热应激对鸡肠道屏障的影响及损伤机制研究进展

热应激通过上调皮质醇激素,升高血清内毒素含量,上调肠道内炎症、氧化、凋亡水平增加肠道通透性,最终引发机体系统性炎症反应综合征(SIRS)、多器官功能障碍(MODS),给养殖业造成损失。近年来全球温度持续上升,热应激造成的畜牧业损失引起广泛关注。本文总结了热应激影响鸡生产性能、肠道形态结构、肠道屏障功能(包括炎症反应、氧化应激、凋亡水平)的相关研究及机制,旨在为防治家禽高温应激提供理论参考。

基于系统生物学分析探究热应激诱导鸡肠道损伤的作用机制

【目的】利用系统生物学分析和鸡胚十二指肠上皮细胞模型探究热应激诱导肠道损伤的作用机制,筛选出家禽热应激诱导肠道损伤的作用靶标,为缓解热应激诱导的肠细胞氧化应激提供理论支撑。【方法】基于NCBI数据库筛选热应激诱导肠道损伤的作用靶标,通过GO功能注释和KEGG信号通路富集分析获得相关代谢通路;分离鸡胚十二指肠上皮细胞构建42℃热应激模型,通过检测细胞损伤病理、细胞活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性、抗氧化酶活性、丙二醛(MDA)含量及关键基因(Nrf2和HSP70)表达情况等,进一步确认热应激对肠细胞的损伤作用。【结果】将热应激作用靶标与肠道损伤作用靶标取交集,共获得23个热应激诱导肠道损伤的作用靶标,分别是BCL2、CD4、CFTR、ERN1、FOXM1、FOXP3、HMOX1、HSF1、HSP90AA1、HSP70、HSPA4、HSPA8、JUN、MAPK1、MTOR、NFKB1、NLRP3、PLK1、RHOB、SIRT1、SUMO_(2)、TP53和YAP1。KEGG信号通路富集分析发现热应激诱导肠道损伤与NOD-样受体信号通路、沙门氏菌感染、凋亡、细胞衰老及内质网内蛋白加工等有关;GO功能注释分析发现热应激诱导肠损伤与细胞缺氧反应、细胞对镉离子反应、细胞对热反应及热休克蛋白结合等有关。鸡胚十二指肠上皮细胞体外热应激模型验证发现,热应激能导致鸡胚十二指肠上皮细胞空泡变性,严重时则导致细胞核浓缩深染的变性坏死;热应激还会引起鸡胚十二指肠上皮细胞的活性降低,而细胞上清液中的LDH含量升高;此外,随着热应激时间的延长,鸡胚十二指肠上皮细胞内的MDA含量不断上升,而超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性均呈下降趋势;热应激导致鸡胚十二指肠上皮细胞内Nrf2基因表达下调、HSP70基因表达上调。【结论】细胞内氧化—抗氧化失衡是热应激诱导肠道损伤的重要因素,而热休克蛋白是机体激活细胞抵御热应激损伤的重要保护机制。

莱芜仔猪肠道菌群组成初步分析

猪的肠道菌群组成与种类及健康状态密切相关,研究健康、品种优良的猪的肠道菌群组成对于养猪业的发展具有积极意义。本研究采用16S rRNA高通量测序方法对10日龄莱芜哺乳仔猪腹泻仔猪的粪便进行测序分析。结果显示,健康仔猪共有优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes),共有优势菌属为乳杆菌属(Lactobacillus);腹泻仔猪共有优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes),共有优势菌属为乳杆菌属(Lactobacillus)。此外,两组比较,Lactobacillus、Escherichia-Shigella、Prevotella_9、Fusobacterium、Prevotellaceae属在腹泻仔猪组丰度水平高,而Acinetobacter、Jeotgalibaca、Treponema_2、Psychrobacter属在健康仔猪组丰度水平高。本研究结果为莱芜猪肠道菌群多样性研究提供基础数据,并为后期调节肠道菌群、促进猪的健康成长提供参考依据。

基于超声辅助技术提取食品原料中脂质的研究进展

随着近年来食品工业的快速发展,食用油脂的需求量越来越大,因此采用高效的萃取方法变得尤为重要。与传统的溶剂萃取不同,超声辅助提取技术具有提取效率高、提取时间短的优势。超声辅助提取技术利用空化效应、机械作用等破坏细胞壁,进而促进溶剂对脂质的萃取。该文主要论述用于超声辅助提取的原料及其提取机理,同时综述超声辅助提取技术对油脂的提取效果及影响其提取率的因素,总结用于油脂提取中与超声技术组合的耦合技术,为超声辅助提取技术在食品脂质中的应用提供理论支持。

锌原卟啉形成和呈色机理及替代肉制品中亚硝酸盐的研究进展

亚硝酸盐因特有的功效被广泛用于肉制品加工中,特别是其促进肉制品发色和抑菌的作用。由于消费者对亚硝酸盐健康风险的担忧和对天然清洁标签产品的需求,寻找亚硝酸盐替代品成为肉制品加工的研究热点。锌原卟啉(zinc protoporphyrin,ZnPP)作为一种天然的色素物质,在促进肉制品发色方面发挥了显著优势。本文阐述了ZnPP的性质、形成机理、定量分析方法和在肉制品中的分布情况,重点综述了ZnPP形成的影响因素,并对其应用前景进行了展望,以期为低硝肉制品加工产业的发展提供新的途径。

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白特异性纳米抗体的原核表达及鉴定

为获得针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5蛋白的特异性纳米抗体,并鉴定其抗原结合活性,以本实验室前期获得的PRRSV GP5蛋白特异性纳米抗体VHHGP5基因片段为模板,使用PCR对目的片段进行扩增,将扩增的片段经双酶切处理后连接到pColdSUMO-FLAG载体上,随后转化至E.coli TOP 10感受态细胞。经菌液PCR鉴定,将构建成功的重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG作为诱导剂对目的蛋白进行诱导表达,表达产物通过Ni-NTA亲和层析柱纯化。通过SDA-PAGE凝胶电泳分析表达及纯化后的蛋白,同时使用ELISA方法检测纯化后的纳米抗体效价,并使用Western blot鉴定纯化后的蛋白。SDS-PAGE结果显示,成功获得了大小约36 kDa的重组蛋白,利用原核表达系统制备的PRRSV GP5特异性纳米抗体重组蛋白以可溶性形式表达;ELISA结果显示,该纳米抗体结合抗原的效价为1:50000;Western blot结果显示,该纳米抗体具有较好的反应性和特异性。本试验为PRRSV检测用及治疗用新型抗体开发奠定了基础。

超声辅助水热法提取牛骨油工艺参数优化

为提高工业生产中牛骨油的提取率,以黄牛骨为原料,采用超声辅助水热提取法提取牛骨油。通过单因素及响应面试验研究牛骨油提取工艺,并对牛骨油的酸价、过氧化值及脂肪酸组成进行分析。结果表明,牛骨油提取的最佳工艺为超声功率300 W、超声时间50 min、超声温度100℃、热提温度125℃、热提时间90 min、料液比为(质量比)1∶1,此工艺条件下,牛骨油提取率可达98.86%。利用Design expert软件对影响牛骨油提取率的主要因素及其相互作用进行探讨,结果表明热提温度和热提时间对骨油提取率的影响显著大于其他因素(P<0.01),料液比对骨油提取率的影响较小。与当前食品企业采用的牛骨油水热提取工艺相比,超声辅助水热提取法骨油提取率提高约12%。优化工艺得到牛骨油的酸价、过氧化值均小于GB10146-2015规定值,且脂肪酸含量不低于传统的水热提取工艺(不饱和脂肪酸(unsaturated fatty acid,UFA)总量和C18∶1n9c除外)。牛骨油中共检测出17种脂肪酸,C18∶1n9c、C16∶0和C18∶0是其主要脂肪酸,分别约达总脂肪酸的44%、23%和19%,饱和脂肪酸(saturated fatty acid,SFA)与UFA比值约为1∶1,UFA略高于SFA。研究结果为牛骨油的工业生产提供了理论参考。

生态养猪模式中发酵床优势细菌的微生物学性质及其应用研究

从生态养猪模式的发酵床中分离纯化到14株优势好氧细菌,通过形态学、16S rDNA序列分析和同源性比较,鉴定均为芽孢杆菌属不同的种。发酵试验和饲养试验表明,这些菌株在猪粪和垫料组成的发酵床生长优势强,耐发酵高热,能够产生多种与猪粪降解相关的酶类,除臭效果明显;对某些病原菌具有抑制作用,对猪安全并有促进生长的功能,随着在发酵床饲养时间的延长,从对应猪分离的大肠杆菌的抗药性逐渐降低。生态养猪模式是安全环保节约的饲养模式,可以降低大肠杆菌的抗药性,减少药残。

膜分离鸡骨素酶解液美拉德反应产物的初步研究

本研究对鸡骨素酶解液美拉德反应产物(MRPs)膜分离后的不同组分进行了初步分析。首先鸡骨素酶解液经美拉德反应制得鸡骨素酶解液MRPs,再利用膜分离技术将鸡骨素酶解液MRPs进行微滤、超滤、纳滤和反渗透,从而得到不同分子量范围的鸡骨素酶解液MRPs组分;然后通过吸光度和感官仪器分析,检测了鸡骨素酶解液MRPs各组分的褐变程度、风味色泽变化;通过对还原力、ABTS+自由基清除力、AEC抑制率、氧自由基吸收能力(ORAC)及对环状质粒DNA的保护能力的检测,研究了鸡骨素酶解液MRPs各组分的抗氧化特性,并最终对各组分进行了综合评价。结果表明:鸡骨素酶解液美拉德反应中引起褐变的物质分子量大于3 k Da,反应中间产物的分子量集中在0.3~1 k Da;鸡骨素酶解液经美拉德反应后风味得到改善,抗氧化活性显著提高(p <0.05),其中呈味物质主要集中在微滤和纳滤组分,鸡骨素酶解液MRPs中各组分与未分离原液相比抗氧化活性有所降低,但都显著高于鸡骨素酶解液(p <0.05);综合评价显示,鸡骨素酶解液美拉德反应原液的综合得分最高,鸡骨素酶解液MRPs各组分得分也高于鸡骨素和鸡骨素酶解液。

乳酸菌抗氧化活性及其在发酵肉制品中的应用研究进展

乳酸菌作为发酵肉制品中的发酵剂,已被证实具有抗氧化活性,但在发酵过程中,容易受到各种环境胁迫因子的影响,这些胁迫因子能够诱发菌体胞内活性氧自由基的产生和积累,进一步影响菌株的抗氧化活性,很大程度上限制了其在发酵肉制品中的抗氧化作用。本文综述乳酸菌面临的环境胁迫因子,探究其对氧化胁迫的应答与防御机制和抗氧化机理,并阐述提升乳酸菌氧化胁迫抗性的策略及乳酸菌在发酵肉制品中的抗氧化作用。

促甲状腺素释放激素对母猪泌乳等繁殖性能及仔猪生长性能影响的研究

为了研究促甲状腺素释放激素(TRH)对母猪泌乳等繁殖性能及仔猪生长性能的影响,选用经产大白分娩母猪40头,随机分为试验组和对照组各20头,试验组分娩哺乳母猪产后1d、5d,每头各注射2mLTRH注射液。研究结果表明:①产后注射TRH的试验组分娩哺乳母猪比对照组母猪的泌乳力平均提高了3.01%(P<0.05),试验组哺乳仔猪的断乳个体重和断乳窝重分别比对照组提高了2.42%和3.01%(P<0.05)。②试验组母猪在哺乳期的采食量比对照组母猪提高了2.30%(P<0.05),产后注射TRH对母猪断乳体况以及母猪断乳后再繁殖性能等具有一定的改善作用,断乳后10d、20d内母猪的发情率均提高5个百分点。③试验组仔猪在哺乳期间的平均窝增重和日增重比对照组分别提高5.95%和6.49%(P<0.05),而两组的仔猪采食量无显著差异(P>0.05),说明增重速度的提高是由母猪泌乳性能的改善所致。④产后注射TRH使分娩哺乳母猪三联症的发病率降低5个百分点,并对降低仔猪腹泻(腹泻指数降低7.06%,P<0.05)、改善其健康状况具有明显的效果。

诸城猪业集约与分散协同生态化循环发展模式研究

鉴于生猪产业化养殖高污染造成的生猪扩容困难现状,创新性地提出通过组建"三级闭环养猪"组织体系,依托龙头企业建立紧密型生猪专业合作社,构建生猪产业集约经营与分散养殖深度分工协作、循环经营的生态化循环经营模式的组织体系及模式路径,为从产业链全程解决生猪养殖带来的质量安全和环境污染问题,进而促进循环经济发展,拉动区域社会经济增长指明方向。

黑龙江省农业龙头企业战略成本管理探析

本文以“三农”问题为背景,立足黑龙江省,从分析黑龙江省农业龙头企业实施战略成本管理的必要性和可行性入手,得出可以实施现代企业战略成本管理的结论,继而制定了黑龙江省农业龙头企业战略成本管理实施方案,并对方案实施的前提进行了分析。

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A表达的影响

为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染对非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A(NMHCⅡ-A)表达及组织定位的影响,本研究选取5月龄的PRRSV阴性健康长白猪和莱芜黑猪各12头,分别设感染组和对照组,滴鼻感染PRRSV后分别于3 d、7 d、14 d、21 d、28 d迫杀,分别对器脏进行病理组织学观察,免疫组织化学(IHC)和荧光定量PCR(q PCR)检测。组织病理结果显示,PRRSV对商品长白猪产生较强的致病性,感染猪表现明显的免疫抑制,典型的间质性肺炎和各器官炎症;而莱芜黑猪病轻微,仅呈轻微的间质性肺炎,部分淋巴结出现坏死性炎症。IHC检测结果显示,正常组织细胞中均有NMHCⅡ-A表达,但在肺、心肌、脾、扁桃体、软骨中表达较高,其主要定位于细胞浆中,两个品种间无显著差异;PRRSV感染后,NMHCⅡ-A表达趋势增强,且出现于细胞核中,推测PRRSV感染增强了NMHCⅡ-A核浆穿梭功能,两个品种间无显著差异。RT-q PCR检测结果显示,PRRSV在组织中的病毒载量与NMHCⅡ-A的转录水平呈正相关,不同组织间波动规律相似,但在不同品种间波动程度差异明显。综上所述,PRRSV感染对猪体内NMHCⅡ-A的表达产生了明显的影响,但品种间差异不明显。本实验为NMHCII-A作为PRRSV抑制物的候选蛋白提供了实验依据,并为今后PRRSV的防控奠定了基础。

诸城生猪产业集约与分散生态化循环经营机制研究

规模化猪场用水冲式清除粪污,1头生猪日污水排放量30kg,按行业污染负荷折算,一头猪相当于10口人。产业化生猪养殖的高污染,成为制约生猪产业发展的重要因素,在养猪业发展循环经济,实现社会经济与环境协调发展,成为提高生猪生产及农业综合经济效益,减少废弃物的排放,降低养猪对环境的污染和对人类的危害,提供安全的绿色产品,提高人们生活水平的迫切需要,

绵羊骨骼肌转录组高通量测序从头组装和特征分析

本实验旨在对绵羊肌肉转录组进行组装分析,以丰富绵羊的基因组并为进一步对绵羊的相关基因的分子遗传学研究奠定基础。选取Illumina Hiseq 2000测序平台对杜泊羊和小尾寒羊的骨骼肌转录组文库进行了高通量测序,并对测序数据进行从头组装分析。结果表明:两个测序文库共得到103058824个长为2×90bp的高质量的测序序列,经从头组装共产生了145524个unigenes。两个文库间有5718个unigenes差异表达,经GO注释分析后发现它们主要分布在细胞、细胞过程和结合条目中。将两个文库的unigenes进一步组装得到70348个平均长为863bp的all-unigenes,其中35201个被注释到Nr数据库,12219个被注释到COG数据库,并与KEGG数据库中的258个功能通路中的蛋白质和氨基酸新陈代谢通路密切相关。

超声辅助脱脂对牦牛骨粉制备及其理化特性的影响

为提高牦牛骨粉的脱脂率,以青海牦牛股骨为原料进行超声辅助有机溶剂脱脂参数优化,并比较分析了超声脱脂法和蒸煮脱脂法对骨粉制备的影响。该文以脱脂率为指标筛选高效脱脂溶剂;通过响应面法对超声脱脂参数(超声功率、脱脂时间及液料比)进行优化;对比分析了2种脱脂牦牛骨的脱脂率、蛋白质流失率、主要矿物质流失率、微观形态及其骨粉的粒径分布、微观形态、化学结构和钙离子释放度。结果显示:乙酸乙酯为最佳脱脂溶剂;超声功率500 W,超声时间30 min,液料比(体积质量比)6为最佳脱脂参数,此条件下脱脂率达92.00%,显著高于蒸煮脱脂法(71.25%)(P<0.01);与蒸煮脱脂法相比,超声脱脂法蛋白质流失率(8.11%),主要矿物质元素Na、K、Fe、Mn流失率显著降低(P<0.05),微观结构更加致密;超声脱脂法和蒸煮脱脂法制得牦牛骨粉中值粒径(D50)分别为35.84μm和11.73μm;红外光谱显示两者化学结构无明显变化;钙离子释放度结果显示两者同样无显著差异(P>0.05)。超声波辅助有机溶剂脱脂处理制备骨粉可更多保留骨中营养物质,对改善骨粉加工工艺及提高骨粉品质具有一定的参考价值。

生猪产业集约与分散经营生态化循环发展模式研究

规模化猪场用水冲式清除粪污,1头生猪日污水排放量30kg,按行业污染负荷折算,一头猪的污染相当于10人。产业化生猪养殖的高污染,已成为制约生猪产业发展的重要制约因素。

不同部位猪肉肌纤维类型组成与品质特性比较研究

为比较不同部位猪肉肌纤维类型组成与品质特性的差异,选取9头6月龄杜长大三元杂交猪背最长肌(Longissimus dorsi)、半膜肌(Semimembranosus)和半腱肌(Semitendinosus)3个部位猪肉作为研究对象,通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶(nicotinamide adenine dinucleotide-tetrazolium reductase,NADH-TR)染色法研究不同部位猪肉的肌纤维类型组成,并分析肌纤维类型数量比例、平均直径、横截面积、密度等肌纤维特性;测定不同部位猪肉的品质特性(p H值、色泽、蒸煮损失率、剪切力以及质构特性)。结果表明,背最长肌和半膜肌中主要为ⅡB型肌纤维(P<0.05),数量比例分别为82.03%和53.22%,半腱肌则主要由Ⅰ型(45.44%)和ⅡB型(39.01%)肌纤维组成。半膜肌中各类型肌纤维的平均直径和横截面积较大,总肌纤维密度最小(P<0.05),为42.15根/mm2。背最长肌的亮度值和蒸煮损失率最高(P<0.05),pH值和红度值最低(P<0.05);半膜肌的剪切力最高(P<0.05);半腱肌的pH值和红度值最高(P<0.05),亮度值、剪切力和蒸煮损失率最低(P<0.05)。