自身免疫病的分子遗传学

自身免疫病影响着大约 5 %的人口 ,这类疾病的特点是患者体内存在大量的针对自身抗原的自身抗体 ,这些自身抗体通过不同的模式引起机体的损伤。一些严重的自身免疫病如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮可引起致残和死亡。总之 ,自身免疫病的发病率和致残率呈现出一个全球性的健康问题。由于这种健康问题巨大的严重性和广泛性 ,引起了全球性的自身免疫病病因学的研究热潮。多代家系和大量双胞胎的流行病学调查清晰的显示自身免疫病遗传因素的存在。至少有 2 0多个疾病易感基因被认为与环境因素相互作用引起自身免疫病的发生和发展。基于这种遗传研究热潮 ,多个遗传研究小组采用基因组范围的易感基因的扫描工作 ,在人类和鼠模型中鉴定出多个遗传易感位点 ,这些位点可能含有自身免疫病的致病基因。

聚类分析在自身免疫病基因表达谱研究中的初步应用

目的 探讨聚类分析方法在自身免疫病基因表达谱研究中的应用价值。方法 从正常对照及自身免疫病患者外周血提取总RNA ,逆转录合成单链、双链cDNA后 ,体外转录合成生物素标记的cRNA与基因芯片进行杂交 ,再经抗原抗体反应和标记荧光染料Cy3标记后 ,用基因芯片扫描仪进行图像扫描。经QuantArray分析软件将扫描的图像信息转化为数据。然后 ,进一步将标准化的数据用GeneSpring分析软件进行试验样本和基因的聚类分析。 结果 10例系统红斑狼疮 (SLE)、1例多发性肌炎 (PM )和 1例类风湿关节炎 (RA)患者与 1名正常对照外周血细胞的基因表达谱是不同的 ,患者之间的表达谱因临床表现的异质性 ,其表达谱也有差别 ,但SLE的聚类可与PM、RA相区分 ,同一SLE患者 ,2次采血所得的表达谱具有极强的相似性。基因聚类分析显示 ,具有相似功能的基因具有相似表达模式 ,据此可发现许多已知基因的免疫功能。结论 聚类分析方法能根据基因表达谱 ,将基因进行功能分类 ,故可将自身免疫病的样本进行疾病分类。因此 。

系统性红斑狼疮患者及其家庭成员外周血基因表达谱的研究

目的研究家族性SLE患者、一级亲属和正常人外周血基因表达谱的改变,探讨家族性SLE发病机制。方法首先从外周血提取总RNA,逆转录合成单链、双链cDNA后,体外转录合成生物素标记的cRNA与基因芯片进行杂交,再通过抗原抗体反应机制标记上荧光染料Cy3后,使用基因芯片扫描仪进行图像扫描。使用分析软件进行表达差异和聚类分析。结果在3000多个基因中,鉴定出59个基因存在表达差异,其中有34个基因表达上调,25个基因表达下调,这与散发性SLE患者的表达差异基因基本相同。在34个表达上调基因中,有22个基因在SLE患者和其未患病的姐妹中都表达上调;在25个表达下调的基因中,有17个基因在SLE患者和其未患病的姐妹中都表达下调。聚类分析显示根据外周血基因表达谱可明确地将SLE患者、未患病亲属及正常人对照区分开。结论该基因芯片技术有较高的重复性和稳定性,能有效地进行家族性SLE疾病相关基因的初步筛选。