2型糖尿病伴急性多发性脑梗死患者焦虑、抑郁情绪与认知功能障碍的相关性

目的研究2型糖尿病伴急性多发性脑梗死患者焦虑、抑郁情绪与认知功能障碍的相关性。方法 2型糖尿病患者69例,根据头颅MRI影像学检查结果分为2型糖尿病伴急性多发性脑梗死组(研究组)34例,平均年龄(66.53±9.25)岁;不伴脑梗死的单纯2型糖尿病组(对照组)35例,平均年龄(62.34±9.77)岁。受试者均测定身高、体重、血压、血脂谱、糖化血红蛋白(Hb A1c),采用汉密尔顿焦虑(HAMA)、抑郁(HAMD)量表评定两组焦虑、抑郁状况,采用蒙特利尔认知评估(Mo CA)量表测评两组认知功能。结果研究组收缩压及HAMA、HAMD评分均显著高于对照组(P<0.05)。研究组Mo CA评分显著低于对照组HAMD(P<0.001)。相关分析显示,研究组HAMD评分呈显著正相关(P<0.001),HAMD评分与Mo CA评分呈负相关(P<0.05)。结论 2型糖尿病伴急性多发性脑梗死患者比单纯糖尿病患者存在更多的焦虑、抑郁情绪及认知功能障碍,焦虑、抑郁情绪常同时存在,抑郁情绪越明显,认知功能障碍越严重。

GDNF重塑BV2细胞对胶质瘤相关因子的分泌能力

目的探讨胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)对小鼠BV2小胶质细胞分泌肿瘤相关细胞因子的影响。方法采用0、50、100、200和500μg/L GDNF分别处理BV2细胞12、24、36和48 h。实时PCR检测各组细胞中肿瘤抑制因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素β(IFN-β)和白细胞介素10(IL-10)和肿瘤促进因子IL-1β、转化生长因子β(TGF-β)、肝细胞生长因子(HGF)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的mRNA水平。ELISA法检测TNF-α、IFN-β和IL-1β的蛋白分泌水平。利用GDNF和GFR-α1的中和抗体处理BV2细胞,并采用ELISA检测IL-1β蛋白的分泌量。结果GDNF显著抑制TNF-α和IFN-β的mRNA表达,同时显著升高IL-1β、TGF-β和MMP9的mRNA表达(P<0.05)。TNF-α、IFN-β和IL-1β的蛋白分泌水平与mRNA结果一致。GDNF和GFR-α1的中和抗体均显著抑制了IL-1β蛋白的分泌,且中和GFR-α1显著抑制了GDNF诱导的IL-1β蛋白的分泌(P<0.05)。结论GDNF处理的小胶质细胞低分泌肿瘤抑制因子、高分泌肿瘤促进因子,阻断GFR-α1能够抑制GDNF诱导的IL-1β蛋白分泌,提示GDNF可能经GFR-α1介导的信号通路重塑利于胶质瘤进展的微环境。

色素上皮衍生因子对高浓度地塞米松刺激下成骨细胞迁移、分化的影响

[目的]研究色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在高浓度地塞米松刺激下,体外培养的成骨细胞迁移及分化的影响,探讨PEDF对成骨细胞功能的保护作用。[方法]将体外培养的MC3T3-E1细胞分为六组,分别为对照组、高浓度地塞米松(dexamethasone,DEX 10-6mol/L)组,PEDF干预地塞米松组,PEDF干预地塞米松组又按照PEDF的浓度分为3组(2、10、50 nmol/L)及成骨诱导培养组。采用Transwell小室及划痕实验于48 h后观察细胞的迁移情况。于14 d时采用倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,并进行细胞化学染色(茜素红染色、油红O染色),运用Western Blot检测细胞内PPARγ-2、Runx2蛋白的表达。[结果]在高浓度地塞米松作用下,细胞迁移能力受到抑制,细胞分化能力减弱,胞浆中出现脂滴,Western Blot结果显示脂肪细胞标志蛋白PPARγ-2表达增高,成骨细胞标志蛋白Runx2表达减少。而PEDF干预后可明显逆转高浓度地塞米松抑制细胞迁移及分化的作用。[结论]大剂量应用糖皮质激素可能抑制成骨细胞的迁移及成骨分化能力,促进成骨细胞转分化为脂肪细胞,而PEDF可以有效地逆转这一过程,起到保护细胞功能的作用。

色素上皮衍生因子对高剂量地塞米松作用下MC3T3-E1细胞成脂转分化及骨保护素／核因子-κB受体活化因子配体表达的影响

目的观察色素上皮衍生因子（PEDF）对高剂量地塞米松（DEX）作用下MC3T3-E1细胞成脂转分化及骨保护素（OPG）／核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）表达的影响。方法将体外培养的MC3T3-E1细胞分为5组，分别为对照组、DEX（10^-6mol／L）组、PEDF干预DEX组，PEDF干预DEX组又按照加入的PEDF分为3个浓度组，依次为2、10、50nmol/L组。各组细胞培养14d时采用倒置相差显微镜观察细胞形态的变化，进行细胞染色[碱性磷酸酶（ALP）染色、茜素红染色]及通过免疫荧光法检测OPG及RANKL的表达，并运用Western blot检测细胞OPG及RANKL蛋白的表达。结果成骨细胞ALP染色呈阳性，免疫荧光化学检测RANKL、OPG表达阳性。在高剂量DEX作用下，MC3T3-E1细胞发生明显成脂转分化，而PEDF的干预明显地抑制了这种转分化。与对照组（0．790±0．020）比较，高剂量DEX组（0．910±0．015）明显地上调了RANKL的表达水平（P=0．008）。加入PEDF后，RANKL的表达水平随着PEDF呈剂量依赖性下调。而OPG的表达水平随着PEDF呈剂量依赖性地增高。对比各组OPG／RANKL的表达水平，与DEX组（0．560±0．012）比较，PEDF干预DEX各亚组的OPG／RANKL的表达水平（0．821±0．025、1．290±0．018及1．405±0．120）随着PEDF的加入出现显著上调（P=0．003、0．000、0．019）。结论PEDF可有效地逆转高剂量DEX导致的成骨细胞成脂转分化，并且上调成骨细胞的OPG／RANKL的表达水平，从而保护成骨功能。