徐州市新生儿丙酸血症筛查与基因突变分析

目的了解徐州市新生儿丙酸血症的筛查情况、丙酸血症患病率、生化检查结果、基因突变特点及治疗随访情况。方法前瞻性采集2015年9月至2018年9月徐州市活产新生儿血样,应用液相色谱串联质谱技术进行氨基酸和酰基肉碱谱筛查,并结合气相色谱-质谱技术检测尿有机酸及基因突变分析确诊。对丙酸血症患儿的临床表现、实验室检查、基因突变、治疗及预后进行分析。结果共筛查活产新生儿297 610名,确诊丙酸血症患儿8例,患病率为1∶37 201,其中1例确诊前已发病,表现为反复呕吐、嗜睡、呼吸急促、肌张力低下,7例确诊时无任何临床症状。基因突变分析证实6例为PCCA基因突变,2例为PCCB基因突变。共检出10种PCCA基因突变,包括错义突变5种,剪接突变4种,同义突变1种,其中7种为新突变;4种PCCB基因突变,包括错义突变2种,移码重复突变1种,剪接突变1种,其中3种为新突变。8例丙酸血症患儿中1例因家长拒绝治疗死亡,7例治疗后血丙酰肉碱、丙酰肉碱与乙酰肉碱比值、尿3-羟基丙酸及甲基枸橼酸水平较治疗前显著下降。随访4例生长发育正常,3例出现不同程度的精神运动发育迟缓。结论新生儿疾病筛查对早期确诊丙酸血症至关重要。徐州地区新生儿丙酸血症患病率较高,临床表现以神经系统症状为主,主要病因为PCCA基因缺陷,以错义突变多见。

徐州地区新生儿希特林蛋白缺乏症筛查和基因突变分析

目的通过筛查了解徐州地区新生儿希特林蛋白缺乏所致新生儿肝内胆汁淤积症(neonatal intrahepatic cholestasis caused by cirtin deficiency,NICCD)的发病情况、临床特征和基因突变特点。方法对2015年9月至2020年9月徐州地区采用串联质谱技术进行遗传代谢病筛查的新生儿进行前瞻性研究,筛查疑似的患儿进一步通过尿有机酸及SLC25A13基因突变分析确诊,对确诊病例的临床表现、生化指标改变、基因突变特点、治疗及预后进行分析。结果共筛查活产新生儿468494名,疑似患儿112例,进行尿有机酸分析95例,SLC25A13基因突变分析95例,共确诊NICCD患儿13例,患病率1∶36038。多数患儿早期表现为黄疸消退延迟、喂养困难及体重不增等。生化指标改变包括胆汁酸升高、肝功能异常、甲胎蛋白异常升高、低血糖、血红蛋白降低、凝血功能异常及血氨增高等。血氨基酸及酰基肉碱谱检测提示瓜氨酸、蛋氨酸、精氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸等特异性升高,部分伴酰基肉碱轻度升高;尿有机酸分析主要表现为4-羟基苯乳酸和4-羟基苯丙酮酸升高。13例患儿均进行基因检测,共检出13种突变类型,分别为c.852;55delTATG、c.511dupG、c.1638;660dup、IVS16ins3kb、c.1078C>T、c.615+5G>A、c.742G>A、c.44G>A、c.1311+1G>A、c.1399C>T、c.889G>T、c.1177+1G>A、c.1841+3;841+4del,其中c.852;55delTATG最常见,5种为新发变异,新发变异中c.1841+3;841+4del、c.511dupG和c.889G>T预测为有害变异。确诊病例予以饮食管理和对症治疗,均于1岁内症状缓解,生化指标明显改善。结论徐州地区NICCD患病率为1∶36038,c.852;55delTATG变异出现频率最高。共检测出5个新发变异位点,扩展了SLC25A13基因变异谱。NICCD患儿多数预后良好,需早期诊断和治疗,终身随访。

串联质谱筛查新生儿肉碱吸收障碍的临床研究

目的了解徐州地区新生儿游离肉碱及酰基肉碱水平,总结该地区肉碱吸收障碍发病率及临床特点.方法利用串联质谱技术针对徐州地区2015年11月至2017年12月出生的216 903例新生儿进行肉碱吸收障碍疾病筛查,根据不同胎龄、出生体质量、采血日龄、季节进行分组,选取胎龄<37周为早产组、胎龄37~41+6周为正常胎龄组作为胎龄分析的组别;选取出生体质量<2 500 g为低出生体质量、出生体质量2 500~3 999 g为正常出生体质量作为体质量分析的组别.采用SPSS 16.0软件进行数据分析,明确上述因素对于串联质谱肉碱各项指标检测的影响.针对筛查阳性患儿进行DNA测序确诊并分析相关致病基因型,同时对确诊患儿进行预后随访.结果不同胎龄组除C3、C8、C10:2水平差异无统计学意义(均P>0.05)外,其他肉碱水平差异均有统计学意义(均P<0.05);出生体质量组仅C10:2水平差异无统计学意义(P>0.05),其他肉碱水平差异均有统计学意义(均P<0.05);不同采血日龄仅C18:2水平差异无统计学意义(P>0.05),其他肉碱水平差异均有统计学意义(均P<0.05);而不同季节组的游离肉碱及酰基肉碱水平差异均有统计学意义(均P<0.05).肉碱吸收障碍筛查确诊10例新生儿原发性肉碱吸收障碍,7例母源性肉碱吸收障碍,肉碱吸收障碍在徐州地区发病率约为1:21 690.其致病基因型在徐州地区具有特定的区域分布特征,其中c.1400C>G致病突变最为常见.结论胎龄、出生体质量、采血时间、季节对串联质谱肉碱检测存在不同程度的影响,徐州地区肉碱吸收障碍致病基因型具有地区特性,母源性肉碱吸收障碍呈现较高的发病比例,临床应提高对于母源性肉碱吸收障碍筛查的重视.

家族性甲状腺功能减退症的新生儿筛查及治疗转归

目的了解家族性甲状腺功能减退症的临床表现、生化检查及治疗随访情况。方法回顾性分析2003年7月至2018年12月采用时间分辨荧光免疫法测定新生儿促甲状腺激素(TSH)水平筛查CH的资料;阳性召回的可疑患儿采用化学免疫发光法测定血清甲状腺功能,对确诊为家族性甲状腺功能减退症患儿的临床资料及治疗随访结果进行总结分析。结果 15年来共筛查新生儿1 658 780例,确诊家族性甲状腺功能减退症患儿63例,分别来自32个家系,患病率为1/26 330。早期接受治疗并正规服药的家族性甲状腺功能减退症患儿有58例,除外1例家族性矮身材,其余57例末次随访其体格和智力水平均在正常范围内。随访满2年及以上的56例家族性甲状腺功能减退症患儿中,23例(41.1%)为暂时性甲状腺功能减退,33例(58.9%)为永久性甲状腺功能减退。结论新生儿筛查可早期诊断家族性甲状腺功能减退症,早期替代治疗后体格及智力发育可达正常;遗传因素可能是家族性甲状腺功能减退症的分子学机制。

新生儿甲基丙二酸血症的筛查与基因突变分析

目的 探讨甲基丙二酸血症（methylmalonic aciduria,MMA）患儿的临床表现、生化检查、基因突变特点及治疗随访. 方法 利用液相色谱串联质谱技术对徐州市2016年1月至2017年12月出生的207 308例新生儿进行酰基肉碱谱筛查,结合气相色谱质谱技术检测尿有机酸及二代基因测序技术进行确诊.单纯型MMA患儿给予饮食控制及左卡尼汀治疗,MMA合并同型半胱氨酸血症（简称合并型MMA）患儿给予维生素B12、左卡尼汀、甜菜碱及亚叶酸钙治疗.对确诊患儿的临床表现、生化检查、影像学异常、基因突变特点及治疗预后进行分析.采用配对样本t检验对患儿治疗前后的生化指标进行比较. 结果 共确诊12例MMA患儿,其中单纯型MMA3例,均为维生素B12无效型,确诊时均无任何临床症状;合并型MMA 9例,均为维生素B12有效型,其中4例确诊时均无任何临床症状,5例确诊前已发病,主要表现为反应差、反复呕吐、喂养困难、呼吸困难、贫血、黄疸等.12例均行头颅MRI,异常表现为双侧基底节对称性病变、脑外间隙增宽、脑室扩张及脑白质改变.12例患儿均进行基因突变分析,其中MUT基因突变3例,MMA CHC基因突变9例.MUT基因突变类型共5种,分别为c.ll06G＞A、c.1880A＞G、c.441T＞A、c.581C＞T、c.1741C＞T.MMA CHC基因突变类型共8种,分别为c.609G＞A、c.658_660delAAG、c.482G＞A、c.1A＞G、c.567dupT、c.80A＞G、c.276＋lG＞A、c.228_231delTGAC,其中c.609G＞A为最常见的基因突变,c.276＋lG＞A和c.228_23 ldelTGAC为新突变.3例单纯型MMA患儿中,1例因家长拒绝治疗而死亡;2例治疗1个月后血丙酰肉碱、丙酰肉碱与乙酰肉碱比值、同型半胱氨酸及尿甲基丙二酸、甲基枸橼酸水平明显下降,随访过程中l例生长发育正常,1例生长发育迟缓.9例合并型MMA患儿治疗1个月后血丙酰肉碱、丙酰肉碱与乙酰肉碱比值、同型半胱氨酸及尿甲基丙二酸、甲基枸橼酸水平[分别为（3.18±1.08）μmol/L、0.13±0.05、（34.41±17.33）μmol/L、5.35±2.15、1.02±0.48]较治疗前[分别为（7.12±1.90） μmol/L、0.88±0.35、（136.48±38.14）μmol/L、103.51±69.62、7.95±6.88]均明显下降,差异均有统计学意义（t值分别为-6.687、-6.166、-12.941、-4.208及-3.015,P值均＜0.05）;随访过程中2例患儿死亡,3例生长发育正常,4例出现不同程度的精神运动发育迟缓. 结论 利用液相色谱串联质谱技术进行新生儿疾病筛查对早期确诊MMA至关重要.徐州地区MMA的主要病因是MMA CHC基因缺陷,其中c.609G＞A突变出现频率最高;患儿预后与疾病类型、发病年龄及对维生素B12的反应性等因素有关.

原发性肉碱缺乏症的筛查与患者SLC22A5基因突变分析

目的探讨原发性肉碱缺乏症（pfimary camitine deficiency，PCD）患者的临床特点和SLC22A5基因突变情况。方法利用液相（色谱）串联质谱技术对徐州市2015年9月至2017年12月出生的210908例新生儿和576例临床遗传代谢病疑似患儿进行游离肉碱及酰基肉碱检测，对游离肉碱降低的患儿进行SLC22A5基因突变分析以确诊。对确诊患儿的临床表现、生化特点、基因特点及治疗预后进行分析，并采用配对样本t检验对患儿治疗前后的生化指标进行比较。结果共确诊10例PCD患儿（其中9例来自新生儿筛查，1例来自临床患儿）和7例母源性肉碱缺乏症患者，口服左卡尼汀治疗后血游离肉碱和其他酰基肉碱水平恢复正常。1例来自临床患儿的临床症状消失，16例来自新生儿筛查的患儿无任何临床症状，生长发育正常。17例患儿均进行基因突变检测，共检出10种突变类型，分别为c．1400C〉G、c．1462C〉T、c．797C〉T、c．95A〉G、c．92C〉T、c．1093A〉C、c．761G〉A、c．865C〉T、c．428C〉T、c．1195C〉T，其中c．1093A〉C和c．92C〉T为新突变，c．1400C〉G为最常见的突变类型。结论液相（色谱）串联质谱技术可筛查出新生儿及母源性肉碱缺乏症患者，徐州地区c．1400C〉G突变出现频率最高，早期治疗预后良好。