原发免疫性血小板减少症患者外周血Th22细胞水平的变化及意义

目的:观察Th22细胞在原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中的变化。方法:用流式细胞术分别检测ITP初诊组、治疗后完全反应(CR)组及正常对照组外周血中Th22细胞所占比例。用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测各组外周血中IL-22、TGF-β、TNF-α、IL-6的表达水平。用半定量RT-PCR分别检测各组外周血中IL-22 mRNA的表达水平。并逐层分析比较。结果:ITP初诊组和治疗后组Th22细胞比例、外周血中IL-22、TNF-α、IL-6的表达水平以及IL-22mRNA的表达水平均明显高于正常对照组(P<0.01),治疗后组Th22细胞比例、IL-22、TNF-α、IL-6、IL-22 mRNA的表达水平均低于初诊组(P<0.05);ITP初诊组和治疗后组TGF-β水平分别为(3.27±1.02)ng/L、(5.41±1.69)ng/L明显低于正常对照组(9.65±2.78)ng/L(P<0.01),且初诊组TGF-β的水平低于治疗后组(P<0.05)。结论:ITP患者体内Th22细胞数量增加、TNF-α、IL-6的表达升高、TGF-β的表达减低。

CD4^+CD25^+调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化及意义

目的:通过检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的比例及变化规律,探讨Treg细胞在ITP发病中的可能作用。方法:采集30例急、慢性ITP患者治疗前、后和20例正常对照者的外周血标本,流式细胞仪检测Treg细胞的比例及变化,并评价其与血小板计数的相关性。结果:30例ITP患者治疗前Treg细胞的比例为(1.59±0.86)%,明显低于正常对照组(3.87±1.73)%(P<0.01),治疗后其比例显著升高,为(2.51±1.17)%,明显高于治疗前(P<0.01),但仍低于正常对照组(P<0.01);Treg细胞在治疗显效和良效组显著高于进步和无效组(P<0.01),进步组与无效组比较差异无统计学意义(P>0.05);此外治疗前后Treg细胞比例与血小板计数呈显著正相关(P<0.05)。结论:ITP患者外周血Treg细胞比例降低,但随免疫抑制治疗的疗效逐渐升高,提示CD4+CD25+调节性T细胞可能参与了ITP的发病机制。

骨髓增生异常综合征患者外周血Th22细胞水平的变化及意义

目的:研究Th22细胞在骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血中的表达水平,并探讨其意义。方法:①用流式细胞术分别检测MDS较高危组、较低危组及正常对照组外周血中Th22细胞所占比例。②用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测各组外周血中IL-22、TGF-β、TNF-α、IL-6的表达水平。③用半定量RT-PCR分别检测各组外周血中Th22细胞的相关转录因子IL-22 mRNA的表达水平,并逐层分析比较。结果:MDS较高危组、较低危组Th22细胞比例、IL-22、TNF-α、IL-6、TGF-β、IL-22 mRNA的表达水平分别为(0.53±0.13)%、(13.51±3.87)ng/L、(146.74±29.74)ng/L、(77.58±16.23)ng/L、(5.21±1.65)ng/L、0.29±0.06和(0.85±0.21)%、(16.13±4.82)ng/L、(182.34±37.55)ng/L、(95.62±20.28)ng/L、(7.46±2.17)ng/L、0.38±0.07,均低于正常对照组的(1.24±0.31)%、(19.72±6.55)ng/L、(238.32±50.41)ng/L、(137.95±27.08)ng/L、(9.65±2.78)ng/L、0.49±0.09,差异有统计学意义(P<0.05),MDS较低危组Th22细胞比例、IL-22、TNF-α、IL-6、TGF-β、IL-22 mRNA的表达水平均高于较高危组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MDS患者体内Th22细胞数量减少,可能与MDS的发生发展呈负相关,提示MDS患者体内TNF-α、IL-6的表达减低及负向免疫细胞增多可能抑制Th22细胞的分化发育。

免疫相关性血细胞减少症41例临床分析

目的:观察41例免疫相关性血细胞减少(immunorelated hemocytopenia,IRH)或全血细胞减少症(immunorelated pancytopenia,IRP)患者的临床特点,以提高对本病的认识。方法:分析41例IRH/IRP患者临床表现、血常规、骨髓象、骨髓单个核细胞抗人球蛋白(BMMNC-Coombs)试验、抗核抗体ANA和ENA抗体谱、T淋巴细胞亚群、染色体核型等以及对肾上腺糖皮质激素、环孢素A等免疫抑制剂的治疗反应。结果:本组病例临床主要表现为贫血、出血、感染;血常规呈三系、二系或一系减少,网织红细胞百分比不低;骨髓增生以活跃或明显活跃为主(82.9%),红系比例多增高;BMMNC-Coombs试验阳性率78.0%;除外了再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)、阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)等疾病;小部分病例(19.5%)并发系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病;对肾上腺糖皮质激素、环孢素A等治疗有良好反应。结论:IRH/IRP是由于T淋巴细胞调控异常致B淋巴细胞产生针对骨髓未成熟造血细胞的自身抗体而使血细胞减少,BMMNC-Coombs试验对IRH/IRP的诊断具有较高的灵敏性和特异性,多数病例对肾上腺糖皮质激素等免疫抑制剂反应良好。

猪抗人淋巴细胞球蛋白联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血患者22例

重型再生障碍性贫血（SAA）是一种获得性骨髓造血功能衰竭综合征，许多患者在短期内死于严重感染和出血。抗人胸腺细胞球蛋白（ATG）联合环孢素（CsA）的免疫抑制治疗（IST）有效率可达60％～80％，已成为年龄≥40岁或年龄〈40岁但无HLA相合同胞供者SAA患者的首选治疗方案。

急性髓系白血病患者外周血Th22细胞水平的变化

研究已经证实，急性髓系白血病（AML）患者免疫功能低下，体内树突细胞（DC）、浆细胞样DC（pDC）、Thl7细胞等数量减少、功能减低，而调节性T细胞（Treg）数量增加、功能增强^[1-2]。Th22型细胞是一种最新发现的独立的辅助性T细胞亚群，是体内分泌IL-22的主要细胞，具有促进机体固有免疫和适应性免疫应答，使肿瘤细胞的周期停滞在G2／M期，

急性淋巴细胞白血病患者外周血Th22细胞水平的变化及意义

目的研究Th22细胞在急性淋巴细胞白血病（ALL）患者外周血中的表达水平，并探讨其意义。方法用流式细胞术分别检测B系ALL（B—ALL）及T系ALIJ（T—ALL）初诊患者、完全缓解期患者及正常对照组外周血中Th22细胞所占比例。用酶联免疫吸附实验（ELISA）分别检测各组外周血血清中IL-22、转化生长因子（TGF）-β、TNF-α、IL-6水平。用半定量RT—PCR方法分别检测各组外周血单个核细胞中Th22细胞的相关转录因子IL-22mRNA的表达水平。并逐层分析比较。结果初诊B—ALL、T—ALL患者Th22细胞比例，血清IL-22、TNF-α、IL-6水平及单个核细胞IL-22mRNA的表达水平分别为（0．44±0．10）％、（10．94-3．4）ng／L、（110．7±26．5）ng／L、（60．2±13．8）,lg／L、0．17±0．04和（0．46±0．11）％、（11．2±3．5）ng／L、（114．6±27．0）rig／L、（58．7±12．4）ng／L、0．19±0．04；缓解期B—ALL、T—ALL患者分别为（0．59±0．15）％、（14．3±4．1）ng／L、（142．5±32．7）ng／L、（83．7±18．9）ng／L、0．25±0．06和（0．60±0．15）％、（14．6±4．3）rig／r,、（140．4±31．4）ng／L、（81．4±18．2）ng／L、0．26±0．06，均明显低于正常对照组的（1．24±0．31）％、（19．7±6．6）ng／]J、（238．3±50．4）ng／L、（138．0±27．1）ng／L、0．49±0．09，差异有统计学意义（P〈0．01）。缓解期B—ALL、T—ALL患者Th22细胞比例，血清IL．22、TNF—Or．、IL-6水平及单个核细胞IL-22mRNA的表达水平均高于初诊B-ALL、T—ALL患者，差异有统计学意义（P〈0．05）。B—ALL与T—ALL比较差异无统计学意义（P〉0．05）。初诊B．ALL、T．ALL和缓解期B—ALL、T．ALL患者TGF—B水平分别为（30．6±8．2）ng／L、（31．4±8．8）ng/L和（24．2±5．8）ng／L、（25．1±6．1）ng／L，明显高于正常对照组的（9．6±2．8）ng／L，差异有统计学意义（P〈0．01），且初诊患者TGF．13水平高于缓解期患者（P〈0．05）；B—ALL与T—ALL比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ALL患者体内Th22细胞数量减少，可能与ALL的发生发展呈负相关，提示ALL患者体内TNF-α、IL-6的表达减低及TCF-β的过度表达可能抑制Th22细胞的分化发育。

混合表型急性白血病32例临床研究

目的 分析混合表型急性白血病（MPAL）的临床、生物学特征和预后.方法 总结2003年1月至2009年6月收治的32例MPAL患者资料,分析其骨髓细胞形态学、细胞免疫表型、细胞遗传学和分子生物学特点.32例患者采用了兼顾髓系、淋系的联合化疗方案治疗,2例在缓解期进行了异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）.对患者进行疗效和生存分析.结果 ①MPAL在急性白血病中的发生率为2.6%,32例MPAL患者中髓系和B系（M/B）表型16例（50.0%）,髓系和T系（M/T）表型14例（43.8%）,髓系、B、T三系（M/B/T）表型和B/T系表型各1例（3.1%）.②CD34和HLA-DR阳性率分别为87.5%和62.5%.③异常核型发生率为70.0%（30例中21例）,涉及Ph、11q23和复杂核型在内的结构重排和（或）数目异常.④32例MPAL患者总完全缓解（CR）率75.0%,2年总生存（OS）率和无病生存（DFS）率分别为14.8%和14.2%.M/B和M/T表型CR率分别为75.0%和71.4%.M/B和M/T表型患者的OS和DFS率比较差异无统计学意义.2例allo-HSCT患者均未复发,生存期延长.结论 MPAL是一类异质性的急性白血病亚型,其不良预后可能与染色体异常发生率高、CD34高表达和易于髓外浸润等因素有关.兼顾髓系、淋系的联合化疗和包括HSCT的强烈治疗可能有助于提高疗效.

再生障碍性贫血患者外周血Th22细胞水平的变化及意义

目的观察Th22细胞在再生障碍性贫血（AA）患者外周血中的水平变化，并探讨其意义。方法选择淮安市第二人民医院血液科2011年1月至2012年6月住院的重型初诊AA患者11例，非重型初诊AA患者12例，重型治疗后有效患者12例，非重型治疗后有效患者12例，以12名健康体检者作为对照组。用流式细胞术分别检测各组外周血中Th22细胞所占比例。ELISA法分别检测各组外周血中白细胞介素22（IL-22）、转化生长因子β（TGF-β）、肿瘤坏死因子仪（TNF-a）、白细胞介素6（IL-6）的表达水平。用半定量反转录（RT）一PCR分别检测各组外周血中IL-22mRNA的表达水平，并逐层分析比较。结果AA重型初诊组和重型治疗有效组Th22细胞比例、IL-22、TNF-a、IL-6、IL-22mRNA的表达水平均明显高于健康对照组[4．3％±1．4％和2．6％±0．6％比1．2％±0．3％、（57±17）和（34±10）比（19±6）ng／L、（497±123）和（314±79）比（228±50）ng/L、（322±88）和（187±45）比（134±26）ng／L、1．65±0．51和0．92±0．28比0．47±0．09，均P〈0．05]；治疗有效组低于初诊组（均P〈0．05）。在非重型患者中亦有类似结果。重型初诊患者以上各项表达水平均高于非重型初诊患者（均P〈0．05），但重型治疗有效组与非重型治疗有效组间差异无统计学意义（均P〉0．05）。AA重型初诊组和重型治疗有效组TGF-β水平分别为（3．4±1．1）、（5．8±1．7）ng/L，明显低于健康对照组[（9．7±2．8）ng/L，P〈0．05]，且初诊组低于治疗有效组（P〈0．05）；在非重型患者亦有类似结果；且重型初诊患者低于非重型初诊患者（P〈0．05），但重型治疗有效组与非重型治疗有效组问差异无统计学意义（P〉0．05）。结论AA患者体内Th22细胞数量增加，可能与AA的发生发展呈正相关，提示AA患者体内TNF-a、IL-6的表达升高及TGF-β的表达减低可能促进Th22细胞的分化发育。

雷公藤内酯醇对原发免疫性血小板减少症患者浆细胞样树突细胞功能及成熟的影响

目的探讨雷公藤内酯醇对原发免疫性血小板减少症（ITP）患者浆细胞样树突细胞（pDC）功能及成熟的影响。方法取22例初治ITP患者（初治组）、22例糖皮质激素治疗后完全缓解（CR）ITP患者（CR组）及22名健康志愿者（正常对照组）外周静脉血，分离单个核细胞，用流式细胞术分选pDC，分别加入0、5、10、30μg/L的雷公藤内酯醇共孵育，24h后收集上清液，用ELISA法检测IFN-α、IL-6、TNF—α水平；5d后收集细胞，用流式细胞术检测髓样树突细胞（mDC）CD11c、CD80、CD86表达，光镜下观察mDC的形态，电镜观察mDC的超微结构。结果加入10μg/L雷公藤内酯醇后初治组IFN—α、IL-6、TNF—α水平分别为（451．32±85．77）、（105．68±23．85）、（135．78±30．62）ng／L，CR组分别为（391．71±72．49）、（84．73±17．77）、（108．16±23．21）ng／L，正常对照组分别为（335．51±67．54）、（73．62±21．82）、（95．58±32．85）ng／L，初治组及CR组高于正常对照组（P〈0．05），初治组高于CR组（P〈0．05），并呈雷公藤内酯醇浓度依赖性（P〈0．05）；初治组及CR组mDC表型CD11c、CD80、CD86阳性率高于正常对照组（P〈0．05），初治组高于CR组（P〈0．05），加入雷公藤内酯醇后mDC表型阳性率呈浓度依赖性降低（P〈0．05）。加入雷公藤内酯醇后mDC较对照组突起变少、变短，形态上不成熟。结论雷公藤内酯醇能够减弱ITP患者pDC的功能，并抑制其向mDC的分化和成熟。

急性白血病异基因造血干细胞移植后髓外复发二例

目的探讨急性白血病异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后髓外复发的临床特点及疗效。方法分析1例急性髓系白血病（AML—M2）及1例急性淋巴细胞白血病（B-ALL）患者行allo-HSCT后髓外复发的临床、实验室特征，并结合文献分析白血病allo—HSCT后髓外复发的发病机制、危险因素、治疗方法及临床转归。结果白血病allo-HSCT后髓外复发部位不一，髓外复发后绝大多数患者会发生骨髓复发，预处理方案、移植物抗白血病／移植物抗宿主病的程度、白血病分型、移植时疾病状态、移植前髓外浸润、细胞遗传学的改变、白血病细胞的抗原表达等因素与移植后髓外复发有一定关系。对于白血病移植后髓外复发的治疗目前主张联合治疗，但疗效欠佳。结论急性白血病allo-HSCT后髓外复发的发生率虽低，但治疗效果差，死亡率高，联合治疗有望能提高疗效。

纯红系白血病（M6b）一例报告——附文献复习

目的提高对纯红系白血病（M6b）生物学本质的认识。方法报告1例纯红系白血病患者的临床和实验室检查特征、治疗经过、预后并结合文献复习讨论。结果患者骨髓原始红细胞占0．904，免疫表型：CD71^＋细胞占99．5％、血型糖蛋白A（GPA）^＋细胞占67．4％，无干祖细胞、髓系、淋系、巨核系抗原表达，予以HAG（高三尖杉酯碱＋阿糖胞苷＋G-CSF）方案化疗无效，病情持续进展，多发性髓外浸润，很快死于多器官功能衰竭。结论纯红系白血病恶性程度高，对常规化疗方案治疗无效，预后极差。

治疗相关性急性髓系白血病异基因造血干细胞移植后早期复发一例

患者 女,43岁,2009年7月因发现左乳房肿块半个月就诊.查体：左侧乳房外下象限扪及一蛋黄大小肿块,质较硬,活动可,无压痛,左腋窝可触及一肿大淋巴结,约花生米大小,活动可,无压痛.乳腺彩色超声提示：左乳外下象限见范围约4.2 cm ×4.7 cm× 3.1 cm的实性欠均质低回声团块,边界尚清,轮廓不规整,考虑为左侧乳腺癌,行左乳根治手术治疗.术后病理示：左乳浸润性导管癌,术后予EP方案化疗6个疗程,其中依托泊苷（VP16）化疗总剂量为3 240 mg,末次化疗时间为2010年1月.行局部放疗25次,总剂量为50 Gy.

急性髓系白血病患者MicroRNA-125b表达与不同亚型的相关性分析

目的探讨急性白血病患者MicroRNA-125b(miR-125b)表达与不同亚型的相关性。方法选取2015年1月至2015年12月间江苏省徐州医学院附属淮安医院收治的67例急性髓系白血病初发患者为观察组,选取同期的30例非恶性血液病患者为对照组,采用实时荧光定量PCR检测两组患者骨髓细胞中的miR-125b表达水平,比较不同亚型患者与对照组患者之间的表达差异,并分析miR-125b表达水平与化疗疗效的相关性。结果观察组M1~M6型的miR-125b表达量分别为(2.1±0.4),(2.2±0.4),(3.4±1.0),(1.9±0.4),(1.9±0.3)和(1.8±0.4),对照组的miR-125b表达量为(0.8±0.2),所有亚型患者的miR-125b表达水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),且M3型患者的miR-125b表达水平显著高于其他亚型,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗前,观察组治疗后缓解和治疗后未缓解患者的miR-125b表达量分别为(2.9±0.4),(1.6±0.2)和(2.5±0.3),对照组则为(0.8±0.2),与治疗前比较,化疗缓解患者的miR-125b水平明显降低,但仍显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论急性髓系白血病患者存在miR-125b过度表达现象,且化疗缓解患者的miR-125b表达水平较治疗前显著降低,说明miR-125b表达水平可能与急性髓系白血病的发生发展相关。