脑损伤诱导神经细胞凋亡的动物实验研究

为探讨脑损伤诱导神经细胞凋亡的作用及其机制，应用大鼠液压冲击脑损伤模型，在脑损伤后不同时间段（３ｈ，１２ｈ，２４ｈ，４８ｈ，７２ｈ）处死动物，分别应用ＨＥ染色、流式细胞仪检测、ＴＵＮＥＬ法测定、ＤＮＡ凝胶电泳分析，免疫组化研究神经细胞凋亡的改变。结果显示：动物经中度脑损伤处理后，其受伤各时间段脑组织可见凋亡的神经细胞及ＴＵＮＥＬ阳性细胞，ＤＮＡ呈现“梯状”断裂现象，细胞凋亡百分率为９．８％￣１４．

椎管内肿瘤的诊断和治疗(附102例分析)

椎管内肿瘤102例，其中髓内肿瘤15例，髓外硬膜内肿瘤67例，硬膜外肿瘤20例。手术治疗98例，4例诊断为转移瘤予以化疗和放射治疗。MRI问世前，诊断方法首选脊髓造形术，包括CT—脊髓造形术。结论：MRI能明确显示肿瘤的部位、界限、性质。手术应持积极态度，早期诊断，尽早手术治疗，对种经功能的恢复有着重要的意义。

靶向IGF1R的siRNA抑制人肝癌细胞SMMC7721裸鼠移植瘤的实验研究

背景与目的:利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制哺乳动物基因表达已成为研究基因功能的一种有效方法。本研究探讨人胰岛素样生长因子1类受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)的短发夹环RNA对人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:设计并合成特异性靶向IGF1R的siRNA片段,构建SMMC7721-IGF1R-siRNA表达质粒,将其转入SMMC7721细胞。通过G418筛选出稳定株,移植裸鼠成瘤。同时设立对照组。根据体积的均数值绘制肿瘤生长曲线,以HE染色法观察质粒处理后瘤组织的病理改变,Westernblot检测肿瘤组织中IGF1R的表达变化,免疫组化SP法检测检测瘤组织内微血管密度,原位末端标记法(TUNEL法)检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果:SMMC7721-IGF1R-siRNA组肿瘤体积与SMMC7721-IGF1R-mutation组、SMMC7721组相比差异有统计学意义(P<0.05)。病理学检查及TUNEL检测发现,SMMC7721-IGF1R-siRNA组肿瘤生长受到抑制,细胞凋亡指数[(50.2±6.4)%]明显高于SMMC7721-IGF1R-mutation组[(5.4±1.0)%]和SMMC7721组[(6.0±2.1)%](P<0.05)。SMMC7721-IGF1R-siRNA组与SMMC7721-IGF1R-mutation组、SMMC7721相比,瘤内IGFIR蛋白表达明显下调。SMMC7721-IGF1R-siRNA组微血管密度(11.3±4.4)与SMMC7721-IGF1R-mutation组(36.7±7.6)、SMMC7721组(28.4±6.5)相比明显下降(P<0.05)。结论:构建的SMMC7721-IGF1R-siRNA具有RNA干扰作用,能抑制SMMC7721细胞裸鼠移植瘤的生长。

运用siRNA建立稳定低表达IGF1R基因的肝癌细胞株的实验研究

目的运用siRNA技术在肝癌细胞株中建立稳定低表达人胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)基因的细胞株。方法构建包含封闭IGF1R基因的真核表达载体pSUPER-IGF1R-siRNA,转染SMMC7721和Hep3B细胞,G418筛选表达稳定的细胞株。通过RT-PCR、Western-blot分析与鉴定IGF1R mRNA和蛋白及cyclin D1、cyclinB1蛋白的表达,并绘制细胞生长曲线。结果在SMMC7721和Hep3B细胞中成功建立低表达IGF1R基因的细胞株,其生长明显减慢(P<0.05),且其cyclinD1表达亦明显下降(P<0.05)。结论pSUPER-IGF1R-siRNA能抑制SMMC7721和Hep3B细胞的生长。

人胰腺癌不同转移潜能细胞株的分离筛选和鉴定

目的获得不同转移潜能的胰腺癌细胞株。方法通过有限稀释法获得人胰腺癌细胞系AsPC-1中不同的单细胞克隆细胞瘤,经过侵袭实验初筛后选择转移潜能不同的2株亚细胞株N1的N7,利用细胞生长曲线测定、软琼脂克隆形成实验、细胞周期检测、裸鼠种植癌转移状态来分析它们的生物学性质。结果N7体外生长速度明显快于N1;N7软琼脂克隆形成率为109±13,明显高于N1的26±5（P〈0.05）;N7的G2/M比率为26.3±1.9,明显高于N1的8.3±1.3（P〈0.01）;N7裸鼠体内种植癌肝转移率为100%,明显高于N1的0。结论从同一亲本筛选出转移潜能高低的2个亚细胞系,N7为高转移潜能亚细胞系,N1为低转移潜能亚细胞系。

外科手术后肺部感染

外科手术后肺部感染徐州医学院附属第一医院外科（２２１００２）申耀宗虽然近年在外科和麻醉技术方面有了很大的进步，但是肺部并发症仍旧是外科手术后常遇到的问题，尤其是高龄、胸部或上腹部手术和术前已存在肺部疾病的患者。１病因１１吸入胃肠道内容物引起，异...

RNA干涉胰岛素样生长因子1类受体的研究

RNAi技术的关键是siRNA的制备，实验结果证实，通过发卡结构的小RNA（shRNA）载体表达siRNA可以抑制特定靶基因表达。我们通过将针对IGFIR基因的RNA干扰片段装入特定质粒PSUPER中，再转染入人肝癌细胞株SMMC7721中，并筛选出稳定株。

缺氧和机械损伤诱导大鼠神经细胞凋亡的体外研究

目的 探讨神经细胞凋亡与缺氧和机械损伤的关系。 方法 体外原代培养大鼠神经元细胞 ,经低氧或机械损伤处理后 ,应用光镜、电镜、末端脱氧核苷酸介导的X -dUTP缺口末端标记 (TdT -mediateddUTPneikendlabeling ,TUNEL)法、流式细胞仪、DNA凝胶电泳及免疫组化分析细胞凋亡及其相关基因表达的改变。 结果 经低氧或机械损伤后神经细胞出现凋亡的形态改变 ;其DNA呈现“梯状”断裂现象 ;细胞凋亡百分率分别为 10 .8%和 4.8% (对照组为 1.6 % ) ,凋亡相关基因 (c-myc、fas、fasL)表达明显增加。结论 缺氧及机械损伤可诱导神经细胞凋亡 ,其分子机制可能与某些凋亡相关基因表达改变有关。

慢性阑尾炎的手术指征与时机

虽然急性阑尾炎的诊断与处理早已为临床医师所熟知,但对慢性阑尾炎却至今仍存在争议。提起慢性阑尾炎一词,可能有人会感到乏味,这点Talbert和Zuidem也早已提过,但他们认为阑尾炎的反复发作却是公认的事实。从各家的报告看,慢性阑尾炎的发病率并不算低,许多病人早期有急性阑尾炎的发作,后来自然消退。如果早期的诊断是明确的,则其后的复发肯定很高。另外一些未经手术或仅经过单纯引流未行阑尾切除的阑尾脓肿患者,复发性阑尾炎的发生率约占28%。Ferrier曾观察了1028例阑尾炎,发现其中25%过去有类似的发作史。savrin认为慢性阑尾炎的发病率实际上要较一些作者报告的高得多。

siRNA封闭胰岛素样生长因子Ⅰ类受体对肝癌细胞侵袭能力的影响及其机制

目的探讨人胰岛素样生长因子1类受体（IGFIR）的短发夹环RNA质粒（pSUPER-siRNA—IGFIR）能否有效抑制人肝癌细胞株MHCC97H侵袭能力并探讨其相关机制。方法设计并合成靶向IGFIR的siRNA片段并构建Psuper—siRNA-IGFIR表达质粒，将其转入MHCC97H、SMMC7721细胞，通过G418筛选出稳定株。通过黏附实验、Boyden小室实验、软琼脂克隆形成实验观察各细胞株侵袭能力的变化并采用明胶酶法测定肝癌细胞的金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的含量，Western blot检测增殖相关基因的变化。并设空白对照组、阳性对照组。结果MHCC97H-IG-FIR-siRNA、SMMC7721-IGFIR-siRNA黏附能力比对照组下降约5倍（MHCC97H）和6倍左右（SMMC7721），细胞迁移能力明显下降，下降各约3倍，细胞克隆形成率明显低于对照组约6倍和8倍，其MMP-2、MMP-9、ICAM-1、LNR、E-cadherin表达比对照组低。结论构建的pSUPER-siRNA-IGFIR具有RNA干扰作用，可抑制肝癌细胞株转移能力。

152例脊髓肿瘤诊断分析

脊髓肿瘤是脊髓压迫症的最常见原因,有明显进展性的临床表现,随着病因的发展和扩大,脊髓功能逐步丧失,严重地影响了病人的生活和劳动能力。一般来说,本病若能及时正确地诊断和治疗,效果较好。近年来,由于影像学的发展,脊髓肿瘤得以早期诊断和精确定位及定性,为及时、正确的治疗提供了有利的条件。本文对我院1987年～1996年收治的152例脊髓肿瘤分析报告如下。 1 临床资料 1.1 一般资料:男97例,女55例,年龄1.5～71岁,平均42岁。

重要功能区脑内小脓肿的手术治疗

重要功能区脑内小脓肿的手术治疗刘勇，倪鸣山对于重要功能区的脑内小脓肿只有准确定位，才能取得良好的手术效果，我科目１９８８年７月至１９９６年Ｔ月收治了５５例位于中央前、后回的脑内小脓肿，其中２５例采用直角多孔测量板术前在头皮上标出病变，然后进行手术摘除...