.68%）；与拉米夫定、阿德福韦酯和恩替卡韦耐药明确相关的位点突变377例（50.95%），其中195例（51.72%）患者既往有明确的应用核苷（酸）类似物（NA）史，在这195例发生耐药的患者中，B基因型12例，C 基因型183例，两基因型间耐药发生率无明显差异，他们中包括 CHB 患者118例，肝硬化患者77例，主要耐药变异模式为 M204V＋L180M、M204I、M204I＋L180M 和 A181V，两组间 ALT、HBV DNA 载量和主要耐药变异模式检出率均无统计学差异；HBV DNA 载量是影响 NA 耐药的相关因素（x2=0.496，P〈0.001），但耐药与年龄、性别、疾病严重程度（CHB 或肝硬化）和 ALT 水平无显著性相关；此外，本文还检出多处未知变异位点，如 rt64、rt126、rt178和 rt129等。结论核苷（酸）类似物的使用将伴随病毒变异的发生，其耐药基因变异位点具有一定的特点及规律性，动态监测 HBV DNA 载量对早期发现耐药有一定的价值。

13例甲型H1N1流感危重症病例临床资料回顾性分析

目的探讨甲型H1N1流感危重症患者的临床特征及部分实验室检查的特点。方法回顾性分析13例甲型H1N1流感危重症患者临床资料。结果①13例中女性11例,孕妇7例,多以发热、咳喘等呼吸道症状就诊。②13例中有11例发生轻度肝功能损伤,其中7例孕妇均发生肝功能的损伤,主要表现为谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)不同程度的增高,肝功能损伤多见于病程的第1周;12例出现乳酸脱氢酶(LDH)的升高;8例出现肌酸激酶(CK)的升高。③13例患者最终死亡2例,均为女性,入院时均有ALT、AST的轻度升高,而LDH和CK明显升高,均于发生少尿后48 h内死亡。结论女性尤其是孕妇感染甲流H1N1容易发展为危重症;多数危重症甲型H1N1流感患者伴有轻度肝功能损伤;危重症甲型H1N1流感患者伴有LDH及CK明显升高者预后不良。

病毒性肝炎铁代谢异常的研究

铁作为机体必需的营养元素,起着重要的生物学功能。但是铁过多也会对细胞和组织产生危害。病毒性肝炎患者常有铁代谢的异常,甚至有严重的肝铁蓄积。肝铁蓄积不仅加重肝损害,而且可能影响干扰素的应答。本文就病毒性肝炎铁代谢异常近年的研究进展进行综述。

徐州地区汉族人及慢性乙型肝炎HLA-A基因多态性的研究

探讨慢性乙型肝炎与HLA-A位点的等位基因多态性。用PCR-SSP方法对徐州地区汉族正常组和慢性乙型肝炎组的HLA-A基因多态性进行分析。HLA-A*0201-17出现的频率在慢性乙型肝炎组为45.57%,高于正常组的29.69%,P=0.002<0.05,RR=1.983,(95%C I:1.227-3.080),具有统计学意义。HLA-A*0201-17与慢性乙型肝炎较高的相关性,可能为易感基因。

自身免疫肝病抗体谱检测的临床意义

目的通过自身免疫肝病抗体谱的检测,为临床对自身免疫性肝炎(AIH)的诊断及治疗提供一项科学依据。方法采用线性免疫(Liver-lia)分析法对肝功能异常患者进行血清自身免疫肝病抗体谱检测。结果本研究共检测955例患者,其中有一项或多项自身抗体阳性的患者共112例,自身抗体阳性检出率为11.7%;抗线粒体(AMAM2)抗体、抗-SP100抗体、抗-gp210抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)及隐源性肝炎患者中检出率显著高于其他各类型肝炎(P<0.05),抗肝肾微粒体1(LKM-1)抗体在酒精性肝炎患者中检出率显著高于其他各类型肝炎(P<0.05)。结论自身免疫肝病抗体谱检测,有利于临床对Ⅰ～Ⅲ型AIH的诊断及鉴别诊断,尤其对隐源性肝炎患者确诊为PBC及AIH提供了科学依据。

CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞和树突状细胞在HBV感染中的相互作用

CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)是迄今为止所发现的最重要的免疫抑制细胞,几乎抑制所有的免疫反应,在机体免疫系统中发挥负向调节作用。树突状细胞(DC)作为一类专职的抗原递呈细胞,在抗原识别、递呈中发挥重要作用,具有启动免疫应答和诱导免疫耐受的双重特性,对机体抗乙型肝炎病毒(HBV)起关键作用。作为在HBV致病机制中起重要作用的两个免疫细胞群——Treg与DC,探讨二者在慢性乙型肝炎发病机制中的相互作用,必将为进一步探索治疗HBV提供新的思路。

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞Tim-3表达的检测及意义

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单核细胞中T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)的表达及对其炎症因子生成的影响。方法利用多色流式技术和荧光实时定量PCR(qRT-PCR),分别检测不同状态的CHB患者外周血单核细胞亚群表面Tim-3分子和Tim-3 mRNA表达水平。给予重组人galectin-9和脂多糖(LPS)共刺激CHB活动期患者外周血单核细胞,用ELISA检测培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平。结果慢乙肝免疫耐受期患者(IT)外周血单核细胞表面Tim-3表达水平显著高于健康对照组(HC)和免疫活动期患者(IA)(P<0.01),其中IT患者CD14+CD16-和CD14+CD16+单核细胞亚群中Tim-3的表达均高于IA患者,差异均有统计学意义。qRT-PCR结果进一步证实IA患者外周血单核细胞中Tim-3 mRNA的表达高于HC(P=0.040)。IA患者CD14+单核细胞上Tim-3的表达与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平呈正相关(r=0.362,P=0.028)。重组人galectin-9和LPS共刺激IA患者外周血单核细胞比单独使用LPS刺激分泌更高水平的TNF-α,IL-1,IL-6。结论 CHB患者外周血单核细胞Tim-3表达上调,与血清ALT水平呈正相关,Tim-3/galectin-9通路能够促进LPS诱导的单核细胞的炎症因子的分泌。

腹腔注射刀豆蛋白A诱导昆明小鼠肝纤维化模型的建立

目的建立昆明小鼠肝纤维化模型。方法48只昆明小鼠随机分组。实验组40只,腹腔注射20mg/kg剂量的刀豆蛋白A(ConA),每周一次,共9次。对照组8只,每周一次腹腔注射PBS。所有小鼠在每次注射后24h采血测ALT、AST。实验组分别于第6、7、8、9次注射后1周各处死8只小鼠,余8只第9周起停止注射,第13周处死。对照组第9次注射后1周处死。所有小鼠处死后取肝脏计算肝脏指数,并作病理检查。结果实验组第8次注射后出现典型肝纤维化,停止刺激4周仍然有纤维化表现。结论反复腹腔注射ConA可以建立昆明小鼠肝纤维化模型。

布鲁杆菌病患者合并人苍白杆菌感染的一例报道

布鲁杆菌（Brucella）是一类革兰阴性短小杆菌，易感染牛、羊、猪等家畜，常引起母畜传染性流产，人类与病畜接触或食用病畜肉、乳及乳制品后，也可引起感染，表现为反复波浪式热型，逐渐转为慢性，从而引起关节和神经系统症状，称此病为布鲁杆菌病（Brucellosis）。

活动性慢性乙型肝炎患者特异性CD8^+T细胞转录因子T-bet表达及临床意义

目的分析转录因子T-bet在活动性慢性乙型肝炎患者外周血HBV特异性CD8+T细胞中的表达及其临床意义。方法用HBV肽五聚体结合流式细胞仪检测HLA-A2阳性的活动性慢性乙型肝炎患者和急性乙型肝炎患者外周血HBV特异性CD8+T细胞中T-bet的表达。比较分析HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达在急性、慢性乙型肝炎之间的差异,并进一步分析慢性乙型肝炎患者HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达与HBV DNA水平、ALT水平以及临床预后之间的相关性。结果急性乙型肝炎患者外周血HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达水平显著高于活动性慢性乙型肝炎患者。活动性慢性乙型肝炎患者及CHB患者外周血HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达水平与HBV DNA水平及ALT水平无明显相关性,HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达水平高的活动性慢性乙型肝炎患者发生HBeAg血清转换率显著升高。结论活动性慢性乙型肝炎患者特异性CD8+T细胞转录因子T-bet表达与HBV感染的免疫控制密切相关。

肝右叶发育不良并发布加综合征导致的肝硬化1例报道

国内文献共报道肝右叶发育不良55例[1-6],其具有独特的影像学特点。布加综合征（BCS）[7,8]是指肝静脉和（或）邻近下腔静脉部分或完全阻塞所引起的疾病,以肝脏排血障碍为主要临床表现,其发病率低,临床表现与肝硬化等常见疾病相似,易于误诊。

荧光定量PCR检测TRECs的标准品质粒和标准曲线的构建

目的构建荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环（TRECs）的标准品质粒和标准曲线。方法对TCRδ基因进行序列分析，设计一对引物和探针。提取正常人外周血单个核细胞中的DNA，经普通PCR扩增，产物纯化后与pUCM-T载体连接并转化入大肠杆菌DH5α，筛选得到重组成功的质粒。结果重组质粒测序后显示目的片段序列正确，表明TRECs基因片段成功克隆。以10^3～10^7copies／ml不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增后，统计学分析显示标准品浓度的对数与Ct值之间存在良好的线性关系（r=-0．998，P＜0．01）。结论所构建的TRECs标准品特异性和线性关系较好。

基因1b型不同准种株HCV核心蛋白真核表达质粒的构建及表达

目的构建基因1b型丙型肝炎病毒(HCV)不同准种株截短片段核心蛋白(CP)绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白表达质粒。方法用聚合酶链反应(PCR)扩增获得等长度片段的CP基因:氨基酸(aa)长度为癌中心株(T)∶T∶1-172aa、癌旁株(NT)∶1-172aa及C191(HCV-J6)∶1-172aa,扩增产物用NheI及EcoRI双酶切后将其插入到真核表达质粒pEGFP-N1中,转染不同细胞系,用荧光显微镜及流式细胞仪观察GFP的表达。结果PCR扩增、序列分析验证,T、NT及C191截短片段CP基因均成功克隆到pEGFP-N1中,在转染HepG2、chang-liver48h后,用荧光显微镜及流式细胞仪均观察到GFP的表达。结论构建基因1b型HCV不同准种株截短片段CP的真核表达质粒获得成功,可用于不同准种株CP的功能研究。

干扰素信号通路及其负调控因素的研究进展

干扰素通过与细胞膜上的特异性受体结合,引发级联信号放大过程,将信号传递到胞核内,调控一系列基因表达相应抗病毒蛋白,进而发挥抗病毒作用。干扰素信号通路包括多条途径,其中贾纳斯激酶-信号转导和转录活化因子(JAK-STAT)通路是经典途径。目前证实有信号转导抑制因子(SOCS)、蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)、PIAS 3个负调控因子家族。SOCS同PTP家族中的SHP-1均是JAK-STAT信号转导负反馈圈的重要组成部分;PIAS是一个双向调节系统,在特定细胞因子刺激下,能增减STATs活化的数量。

CHB患者Th17-Treg失衡中IL-21的作用及机制

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周Th17/调节性T细胞(Treg)失衡中IL-21的作用及其初步机制。方法流式细胞仪分别检测59例CHB患者和20例健康人外周血细胞中Th17细胞和Treg细胞频数,同时以ELISA法检测血清细胞因子IL-21、IL-17、IL-10、TGF-β水平。体外分别以IL21、IL-2刺激CHB患者外周血单核细胞(PBMC),以实时PCR检测培养细胞转录因子RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平,以ELISA法检测培养上清细胞因子IL-17、IL-10和TGF-β水平。结果与正常人群相比,IL-21、IL1 7、TGF-β水平显著升高(P均<0.05),CHB患者外周Th17/Treg比例显著升高(P<0.05),IL-21水平与Th1 7/Treg比例呈正相关(P=01.008)。与IL-2相比.IL-21刺激CHB患者PBMC的RORγt mRNA表达水平明显升高(P=0.016)而Foxp3 mRNA表达水平明显降低(P=0.018),相对应的培养上清中,IL-1 7水平显著上升(P=0.049)而IL-10、TGF-β水平明显降低(P=0.017,P=0.004)。结论 C、HB患者中IL-21能通过提高RORγt mRNA表达,同时抑制Foxp3 mRNA表达进而促进Th1 7/Treg失衡。

浅析细菌耐药机制及控制对策

随着抗菌药物的广泛应用，细菌的耐药性越来越引起人们的重视，这给临床治疗带来诸多困难，导致疗程延长和死亡率升高，极大地影响着人类的身体健康，成为全球化的重点问题。本文就近年来国内外对细菌的耐药机制及，耐药性的控制对策做一综述。