患者男,65岁,尿频、尿不尽5年余,伴肉眼血尿半年;10年前左股骨颈骨折,否认其他病史及家族史。查体:尿道下裂;左侧睾丸未触及。实验室检查:促黄体生成素23.23m IU/ml,促卵泡刺激素60.04 m IU/ml,雌二醇59.00 pg/ml,睾酮157.66ng/dl。腹...患者男,65岁,尿频、尿不尽5年余,伴肉眼血尿半年;10年前左股骨颈骨折,否认其他病史及家族史。查体:尿道下裂;左侧睾丸未触及。实验室检查:促黄体生成素23.23m IU/ml,促卵泡刺激素60.04 m IU/ml,雌二醇59.00 pg/ml,睾酮157.66ng/dl。腹部超声:膀胱后方探及7.0cm×3.6cm×4.2cm低回声,边界清晰,周边见环形强回声,后方伴声影(图1A);CDFI于病灶内未见明显血流信号。展开更多
目的探讨光动力纳米载体联合小干扰-脯氨基3-羟化酶家族成员(si-P3H4)精准治疗膀胱肿瘤的疗效。方法RT-qPCR和Western Blot分别检测转染siRNA后膀胱癌EJ和T24细胞株中的P3H4mRNA和蛋白表达量。CCK8、划痕实验和Transwell小室检测敲低P3H...目的探讨光动力纳米载体联合小干扰-脯氨基3-羟化酶家族成员(si-P3H4)精准治疗膀胱肿瘤的疗效。方法RT-qPCR和Western Blot分别检测转染siRNA后膀胱癌EJ和T24细胞株中的P3H4mRNA和蛋白表达量。CCK8、划痕实验和Transwell小室检测敲低P3H4后对EJ和T24膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。以氨基树脂为底物合成高分子纳米载体CH3-R9-cRGD,将纳米载体药物包裹si-P3H4、光敏剂Ce6转染至膀胱癌细胞(HCV29细胞),检测不同pH及激光照射条件下药物体外释放情况。同时,探索纳米药物与膀胱癌细胞靶向结合内吞机制,检测细胞内活性氧(ROS)水平。将不同分组纳米复合物转染至膀胱癌细胞,CCK8法检测各组细胞活力,体内试验进一步探索不同分组纳米复合物肿瘤抑制能力。结果RT-qPCR显示EJ组和T24组P3H4mRNA表达量分别降低至对照组的68.4%和57.1%。Western Blot显示EJ组和T24组P3H4蛋白表达较阴性对照组分别下降至20.3%和36.5%。CCK8实验吸光度A值为EJ组相对于对照组96 h:(0.785±0.084) vs (1.358±0.064),t=12.06,P<0.01;T24组相对于对照组96 h:(0.833±0.065) vs (1.346±0.545),t=13.415,P<0.01。划痕实验细胞愈合率:EJ组相对于对照组为(47.8±4.32)% vs (68.60±4.39)%,t=7.545,P<0.01;T24组相对于对照组为(50.40±3.64)% vs (70.61±3.85)%,t=8.521,P<0.01。Transwell细胞穿膜数:EJ组相对于对照组为[(302.71±7.56) vs (130.42±3.95)]个,t=53.40,P<0.01;T24组[(99.56±4.50) vs (35.22±6.28)]个,t=24.974,P<0.01。成像结果显示多肽纳米载体上具有良好的渗透性,可以同时将si-P3H4和Ce6靶向运输至膀胱癌细胞中。CCK8法检测结果显示当纳米复合物CH3-R9-cRGD&Ce6的浓度为50 μg/ml时,激光照射组的细胞活力均低于无激光照射组,且纳米探针+激光+siP3H4组细胞活力最低(F=299.57,P<0.05)。体内试验显示纳米复合物/si-P3H4/激光抑制肿瘤细胞增强效果最为显著。结论纳米载体可以同时将si-P3H4和Ce6靶向运输至膀胱癌细胞中抑制细胞增殖,实现对膀胱癌的综合治疗。光动力和基因治疗在膀胱肿瘤治疗领域具有互补优势,两者联用可达到协同增强肿瘤治疗的效果,可以将其应用于膀胱尿路上皮癌的治疗。展开更多
文摘患者男,65岁,尿频、尿不尽5年余,伴肉眼血尿半年;10年前左股骨颈骨折,否认其他病史及家族史。查体:尿道下裂;左侧睾丸未触及。实验室检查:促黄体生成素23.23m IU/ml,促卵泡刺激素60.04 m IU/ml,雌二醇59.00 pg/ml,睾酮157.66ng/dl。腹部超声:膀胱后方探及7.0cm×3.6cm×4.2cm低回声,边界清晰,周边见环形强回声,后方伴声影(图1A);CDFI于病灶内未见明显血流信号。
文摘目的探讨光动力纳米载体联合小干扰-脯氨基3-羟化酶家族成员(si-P3H4)精准治疗膀胱肿瘤的疗效。方法RT-qPCR和Western Blot分别检测转染siRNA后膀胱癌EJ和T24细胞株中的P3H4mRNA和蛋白表达量。CCK8、划痕实验和Transwell小室检测敲低P3H4后对EJ和T24膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。以氨基树脂为底物合成高分子纳米载体CH3-R9-cRGD,将纳米载体药物包裹si-P3H4、光敏剂Ce6转染至膀胱癌细胞(HCV29细胞),检测不同pH及激光照射条件下药物体外释放情况。同时,探索纳米药物与膀胱癌细胞靶向结合内吞机制,检测细胞内活性氧(ROS)水平。将不同分组纳米复合物转染至膀胱癌细胞,CCK8法检测各组细胞活力,体内试验进一步探索不同分组纳米复合物肿瘤抑制能力。结果RT-qPCR显示EJ组和T24组P3H4mRNA表达量分别降低至对照组的68.4%和57.1%。Western Blot显示EJ组和T24组P3H4蛋白表达较阴性对照组分别下降至20.3%和36.5%。CCK8实验吸光度A值为EJ组相对于对照组96 h:(0.785±0.084) vs (1.358±0.064),t=12.06,P<0.01;T24组相对于对照组96 h:(0.833±0.065) vs (1.346±0.545),t=13.415,P<0.01。划痕实验细胞愈合率:EJ组相对于对照组为(47.8±4.32)% vs (68.60±4.39)%,t=7.545,P<0.01;T24组相对于对照组为(50.40±3.64)% vs (70.61±3.85)%,t=8.521,P<0.01。Transwell细胞穿膜数:EJ组相对于对照组为[(302.71±7.56) vs (130.42±3.95)]个,t=53.40,P<0.01;T24组[(99.56±4.50) vs (35.22±6.28)]个,t=24.974,P<0.01。成像结果显示多肽纳米载体上具有良好的渗透性,可以同时将si-P3H4和Ce6靶向运输至膀胱癌细胞中。CCK8法检测结果显示当纳米复合物CH3-R9-cRGD&Ce6的浓度为50 μg/ml时,激光照射组的细胞活力均低于无激光照射组,且纳米探针+激光+siP3H4组细胞活力最低(F=299.57,P<0.05)。体内试验显示纳米复合物/si-P3H4/激光抑制肿瘤细胞增强效果最为显著。结论纳米载体可以同时将si-P3H4和Ce6靶向运输至膀胱癌细胞中抑制细胞增殖,实现对膀胱癌的综合治疗。光动力和基因治疗在膀胱肿瘤治疗领域具有互补优势,两者联用可达到协同增强肿瘤治疗的效果,可以将其应用于膀胱尿路上皮癌的治疗。