精囊精道解剖学特点及在临床内镜手术中的指导意义

目的:通过研究精囊精道解剖学,掌握局部解剖结构,指导临床精道内镜手术。方法:收集并分析临床48例精囊镜手术资料,统计进入精囊路径方式及术后临床效果;同时选取12具成人骨盆段标本进行精囊精道局部解剖研究,并模拟手术路径。结果:解剖结果与临床术中所见相互印证,52. 1%(25/48)临床病例射精管开口无法探及,但93. 8%(45/48)临床病例可经不同途径进入精囊完成手术。结论:经尿道微创精道内镜技术治疗精道、精囊疾病是完全可行的,但仍有局限性,需要结合其他治疗才能取得更好的治疗效果。

康复应用解剖教学中CBL与TBL整合模式的探讨

根据康复治疗专业人才培养要求,对康复应用解剖学在课程内容、授课方式等方面进行改革和调整,加强运动系统和神经系统的教学内容,提高与临床案例相结合和实验课时的比例。同时改革教学手段,采用CBL与TBL相结合的教学模式,提高学生的综合应用能力,培养学生的协作能力和动手能力,从而有效地提高课程教学质量,更好地服务于专业人才培养目标。

大鼠空肠系膜淋巴管、肠干和胸导管形态超微结构

目的 观察比较大鼠肠系膜淋巴管、肠干和胸导管详细的形态超微结构的异同。方法 本研究使用了12只成年SD大鼠。除水外,所有大鼠禁食24 h,然后在取样前2 h喂食蛋黄和脂肪餐。手术显微镜下,采集肠系膜淋巴管、肠干和胸导管的样本进行组织学和透射电镜检查,然后收集和分析所有数据。结果 大鼠肠系膜淋巴管、肠干和胸导管的直径不同,前者细小,后者稍粗。管腔内有多个瓣膜,它们的管壁菲薄,由三层组织组成。其内膜和外膜的超微结构相似。内膜包括具有不连续基底膜的单层内皮细胞。在肠系膜淋巴管和肠干的肌层发现一到三层平滑肌细胞,在胸导管中发现三至五层平滑肌细胞。它们的外膜由结缔组织(胶原纤维)和成纤维细胞组成。结论 详细显示和比较了大鼠肠系膜淋巴管、肠干和胸导管详细的形态超微结构,可能为进一步研究淋巴管的结构变化和机制提供基础。

心理干预和人文关怀护理在糖尿病肾病患者中的应用研究

目的研究心理干预和人文关怀护理对糖尿病肾病患者预后的影响。方法从2015年1月至2017年2月徐州市第一人民医院肾内科收治的糖尿病肾病患者中选取80例，随机分为4组：心理干预组、人文关怀组、干预关怀组、对照组，每组20例。比较研究不同组别患者焦虑自评量表（self - rating anxiety scale, SAS）评分、抑郁自评量表（self - rating depression scale, SDS）评分、并发症发生率和平均住院天数。结果心理干预组、人文关怀组、干预关怀组患者的SAS评分、SDS评分、并发症发生率和平均住院天数均显著低于对照组（P〈0．05）。干预关怀组患者的上述指标皆明显低于心理干预组或人文关怀组（P〈0．05）。结论心理干预或（和）人文关怀护理能减轻或减少糖尿病肾病患者的焦虑程度、抑郁程度、并发症发生率和平均住院天数，改善糖尿病肾病患者的预后。

薄荷醇抑制β淀粉样蛋白聚合保护神经细胞的实验研究

目的观察薄荷醇是否能通过抑制β淀粉样蛋白(Aβ)聚合从而保护神经细胞。方法利用计算机模拟技术,预测薄荷醇单体与Aβ单体的结构关系。将30μmol/L Aβ单独孵育、或与10%二甲基亚砜孵育、或与200μmol/L薄荷醇共同孵育72 h,透射电镜下观察Aβ聚合情况。以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为靶细胞,与30μmol/L Aβ或30μmol/L Aβ+200μmol/L薄荷醇共同培养,分别于12、24、36、72 h后通过细胞计数试剂盒(CCK8)实验检测SH-SY5Y的细胞增殖活性。将20只6月龄Aβ前体蛋白(APP)/早老素蛋白1(PS1)转基因小鼠完全随机分为观察组和对照组,每组10只;观察组给予1 mg/g薄荷醇灌胃,对照组给予等体积0.9%氯化钠注射液灌胃,隔天1次,至10月龄时处死,免疫组织化学方法检测小鼠海马区老年斑形成情况。结果通过计算机模拟实验,可发现薄荷醇与Aβ存在2个稳定的对接位置,该2处对接可阻碍Aβ聚合。透射电镜下观察证实,薄荷醇与Aβ共同孵育可明显抑制Aβ聚合物的形成。CCK8细胞活性实验显示,薄荷醇可以拮抗Aβ对SH-SY5Y细胞的损伤,并且随着时间的延长,Aβ组与Aβ+薄荷醇组测得吸光度的差异越来越明显[12 h:(0.85±0.12)比(1.13±0.14),P<0.05;24 h:(0.77±0.09)比(1.09±0.11),P<0.05;36 h:(0.67±0.13)比(1.01±0.11),P<0.05;72 h:(0.49±0.07)比(0.92±0.10),P<0.01]。免疫组织化学检测结果显示,观察组薄荷醇给药后APP/PS1小鼠海马区老年斑形成较对照组明显减少。结论薄荷醇可以通过抑制Aβ聚合防止神经细胞损伤。

老年中脑黑质神经型钙黏附蛋白表达增加可能参与黑质多巴胺能神经元退行性变

目的 :探讨神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)在老年中脑黑质内表达变化,是否与黑质多巴胺(DA)能神经元退行性变有关。方法 :实验分正常对照组、帕金森病(PD)假手术组、PD模型组、老年组。动物被快速断头取脑,行免疫印迹检测,检测酪氨酸羟化酶(TH)及N-cadherin表达量;动物被麻醉、灌注、固定、冷冻切片,行TH及N-cadherin免疫组织化学显色。结果 :PD模型组与对照组相比,中脑黑质TH表达量降低,黑质致密部TH阳性细胞数减少;相反,N-cadherin表达量明显升高,N-cadherin阳性细胞数也明显增加。老年组小鼠中脑黑质TH及N-cadherin的表达变化与PD模型组小鼠具有相同的变化趋势。结论 :老年中脑黑质N-cadherin表达增加可能参与黑质DA能神经元退行性变。

RBF网络在大肠癌患者术后存活期辅助预测中的应用

目的探索径向基函数（RBF）网络在大肠癌患者术后存活期辅助预测中的应用。方法利用RBF网络综合研究大肠癌患者的各项指标与术后存活期的关系。将随访收集的数据按照5．5：1的比例随机分为训练集和测试集，建立用于大肠癌患者术后存活期辅助预测的RBF网络。结果所建立的RBF网络对训练集数据的预测准确率为100％，对测试集数据也具有较高的预测准确率。结论RBF网络可以仿真大肠癌患者输入指标与术后存活期之间的关系，并能克服逆传播（BP）网络的缺陷。

CaMKⅡ反义寡核苷酸对阿尔茨海默病样大鼠海马细胞损伤的保护作用及其机制

目的研究CaMKⅡ反义寡核苷酸对阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)样大鼠海马细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用Aβ1-40和AlCl3双干预法建立AD样大鼠模型;造模成功的大鼠随机分为AD模型组(AD)、溶剂对照组(TE)、反义寡核苷酸组(AS)和错义寡核苷酸组(MS);以Morris水迷宫观察大鼠逃避潜伏期,用TUNEL染色检测大鼠海马细胞损伤情况;免疫印迹法检测CaMKⅡ、NR1和NR2B在大鼠海马的表达变化。结果 AS组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期显著缩短,海马细胞损伤明显减轻,海马CaMKⅡ、NR1和NR2B的表达显著减少;与AD组、TE组或MS组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 CaMKⅡ反义寡核苷酸能够通过改善AD样大鼠学习记忆能力和减轻AD样大鼠海马细胞损伤而发挥神经保护作用,且这种神经保护作用与其降低CaMKⅡ、NR1和NR2B的病理性高表达有关。

山羊心淋巴管/结的分布及引流

应用淋巴管微灌注技术观察山羊心的淋巴管分布及与血管的位置关系,为临床心外科手术积累解剖学资料。本实验取羊心30例,从心尖向心底方向在心外膜、心内膜下及心肌层内注入少量6%过氧化氢,显微镜下找到淋巴管,并将颜料和显影剂的混合物经30g注射针注入,对所见的淋巴管进行追踪解剖、拍照及X线记录。

大鼠腹盆腔及后肢退化淋巴结的形态学

目的:比较青、老年大鼠腹盆腔及后肢实质与退化淋巴结的位置和形态结构的变化与关系.方法:取24月龄老年和6月龄青年雄性SD大鼠各8只,经后肢淋巴管注射墨汁或硫酸钡混悬液后观察所经淋巴结形态,H-E染色比较退化淋巴结较实质性淋巴结在基本形态上的改变,LYVE-1免疫组织化学法观察皮质淋巴窦和髓窦的连通情况,最后比较青年与老年、深层与浅层淋巴结退化情况.结果:老年大鼠退化淋巴结数量显著多于青年组,浅层退化淋巴结数量多于深层.H-E染色见退化淋巴结皮质萎缩,淋巴细胞、生发中心和毛细血管后微静脉减少,纤维结缔组织和脂肪组织增生,或出现多量大泡样结构,髓窦扩张.LYVE-1免疫组织化学染色见皮质淋巴窦与髓窦连通,部分淋巴窦充满淋巴细胞.结论:淋巴结退化与年龄和位置有关,退化淋巴结的组织学表现与其功能密切相关,淋巴组织减少可能是造成机体免疫功能下降的原因之一.

Ro25-6981对脑缺血再灌注模型大鼠海马齿状回颗粒下层nestin和BrdU表达的影响

目的:研究Ro25-6981对成年大鼠短暂性脑缺血再灌注海马齿状回颗粒下层(subgranular zone,SGZ)神经干细胞增殖的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠在进行侧脑室置管7 d后,随机分为正常组、假手术组和脑缺血再灌注组,每组又分别再分为Ro25-6981组和生理盐水组。缺血再灌注组大鼠采用四动脉阻断前脑缺血再灌注模型,即缺血15 min再灌注1、3、7、14、21、28 d和35 d,缺血前15 min经侧脑室套管注射Ro25-6981或生理盐水。各组大鼠均采用免疫组织化学显示SGZ区Brd U、nestin阳性细胞的表达情况,采用免疫荧光双重标记法检测再灌7 d时SGZ区Brd U/nestin双标阳性细胞数量的改变。结果:脑缺血再灌注生理盐水组SGZ区nestin阳性细胞表达再灌1 d时开始增多,7 d时达到峰值,14 d时急剧下降,至35 d时降至正常水平;缺血前给予Ro25-6981,各时间点的nestin阳性细胞表达均有所下降,其中在3、7 d和14 d时减少明显,差异有统计学意义(P<0.05)。脑缺血再灌注生理盐水组SGZ区Brd U阳性细胞再灌1 d开始增殖,7 d达到峰值,35 d降至正常水平;缺血前给予Ro25-6981,各时间点的Brd U阳性细胞表达均有所下降,其中在3、7、14 d和21 d时减少明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与脑缺血再灌注生理盐水组相比,Ro25-6981可以降低脑缺血再灌7 d海马SGZ区的Brd U/nestin双标阳性细胞密度,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Ro25-6981可以抑制前脑缺血再灌注后海马SGZ区神经干细胞的增殖,提示NR2B参与并促进了前脑缺血再灌注引起的神经干细胞的增殖。

细胞分裂周期蛋白42结构域突变真核表达质粒的构建与鉴定

目的:构建细胞分裂周期蛋白(Cdc42)的结构域突变质粒,即鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)结构域突变质粒。方法:根据NCBI中小鼠Cdc42全长cDNA序列找到结构域GEF,将GEF的氨基酸突变成丙氨酸,根据突变后的序列设计引物,PCR扩增得到目的片段588bp,限制性内切酶EcoRI和HindⅢ双酶切后插入到编码红色荧光蛋白(RFP)和his标签的真核表达载体PM-his-RFP中,构建PM-his-Cdc42(GEF)-RFP重组质粒,进行酶切电泳及DNA测序验证。用脂质体介导方法将重组质粒瞬时转染HT22细胞,通过荧光显微镜观察转染效率。结果:经酶切及测序结果显示突变后结构域插入的位置和序列正确,成功构建Cdc42蛋白GEF结构域突变质粒;荧光结果表明,重组质粒顺利转染HT22细胞。结论:成功构建的Cdc42结构域突变质粒为Cdc42蛋白的功能研究提供有效的操作工具。

大鼠MKK7真核表达质粒的构建及其在COS7细胞中的转染效率

目的探索大鼠丝裂原活化蛋白激酶激酶7（mitogen activated protein kinase kinase7，MKK7）基因在体外细胞实验中的表达调控规律。方法利用分子生物学方法将大鼠MKK7全长cDNA序列克隆到编码增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，eGFP）和Flag（编码DYKDDDDK亲水性多肽）标签的真核表达载体Pvpl6-AD中，构建出Pvpl6-Flag-MKK7-eGFP重组质粒。通过酶切及DNA测序的方法验证重组质粒序列的正确性后，采用脂质体介导方法将重组质粒瞬时转染COS7细胞，通过荧光显微镜观察质粒与脂质体不同比例情况下以及确定最高转染效率的比例后不同时间段大鼠MKK7基因表达情况。结果成功构建重组真核表达质粒Pvpl6-Flag-MKK7-eGFP。酶切及DNA测序方法确定重组质粒中大鼠MKK7序列与原序列一致。重组质粒与脂质体的比例为1：3时，重组质粒在COS7细胞中的转染效率最高，差异具有统计学意义（P〈0．05）。质粒转染后72h时，COS7细胞中MKK7蛋白表达量相对最高，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论大鼠MKK7重组真核表达载体的构建及其在COS7细胞中转染效率的探索工作为研究大鼠MKK7基因在体外引起细胞分化、增殖、凋亡、炎症反应和应激反应等一系列生物学改变奠定基础。

小清蛋白中ErbB4免疫荧光染色条件的优化

[目的]探究免疫荧光标记小清蛋白(parvalbumin,PV)阳性神经元中ErbB4的最佳实验条件。[方法]小鼠海马组织,PV和ErbB4做免疫荧光染色,通过激光共聚焦观察多聚甲醛后固定时间、抗原修复和一抗孵育时间对PV和ErbB4免疫荧光检测效果的影响。[结果]多聚甲醛后固定不同时间(8 h、48 h和240 h),一抗孵育40 h,结果显示,随着后固定时间的延长,PV和ErbB4的荧光强度和数量逐渐降低(P<0.05)。后固定240 h的脑组织,抗原修复后,PV和ErbB4荧光强度和数量显著升高(P<0.05)。一抗孵育12 h检测到PV和Erbb4荧光强度明显低于40 h(P<0.05),ErbB4阳性神经元的数量低于40 h(P<0.05)。[结论]PV阳性神经元中ErbB4的免疫荧光染色的最佳条件是后固定8 h、一抗孵育40 h。对于多聚甲醛后固定较久的组织,抗原修复能够提高其染色效果。