胰岛素样生长因子1对人脂肪来源的间充质干细胞向软骨细胞定向诱导分化的作用

背景:近年研究者发现胰岛素样生长因子1还可以诱导骨髓来源间充质干细胞向软骨细胞方向分化,但目前尚未见胰岛素样生长因子1诱导脂肪来源间充质干细胞向软骨细胞方向分化及在此过程中与转化生长因子β1相互作用的报道。目的:观察胰岛素样生长因子1诱导脂肪来源间充质干细胞向软骨细胞定向分化的可能性及在诱导分化中和转化生长因子β1的相互作用。方法:获取脂肪来源间充质干细胞,以2×105cells/cm2的密度接种于培养瓶,使用含胰岛素样生长因子1或(和)转化生长因子β1的无胰岛素软骨诱导剂诱导脂肪来源间充质干细胞。2周后获取细胞,制备细胞爬片,进行甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,观察细胞内高硫酸化的蛋白聚糖和Ⅱ型胶原着色情况。RT-PCR检测Ⅱ型胶原蛋白、aggrecan及Sox9mRNA的表达。结果与结论:加入诱导剂后,甲苯胺蓝染色显示3个诱导组细胞呈多角形,胞浆及胞膜呈蓝色异染。Ⅱ型胶原免疫组织化学染色显示3个诱导组细胞胞浆及胞膜呈棕黄色着色。RT-PCR检测显示胰岛素样生长因子+转化生长因子组Ⅱ型胶原蛋白、aggrecan、Sox9mRNA的表达均显著强于胰岛素样生长因子组和转化生长因子组,胰岛素样生长因子组和转化生长因子组显著强于对照组,而胰岛素样生长因子组与转化生长因子组差异无显著性意义。提示胰岛素样生长因子1可以单独诱导脂肪来源间充质干细胞向软骨细胞分化,表达软骨细胞特异性细胞表型,胰岛素样生长因子1与转化生长因子β1诱导脂肪来源间充质干细胞向软骨细胞分化有协同作用。

髋关节置换术后可溶性P-选择素与深静脉血栓形成相关研究

目的监测髋关节置换术后可溶性P-选择素浓度，分析其与深静脉血栓形成（DVT）的关系，探讨其对髋关节置换术后下肢DVT的诊断价值。方法选取120例行髋关节置换术的住院患者，术后根据彩色多普勒超声、临床症状及体征检查，分为DVT组和非DVT组。采集患者术前1天、术中（手术切口关闭时）、术后6h、1天、3天、7天、12天肘正中静脉血，测定可溶性P-选择素浓度、D-二聚体浓度；术前、术后3天检测凝血功能；术前和术后3、7、12天行患肢彩色多普勒超声检查；应用SPSS13．0统计学软件进行数据分析及绘制接受者操作特征曲线（ROC）。结果①可溶性P-选择素浓度在术中（手术切口关闭时）比术前有所下降，术后6h开始上升，术后1天升至相对较高浓度，术后3天降至相对较低浓度，但仍高于术前，术后7天开始逐步回升至术后12天。②DVT组与非DVT组间术前、术中可溶性P-选择素浓度比较，差异无统计学意义（P〉0．05），术后6h、1天、3天、7天、12天DVT组中可溶性P-选择素浓度明显高于非DVT组（P〈0．05）；2组的术中可溶性P-选择素与术前比较，差异无统计学意义（P〉0．05），2组术后6h、1天、3天、7天、12天可溶性P-选择素浓度与术前比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。③相关性分析表明：在DVT组，术后可溶性P-选择素浓度与D-二聚体浓度呈正相关（P〈0．01），术后3天可溶性P-选择素浓度与Fib呈正相关（P〈0．01）、与胛呈负相关（P〈0．01）。④ROC曲线分析：DVT组中可溶性P-选择素浓度在术后6h、1天、3天、7天、12天曲线下面积分别为0．86、0．88、0．90、0．92、0．90，诊断界点分别为38．31μg/L、43．12μg/L、36．80μg/L、38．86μg/L、39．56μg/L，灵敏度分别为84％、84％、89％、89％、89％，特异度分别为81％、88％、87％、93％、91％（P=0．00）。结论①髋关节置换术后血中可溶性P-选择素浓度升高。②可溶性P-选择素浓度与下肢DVT密切相关。③可溶性P-选择素可能是DVT早期诊断的分子标志物，对髋关节置换术后DVT的早期诊断具有重要价值。