基于生物打印技术的间接共培养体系的构建

目的构建牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)与人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的间接共培养模型,为建立可应用于体内外的间接共培养体系打下基础。方法配制5%甲基丙烯酰化明胶(GelMA)30胶,摸索三维生物打印的最佳参数,进行可打印性测试。使用活死染色实验检测DPSCs和HUVECs在GelMA30胶中的存活情况。构建6组共培养模型:DPSCs与HUVECs直接共培养(M),单纯DPSCs培养(D-D200),单纯HUVECs培养(H-D200),DPSCs与HUVECs间接共培养(M-D0、M-D200、M-D400),拍照观察细胞共存情况。结果Pr计算结果为0.97±0.02,表明结构具有良好的可打印性。第7天DPSCs活细胞率为96.48%,HUVECs活细胞率为96.00%,证明细胞保有活力。6组共培养模型打印成功。结论利用三维生物打印可以构建DPSCs与HUVECs的间接共培养体系,为后续的研究奠定基础。

不同颈部螺纹设计种植体周围牙槽骨应力分布的三维有限元分析

目的:运用三维建模和有限元分析软件,构建两种螺纹的种植体颈部结构,分析其与皮质骨接触应力集中区域应力变化及分布。方法:选取1例下颌无牙颌患者锥形束CT扫描图像数据,利用MIMICS、CREO Elements/Pro软件建立Ⅱ类骨下颌骨块模型,分为颈部微螺纹种植体模型组(Mi组)和普通螺纹种植体模型组(Ma组),并进行装配得到三维有限元模型。对比分析垂直和斜向载力方式下,两组种植体骨界面Von-Mises力峰值、剪切力峰值。结果:在所有模型中,最大Von-Mises应力和剪切应力均出现在种植体颈部的皮质骨区。Mi种植体-皮质骨界面的Von-Mises力和剪切力峰值均明显小于Ma种植体,种植体-松质骨界面Von-Mises力和剪切力峰值差异均不明显。结论:相对于普通螺纹种植体,颈部微螺纹种植体更适用于Ⅱ类骨的种植体设计。

葛根素调节Nrf2/HO-1信号通路对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应的影响

目的:探讨葛根素(GGS)调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGFs)炎症反应的影响。方法:体外培养HGFs细胞,将HGFs细胞分为空白对照(CK)组(0.9%氯化钠)、LPS组(100 nM LPS)、LPS+GGS低剂量(LPS+GGS-L)组(100 nM LPS+50μM GGS)、LPS+GGS高剂量(LPS+GGS-H)组(100 nM LPS+100μM GGS)、LPS+GGS-H+ML385(Nrf2/HO-1信号通路抑制剂)组(100 nM LPS+100μM GGS+10μM ML385)。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖能力;酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素(IL)-6、乳酸脱氢酶(LDH)、IL-10、IL-1β水平;试剂盒检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;流式细胞术检测HGFs细胞凋亡率;碘化丙啶(PI)染色法检测细胞膜孔的形成;Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Nrf2、HO-1蛋白表达。结果:与CK组相比,LPS组HGFs细胞OD_(450)(24、48 h)值、IL-10水平、GSH-Px和SOD活性、Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达显著降低,IL-6、LDH、IL-1β水平、MDA含量、细胞凋亡率、细胞PI染色阳性率、Bax和NLRP3蛋白表达显著升高(P<0.05);与LPS组相比,LPS+GGS-L组和LPS+GGS-H组HGFs细胞OD_(450)(24、48 h)值、IL-10水平、GSH-Px和SOD活性、Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达显著升高,IL-6、LDH、IL-1β水平、MDA含量、细胞凋亡率、细胞PI染色阳性率、Bax和NLRP3蛋白表达显著降低(P<0.05);ML385可减轻GGS对LPS诱导的HGFs细胞炎症损伤的改善作用(P<0.05)。结论:GGS可能通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻LPS诱导的HGFs细胞炎症和氧化应激反应,降低细胞凋亡。