miRNA-let-7a在PCOS小鼠模型和COV434细胞中的表达及其对PI3K的影响

目的探讨miRNA-let-7a在多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)小鼠模型和COV434细胞中的表达及其对PI3K的影响,为治疗PCOS为代表的不孕症提供新的思路和靶点。方法用放射免疫法检测PCOS小鼠雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)及睾酮(T)的水平;随后颈椎脱臼法处死小鼠,取双侧卵巢组织进行称重,于显微镜下取出卵子,观察各组卵子数量,qRT-PCR检测miRNA-let-7a在PCOS小鼠卵巢组织中的表达情况;在过表达和抑制miRNA-let-7a后,通过qRT-PCR和Western blot分别检测人卵巢颗粒细胞系COV434细胞中PI3K表达水平的变化。结果miRNA-let-7a在PCOS小鼠卵巢组织中的表达水平显著增高,过表达miRNA-let-7a后,PI3K在人卵巢颗粒细胞COV434细胞中的mRNA以及蛋白表达水平显著升高;抑制miRNA-let-7a后,PI3K在人卵巢颗粒细胞COV434细胞中的mRNA以及蛋白表达水平显著降低。结论miRNA-let-7a在PCOS小鼠卵巢组织中的表达水平显著增高,可能通过调节PI3K的表达,进一步参与调控卵巢颗粒细胞生长及发育。

复发性流产患者血清维生素D水平与血栓前状态相关指标的关系研究

目的探讨复发性流产(RSA)患者血清维生素D水平与血栓前状态相关指标的关系。方法选取150例RSA患者,根据血清25羟维生素D[25(OH)D]水平不同分为25(OH)D正常60例为正常组,25(OH)D降低90例为低水平组。比较两组血栓前状态相关指标。结果年龄≥30岁患者维生素D水平低于<30岁患者,差异有统计学意义(P<0.05)。而不同体质量指数(BMI)、地区、流产时间、流产次数、流产类别患者维生素D水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。低水平组抗β2-糖蛋白1抗体(β-GP)、抗心磷脂抗体(ACA)阳性率分别为13.33%、16.67%,均高于正常组的3.33%、5.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。低水平组同型半胱氨酸(HCY)、D-二聚体(D-D)指标高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05),而两组凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fbg)及抗凝血酶III(AT-III)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论RSA患者维生素D缺乏比例高,患者血栓前状态相关指标异常。

精囊腺在雄性小鼠精子受精过程中的作用研究

目的探讨精囊腺在小鼠精卵结合中的作用。方法取8周龄C57BL/6小鼠,构建精囊腺暴露小鼠(对照组)与精囊腺切除小鼠(实验组)模型。观察2组小鼠睾丸形态并称重,苏木精-伊红染色法观察实验组和对照组小鼠的睾丸管腔形态结构。进行附睾尾精子计数;采用计算机辅助精液分析仪(CASA)分析精子活力。将实验组和对照组小鼠分别与C57BL/6雌鼠按雄∶雌为1∶1的比例交配,继续饲养6个月,观察产仔数目。将雌鼠按照2∶1比例分别与对照组和实验组小鼠交配,6d后取子宫内胚胎拍照计数。雌鼠经药物促排卵后分别与实验组和对照组小鼠以1∶1的比例合笼交配,进行体内受精实验,次日手术获取体内受精原核并进行培养,实时观察并记录2组胚胎体外培养的发育情况。结果与对照组相比,实验组小鼠的睾丸形态、重量、管腔组织形态结构无显著性差异(P>0.05)。实验组小鼠的精子活力和计数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。生育力检测实验显示,实验组雄鼠均不育,对照组雄鼠与雌鼠交配后,雌鼠平均每窝产仔7只左右。与实验组雄鼠交配的雌鼠,未见胚胎。体内受精实验表明,实验组小鼠精囊腺切除后,部分受精卵可形成原核,但无法形成正常的4细胞。结论精囊腺切除后小鼠部分精子可以完成受精并发育成2细胞,却无法形成正常的4细胞,最终导致不育。