案例引导的虚拟仿真实验在《医学微生物学与免疫学》教学中的实践

《医学微生物学与免疫学》是医学主干课程和桥梁课程,实验教学是本课程的重要组成部分,为了培养医学生应用基础知识解决临床问题的能力,启蒙学生科研意识,提高创新能力,激发学生学习兴趣和提高学习效果,加强学生对理论知识和实验方法的理解和掌握,本团队利用虚拟仿真技术,基于临床案例,自主设计开发了案例引导的虚拟仿真实验—基于人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)合并结核分枝杆菌感染虚拟仿真实验,并用于医学微生物学与免疫学实验教学,通过不断的实践与探索,改进教学方法,取得了较好的教学效果,通过项目的实践和拓展,以期构建线上线下结合的、临床基础融合的实验教学体系,有助于培养符合社会发展需要的优秀医学生。

医学免疫学与微生物学课程网络考核的探讨

根据医学免疫学与微生物学课程教学改革的要求,本校采用平时考核与期末考核相结合的方式对学生的学习效果进行综合评价。在平时考核中,作业占有很大的比例。随着高校教育理念和人才培养模式的转变,现代信息技术的应用以及当代大学生依赖网络的特点,我们通过应用网络教学平台构建了医学免疫学与微生物学课程网络考核的试题库,并在教学过程中,通过网络教学平台向学生发布作业进行网络考核,帮助学生及时掌握所学知识及其应用,促进学生自主学习能力的养成。

导师制下生物科学专业本科生培养的探讨

随着社会对生物科学技术人才素质和能力要求的提高,以课堂教学为主的培养模式已经无法满足对生科专业本科生的培养要求.本科生导师制是深化高校本科教育教学改革的一种新尝试.导师制的实施不仅有利于学生的创新思维和科研能力的提高,也有利于导师对学生进行因材施教.结合我校生物科学专业学生培养的实际情况,对生物科学专业学生导师制的特点和实施过程给予总结,并简要阐述开展导师制取得的成绩及不足.

田鼠巴贝虫GAPDH蛋白特性和抗原表位的生物信息学分析

目的分析田鼠巴贝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶（BmGAPDH）的蛋白特性和抗原表位。方法运用ORFFinder、PROSITE、ProtParam、SignaIP、TMHMMServer、SOUSI、MotifScan、Bcepred、HNN等生物信息学软件分析预测BmGAPDH基因的开放阅读框和编码蛋白的特征结构域、理化性质、信号肽、跨膜结构域、稳定性、可溶性、翻译后修饰位点、亲水性、柔韧性、表面可及性、二级结构等特性；同时结合DNAStar和SWISS—MODEL软件分别预测蛋白的抗原表位和三维空间结构。结果BmGAPDH由1074个核苷酸编码的357个氨基酸组成，其特征结构域位于170—177位氨基酸残基。编码蛋白相对分子质量为3．833309×10^4，分子式为C1700H2723N457O514S17理论等电点为6．98，不存在信号肽，有1个跨膜区，23个翻译后修饰位点，6个亲水性参数得分≥1．9的区域，3个柔韧性参数得分≥2．0的区域，10个表面可及性参数得分≥1．9的区域，8个潜在的B细胞抗原表位，19个潜在的T细胞抗原表位，在溶液中性质稳定，且为疏水性蛋白。BmGAPDH蛋白和人类的GAPDH蛋白序列覆盖率为56％，相似性为70％。结论BmGAPDH含有多种抗原表位，且含量丰富，具有成为巴贝虫病疫苗候选抗原的潜在特性。

Sprague-Dawley大鼠胃肠道微生物区系的研究

为了揭示Sprague-Dawley大鼠胃肠道微生物群落组成情况,探究大鼠胃肠道不同区域的菌群差异,该研究采用16S rRNA基因序列技术,对Sprague-Dawley大鼠的胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠的肠腔内容物进行基因组测序和微生物组成分析。结果表明:Sprague-Dawley大鼠不同胃肠道区域的细菌群落组成不同;大肠样本的物种丰富度和多样性高于小肠样本;厚壁菌门是各肠道段的优势菌门,乳酸杆菌属是各肠道段的优势菌属;与小肠相比,大鼠大肠微生物菌群更稳定、多样。研究结果揭示了Sprague-Dawley大鼠的胃肠道微生物群落组成信息,为其作为动物模型的相关研究提供了理论依据。

二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003抗戊型肝炎病毒的研究

研究二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003对戊型肝炎病毒(HEV)复制的影响,为抗HEV治疗提供新型候选药物。用带有高斯荧光素酶的HEV复制子模型研究ASLAN003是否具有抗HEV作用,实时荧光定量PCR和间接免疫荧光检测ASLAN003对HEV RNA复制以及衣壳蛋白表达的抑制作用,细胞毒性试验和间接免疫荧光计算ASLAN003的半数毒性浓度(CC_(50))和半数抑制浓度(IC_(50))。结果表明,ASLAN003在0.2~50μmol/L浓度范围内能显著抑制HEV复制子在HEK 293T和Huh7细胞内的复制;ASLAN003在1μmol/L浓度能有效抑制HEV RNA复制,使其下降50%;在0.4μmol/L的浓度能够显著抑制衣壳蛋白ORF2的表达。通过对ASLAN003的细胞毒性和抑制HEV效果进行研究发现,其CC_(50)为294μmol/L,而IC_(50)为0.231μmol/L。说明ASLAN003能够有效抑制HEV复制,提示其可作为潜在抗病毒药物。

单核/巨噬细胞发生受训后免疫的机制研究进展

只有适应性免疫系统才具有记忆性的传统观点目前正逐渐受到挑战。在缺乏适应性免疫的生物体(植物、无脊椎动物)以及脊椎动物体内,均发现了固有免疫系统(自然杀伤细胞、单核/巨噬细胞等)在再次接触相同或无关病原体刺激时表现出增强或减弱的免疫反应,这一现象被称为受训后免疫(TI)或固有免疫记忆。经典的适应性免疫记忆具有特异性、抗原依赖性、由基因重排介导等特点,而TI则被认为是非特异性的、抗原无关的、由表观遗传学及代谢重编程介导的,因此TI是机体免疫记忆的一种新补充。研究证实TI是一把双刃剑,在维持健康和促进疾病中发挥重要作用;阐明TI的调控机制,将为感染性疾病、免疫缺陷病及炎症疾病等疾病的发病机理研究以及新型疫苗的研发提供新颖视角。本文对TI的发现、特点、发生机制等方面进行综述,重点阐述表观遗传学及代谢重编程在单核巨噬细胞发生TI中的作用及最新的机制研究进展。

一带一路背景下留学生人体寄生虫学教学改革的探索

"一带一路"背景下来华留学生教育是我国高等医学教育的重要组成部分。寄生虫病是"一带一路"沿线国家或地区普遍存在的公共卫生问题,提升高校留学生人体寄生虫学教学质量尤为重要。徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室根据"一带一路"沿线寄生虫病分布特点,利用网络教学资源,建立了适合留学生的案例教学方法并改进原有课程考评模式。努力达到弥补传统教学模式不足,切实提升我校留学生人体寄生虫学教学质量的目的。

基于问卷星的人体疾病学基础专题式教学改革探索

专题式教学在医学教学工作中逐渐得到广泛应用,而新时代下如何利用网络的普及,扬长避短地应用到教学改革中,值得深入探讨。徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室提出基于问卷星平台的人体疾病学基础寄生虫内容专题式教学设计,在五个不同专题教学过程中,利用问卷星平台功能,及时快捷掌握教学效果,促进专题式教学更适应时代发展的改革,努力达到培养高素质医学院校非医学专业人才的目的。

造血干/祖细胞的受训后免疫机制研究进展

天然免疫细胞(如单核/巨噬细胞)能够针对相同或无关病原体再刺激产生增强或减弱的免疫反应,这种现象被定义为受训后免疫(trained immunity,TI)。TI虽不像适应性免疫那样具有长期的记忆性,但可持续数周或数月。鉴于天然免疫细胞的短寿性,如何维持TI的长期性记忆是当前免疫学研究的前沿。由于造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cells,HSPC)能向髓系祖细胞分化并不断产生天然免疫细胞,故认为HSPC可能也存在受训现象。目前,对这一新观点的机制研究还较少,但深入探究该科学问题将为免疫调控机制及人类疾病发病机理研究提供新的见解。最新证据表明,类似单核/巨噬细胞,HSPC也存在TI现象,其机制涉及表观遗传学和代谢重编程等,本文就此进行综述。

霍乱毒素B亚单位对小鼠免疫细胞及细胞因子的影响

目的探讨侧脑室注射霍乱毒素B亚单位(CTB)对小鼠免疫细胞及细胞因子的影响。方法 C57雌性小鼠侧脑室注射CTB,运用流式细胞术检测外周血免疫细胞亚群变化;流式微球捕获芯片技术(CBA)检测血清中细胞因子及趋化因子的变化。结果 CTB能够明显升高单核巨噬细胞、CD4^+T细胞及B细胞的比例;炎症因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-9(IL-9)及趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)、B淋巴细胞趋化因子(BLC)、γ干扰素诱导的单核因子(Mig)、调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)也相应升高。结论侧脑室注射CTB能够明显改变小鼠免疫应答状态。

医学院校新任教师教学能力自我提升的方法探究

当前高等医学教育改革迅速推进,在此形势下,新任高校青年教师面临诸多挑战。一方面:教学经验不足,急需传统教学训练以迅速提升课堂讲授能力;另一方面:传统以单一课堂讲授为主的大课教学模式正逐步转换为以学生为中心,以自学能力培养为目的,以岗位胜任力为导向的混合式教学新模式,结合慕课、案例讨论、虚拟教学等多样化形式的混合式教学在医学高等院校正在逐步常态化。因此,医学院校新任教师自身如何利用社会、学校、同事等各方面资源迅速提升教学能力,适应教学模式的转化是一个重大挑战。

浅谈日常教学中医学本科生科研创新能力培养

当代医学发展迅速,要求医学人才在具备医疗技能的同时,还需具有科学研究水平。因此,医学本科生的科研创新能力的培养是高素质医学人才培养的必然要求。然而,当前我国医学本科生大多存在缺乏科研创新的能力、缺少创新思维、课程学习与科研训练时间冲突、对科研活动认识不足等问题。医学本科教育,课程教学是基础。高等医学院校应从加强教师队伍建设、改革教学方法、鼓励学生科研活动等多方面归化、引导。文章分析了目前高等医学院校医学本科生的科研创新能力的培养现状,并以学校病原生物学与免疫学课程的教学措施为例,就如何在教学中提升医学本科生的科研创新能力进行了总结。

免疫反应基因1/衣康酸在调控巨噬细胞炎症中的研究进展

免疫反应基因1(IRG1)是三羧酸循环的一种代谢酶,其催化顺乌头酸脱羧产生衣康酸。IRG1/衣康酸是巨噬细胞免疫与代谢的重要连接点,其作用及机制研究在近年取得了重大进展。研究证实,衣康酸是负向调控巨噬细胞炎症反应的关键代谢物,其可通过抑制琥珀酸脱氢酶(SDH)活性及诱导核因子E2相关因子2(Nrf2)介导抗氧化等机制下调LPS诱导的巨噬细胞炎症反应。此外,基于衣康酸设计的衍生物显示出对炎症疾病的治疗潜力。本文就IRG1/衣康酸调控巨噬细胞炎症反应的分子机制研究进行综述。

临床医学专业基础医学青年教师教学质量探讨

基础医学对临床医学实践具有重要的支撑和指导作用,为社会培养临床医生服务。然而当前高等医学院校教师队伍临床医学知识的匮乏以及基础医学学科的过分细化导致基础医学教学过程中基础与临床严重脱节,已无法满足当前社会对临床医学学生教育的要求,教学质量堪忧。随着我国高等教育规模不断扩大,青年教师已成为高等医学院校教师的重要组成部分。因此,为更好地服务于临床医学教学,实现基础联系临床、临床“反哺”基础的有效融合,促进我国医学教学改革的发展以及医学人才的培养,从自身、学院、学校等多渠道提高基础医学学科青年教师教学质量就显得尤为重要。

人体寄生虫学实验教学标本库扩充策略研究

人体寄生虫学是一门以虫体形态观察为主的基础病原生物学学科。目前寄生虫实验教学中存在标本短缺、标本质量不高等问题。为了解决该问题并满足临床医学生教学需求,通过活体、寄生虫感染动物模型、开发新标本等措施实现了寄生虫标本库的扩充目的,并提升了教学质量。

徐州地区家鼠犬新孢子虫的分子检测（英文）

为了解徐州地区家鼠犬新孢子虫的流行情况,从徐州不同地区采集家鼠脑组织样本,采用酚-氯仿法提取其总DNA,运用基特异PCR检测徐州家鼠犬新孢子虫感染情况,并将PCR阳性样本进行测序验证。共检测123份脑组织样本,41份为犬新孢子虫阳性,经测序验证均为犬新孢子虫的特异性序列,阳性率为33.3%(41/123),其中,小家鼠阳性率为42.4%(14/33),大家鼠阳性率为30%(27/90)。本研究首次报道我国家鼠犬新孢子虫的感染情况,表明家鼠作为重要的中间宿主之一,在犬新孢子虫流行中发挥一定的作用,应引起有关部门的重视。

肝细胞FXR对日本血吸虫感染小鼠肠道菌群的影响

目的分析肝细胞法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)特异性敲除对日本血吸虫感染小鼠肠道菌群的影响。方法6~8周龄野生型雄性C57BL/6J和肝细胞FXR特异性敲除小鼠(FXR-HKO)随机分为4组:野生型小鼠正常对照组(WT,n=5)、FXR-HKO小鼠正常对照组(FXR-HKO,n=6)、野生型小鼠日本血吸虫感染组(Sj-WT,n=6)、FXR-HKO小鼠日本血吸虫感染组(Sj-FXR-HKO,n=5)。其中,感染组每只小鼠感染(15±1)条日本血吸虫尾蚴,感染第5周处死小鼠,在无菌条件下收取小鼠结肠内容物,进行16S rDNA测序,比较各组之间的肠道菌群多样性和丰度差异。结果Beta多样性分析结果显示,Sj-WT组和Sj-FXR-HKO组小鼠的肠道菌群与正常小鼠肠道菌群有明显的分群。在门水平上,与正常对照组相比,Sj-WT组和Sj-FXR-HKO组小鼠肠道中拟杆菌门的丰度升高,厚壁菌门丰度降低,厚壁菌门与拟杆菌门丰度比值明显降低(均P<0.05)。在属水平上,与正常对照组相比,日本血吸虫感染后小鼠肠道中拟杆菌属的丰度明显升高(均P<0.05),Sj-FXR-HKO组拟杆菌属的丰度比Sj-WT组的升高更明显(P<0.05),其中Sj-WT组脱硫弧菌属、杜氏菌属、乳杆菌属的丰度显著降低(均P<0.05),Sj-FXR-HKO组瘤胃球菌科属、毛罗菌科、杜氏菌属、乳杆菌属的丰度明显降低(均P<0.05)。结论肝细胞FXR特异性敲除影响了日本血吸虫感染小鼠肠道菌群稳态,为后续进一步研究FXR-肠道菌群在血吸虫病中的作用及机制奠定了扎实的实验基础。

STK25在星形胶质细胞活化和EAE小鼠病变进程中的作用

目的:探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶25(serine/threonine protein kinase 25,STK25)对星形胶质细胞活化及实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠疾病进程的影响。方法:髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG35-55)诱导小鼠EAE模型,Real-time PCR、Western blot和ELISA法分别检测脊髓组织中STK25、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与干扰素诱导蛋白-10(interferon-inducible protein-10,IP-10)的转录水平与蛋白表达;免疫荧光双标法检测STK25在脊髓星形胶质细胞中的表达。干扰素(interferon,IFN)-γ体外刺激小鼠原代星形胶质细胞后不同时间,上述方法检测STK25的蛋白表达及细胞因子的转录水平变化。将特异性靶向星形胶质细胞的对照及STK25敲减的重组慢病毒悬液感染星形胶质细胞后,IFN-γ刺激,测定TNF-α与IP-10的转录水平;同时给予小鼠病毒悬液7 d后,诱导EAE模型,Western blot检测脊髓组织STK25的表达;Real-time PCR检测脊髓炎性因子与趋化因子转录水平。HE和劳克坚牢蓝染色(Luxol fast blue,LFB)观察脊髓炎症细胞浸润与髓鞘损伤。结果:与对照组相比,EAE组小鼠STK25的表达水平显著降低,炎性因子与趋化因子的转录与分泌水平明显升高;同时脊髓组织星形胶质细胞STK25的表达明显下降。IFN-γ体外刺激星形胶质细胞STK25表达降低时,炎性因子生成增加;进一步敲减星形胶质细胞内源性的STK25基因,体外星形胶质细胞及体内EAE小鼠脊髓中炎性因子与趋化因子的生成显著升高,同时加剧了EAE小鼠脊髓炎症细胞浸润与髓鞘脱失。结论:STK25可能通过影响星形胶质细胞的活化,调节炎性与趋化因子的产生,从而参与EAE小鼠的病变进程。

丙酮酸乙酯对类风湿性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞增殖的影响

目的探讨丙酮酸乙酯对滑膜成纤维细胞增殖的影响。方法收集胶原诱导的关节炎大鼠(collagen induced arthritis,CIA)和正常大鼠滑膜组织,培养滑膜成纤维细胞。光镜及免疫荧光法检测Vimentin蛋白鉴定滑膜成纤维细胞;分别用1、2、5、10、20 mmol/L浓度的丙酮酸乙酯作用于滑膜成纤维细胞;流式细胞术及CCK8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果显微镜观察细胞形态特征符合滑膜成纤维细胞,且Vimentin蛋白表达阳性;5种剂量的丙酮酸乙酯均能抑制细胞增殖同时诱导细胞凋亡,但是未见明显剂量依赖效应,以5 mmol/L剂量组作用效果最为明显。结论丙酮酸乙酯能够抑制滑膜成纤维细胞增殖同时促进其凋亡,且以5 mmol/L剂量组作用最为明显。