洛阳市疾病预防控制中心检验监测中心病原微生物室

目的调查2017-2018年洛阳市手足口病优势病原构成,为洛阳市手足口病防控提供技术支撑。方法按照洛阳市手足口病监测方案,每月对所辖县(区)手足口病患儿按要求采集一定数量的粪便标本,共收集粪便标本1710例,发病时间为2017-2018年。采用荧光聚合酶链反应(PCR)对采集粪便标本进行肠道病毒核酸检测,对比分析其优势病原构成情况,对优势病原患儿的社会人口学特征进行统计。结果经实验室诊断,肠道病毒总阳性率为64.44%,其中EV71阳性构成比为9.89%,CA16阳性构成比为11.62%,CA6阳性构成比为45.92%,其余肠道病毒阳性构成比为32.58%;506例CA6阳性患儿中男性占比57.3%,女性占比42.7%;2岁及以下患儿占比76.5%,5岁及以下占比93.3%;散居患儿占比83.2%,入托患儿占比16.8%;城区患儿占比56.9%,乡村患儿占比43.1%。5岁及以下儿童为CA6易感群体。结论洛阳市最常见的手足口病致病类型为EV71、CA16及CA6,其中新优势病原为CA6,5岁及以下儿童为CA6易感群体,临床上需要对上述病原体进一步加强鉴别、诊断,并深入分析其临床特点。

实验室信息系统在临床微生物检验中的应用

目的建立一套能全面控制临床微生物检验分析全过程及内部管理和外部服务的实验室信息系统(LaboratoryInformationSystem,LIS),做到无纸化管理,提高工作效率,全面提升服务质量。方法在windows2003操作系统中采用SQLserver2000系统数据库,用Powerbuilder9.0编写应用程序,各病房电脑终端与LIS服务器相连,通过检验医嘱模块打印检验项目申请条码;LIS系统内部建立录入模块、分析模块、数据处理及报告模块、院感管理及统计模块、数据库维护模块、质控模块、试剂管理模块、物资管理模块、设备管理模块等。结果实现了标本的自动接收、记费、内部条形码、数据的自动传输和审核、工作量及医院感染统计、耐药分析等模块的应用,大量减少了手工劳动及差错率。结论建立一套全面的临床微生物信息管理系统,是提高工作效率,全面提升服务质量的有效途径,也是促进工作模式转变和建立实验室标准化的基础。

Vitek 2 Compact全自动微生物仪检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星敏感性误差的原因

目的探讨为什么不能用Vitek 2 Compact全自动微生物分析仪检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星的敏感性。方法收集用Vitek 2 Compact检测对阿米卡星敏感的鲍曼不动杆菌60株,用K-B法和琼脂稀释法复检,PCR法扩增4种氨基糖苷类修饰酶基因aac(6')-Ⅰ、aac(3')-Ⅰ、aph(3')-Ⅵ及aac(3')-Ⅱ和3种16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtB及rmtC。结果 K-B法和琼脂稀释法的药敏结果一致,与仪器法有差异;50株(83.3%)仪器法敏感的菌株,K-B法表型为阿米卡星双圈耐药,该50株菌均扩增出armA,未扩增出rmtB及rmtC;其中47株(94.0%)扩增出aac(6')-Ⅰ基因,35株(70.0%)扩增出aac(3')-Ⅰ基因,10株(20.0%)扩增出aph(3')-Ⅵ基因,8株(16.0%)扩增出aac(3')-Ⅱ基因;有9株(15.0%)3种药敏方法的结果一致,均对阿米卡星敏感,未扩增出相关耐药基因;另有1株(1.7%)仪器法敏感、K-B法阿米卡星为非双圈耐药,未扩增出16SrRNA甲基化酶相关基因,仅扩增出aac(6')-Ⅰ基因。结论用Vitek 2 Compact检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星会出现假敏感现象,可能由16S rRNA甲基化酶基因armA表达介导。

棉籽饼的微生物脱毒法研究

棉籽和经过榨取油脂后剩下的棉籽饼粕,具有相当大的热值和特殊的生物学价值,是一项亟待开发利用的重要高蛋白食品和饲料资源。一般化学成分分析初步证实,棉籽含有油脂类、糖类、蛋白质等。带壳棉籽约含油14%～18%,含蛋白质18%～25%左右。棉籽仁含蛋白质40%～45%。棉籽经榨油后的饼粕含蛋白质30%～40%。此外,棉籽中各种维生素,尤其是维生素 E 和 B 族维生素含量也都很高。目前,世界棉籽年产量达2800万吨～3000万吨。

微生物法测定犬血浆中罗红霉素

目的 采用微生物法测定犬血浆中罗红霉素浓度。方法 以藤黄微球菌为检定菌 ,游标卡尺测量抑菌环直径 ,检测抑菌圈直径与血浆中罗红霉素浓度对数的线性关系。结果 在 0 1 6～ 1 0mg·L-1 浓度范围线性良好 ,最小检测浓度为 0 1 6mg·L-1 ,其日内及日间相对标准差分别小于 6 6 3%和 1 2 5 8% ,相对回收率大于 89 1 9%。结论 方法简便、快速、准确 。

接种用培养皿大小对微生物标本培养结果的影响

目的观察标本接种用培养皿大小对培养结果的影响。方法应用直径7cm、直径9cm的血培养皿、加万古霉素的巧克力和麦康凯培养皿对比接种痰、分泌物等标本,观察培养结果,计算培养阳性率。结果接种标本344例,直径7cm培养皿上培养出临床有意义细菌141株,培养阳性率为41.0%;直径9cm培养皿上培养出有意义细菌169株,培养阳性率为49.1%,直径9cm板比直径7cm板检出阳性率提高8.1%,差异显著(χ2=4.6,0.01<P<0.05)。结论直径9cm培养皿比直径7cm培养皿检出临床有意义细菌阳性率高,建议临床微生物室接种标本时采用直径9cm的培养皿。

微生物对烟叶蛋白质含量的影响

经菌株不同浓度、不同菌株、及同浓度不同菌株的等量组合处理过的烟叶放置一段时间未经发酵与发酵后对蛋白质检测,结果表明降解K326中部碎烟叶蛋白质的处理中Y菌株106浓度降解率最高,为18.81%;处理烟叶发酵后,降解率最高的处理是S5菌株107浓度,高达24.46%。K326上部碎烟叶处理后检测结果表明,对蛋白质降解率最高的处理是Y与S8混合,降解率为8.98%;K326上部碎烟叶处理发酵后检测结果表明,S8菌株108浓度处理降解率最高,达24.09%,其次为S5菌株108浓度处理降解率达23.48%。整叶处理结果表明S8降解蛋白质效果最好,降解率达5.17%;整叶处理烟叶发酵后检测S5对烟叶降解率最高,为5.17%。

30例肺部曲霉菌感染的微生物检验与临床诊治体会

目的：探讨本院30例肺曲霉菌感染患者的微生物诊断流程，分析与临床诊断一致性。方法对本院2010年1月至2015年3月入院治疗的30例痰培养或肺支气管灌洗液多次培养为曲霉菌，经临床结合影像学特点和其他临床指征，参照侵袭性肺部真菌（IFD）感染的诊断标准和治疗原则（草案）[1]和美国胸科协会（ATS）[2]的相关指南，确诊的或用抗真菌治疗有效的30例性肺曲霉菌感染患者进行回顾性分析，总结微生物诊断流程和与临床的诊断一致性。结果结论本组病例曲霉菌微生物结果与临床诊断结果一致。肺曲霉菌感染发展迅速，而且病死率相对较高，早期没有明确临床指征和诊断依据时，痰培养和痰涂片曲霉菌阳性结果可对诊断提示方向，准确及时的诊断能够促进临床治疗的成功率，提高患者的满意度，推进临床对肺曲霉病诊疗水平。

珠海口岸进出口食品微生物检验概况

为掌握珠海口岸进出口食品的微生物污染情况 ,对珠海口岸 2 0 0 0年至 2 0 0 1年期间进出口食品的微生物检验结果进行了分析。共检验进出口食品 75 13批 ,其中出口食品 36 2 1批 ,检出不合格食品 10 5批 (2 .9% )。不合格食品主要为奶粉、冻禽肉、鱿鱼片、加工蔬菜和生抽酱油等。不合格原因主要是大肠菌群超标 ,其次为细菌总数、沙门氏菌和李斯特氏菌超标。共检测进口食品 3892批 ,检出不合格食品 4 3批 (1.1% )。不合格食品主要为保健食品、冷冻水产品和薯片类食品。不合格原因主要为大肠菌群、细菌总数和沙门氏菌超标。总结结果在全国具有一定的代表性 ,为我国的进出口食品的微生物检验重点提供了依据。

16种中成药微生物限度检查法方法验证

目的:建立16种中成药的微生物限度检查方法。方法:采用5种阳性对照菌回收率试验测定其是否含抑菌成分。结果: 根据回收率试验结果,感冒清片、干柏鼻炎片、清开灵口服液、清热解毒口服液、感冒清热颗粒和板兰根颗粒6种供试品试验菌的回收率试验均高于70％,证明无抑菌现象;热炎宁颗粒、黄连上清丸、牛黄上清丸、三七伤药片和双黄连口服液有一定程度的抑菌作用。但可通过稀释法消除抑菌作用;霍香正气滴丸、三黄片、清喉利咽颗粒、复方丹参片和牛黄解毒片的抑菌作用强, 必须采用离心集菌加薄膜过滤法才能彻底消除其抑菌作用。结论:感冒清片、干柏鼻炎片、清开灵口服液、清热解毒口服液、感冒清热颗粒和板兰根颗粒按常规方法进行微生物限度检查;热炎宁颗粒、黄连上清丸、牛黄上清丸、三七伤药片和双黄连口服液按培养基稀释法进行微生物限度检查;藿香正气滴九、三黄片、清喉利咽颗粒、复方丹参片、牛黄解毒片按离心集菌加薄膜过滤法进行微生物限度检查。

我国利用植物病原微生物防除杂草研究的回顾与现状

本文扼要地简述了利用植物病原菌生物防除杂草技术在我国的研究和应用概况,回顾和总结了其30来年的发展历程和所取得的成就及存在的问题,并对今后的发展,提出了建议。

利用M-RAPD技术绘制不同病原微生物基因指纹图

目的 探讨一种多重随机引物 PCR方法 (M- RAPD)对不同种株病原微生物进行鉴定的可能性。方法 将 1 0个碱基的随机引物进行随机组合 ,利用三条组合的随机引物在较高的退火温度下对不同种株病原微生物染色体 DNA进行扩增 ,通过 1 5 g/L 琼脂糖凝胶电泳获得不同种株病原微生物的扩增图谱 ,并用软件 Gelworks1 d Intermediate进行分析。结果 初步实验表明 ,M- RAPD技术可以得到稳定的种株特异的 DNA指纹图谱 ,其条带清晰、数目较多、片段大小分布均匀。三引物的扩增产物包含了其中任意两引物的绝大多数扩增产物 ,大、小片段均可出现增减 ,但小片段更易增加 ;对同一种病原微生物三引物所提供的基因信息要远多于两引物所提供的信息 ,增加的信息量约为原来的 5 0 % ;不同耐药菌株间及其与相应标准株间差异亦很明显 ,但同种不同株间相同的扩增产物要多于不同的扩增产物。软件 Gelworks1 d Interm ediate的分析数据亦支持我们的实验结果。结论 M- RAPD技术对不同种株病原微生物染色体 DNA扩增时 ,能获取较丰富的遗传信息 ,可迅速、简便地鉴定不同种株的病原微生物。

1例继发性肺部曲霉菌感染的微生物学诊断

目前全世界肝病的发病率居高不下；重症肝病尤其是慢性重型肝炎和晚期肝硬化患者由于继发免疫受损，真菌容易侵入体内而引起局部或全身感染；深部真菌感染如肺部真菌感染预后极差，死亡率高[1]。真菌感染是患者病情加重和感染难以控制的主要原因[2]。本文对我院的一例重症肝病患者继发肺部曲霉菌感染的微生物诊断过程进行回顾性分析，报道如下。

中药饮片鱼腥草中微生物污染情况研究

考察广东省中药饮片鱼腥草中微生物污染情况,为中药饮片微生物污染限度标准制定提供参考。方法参考《中国药典》2015年版第3公示稿微生物相关检查方法,对10份鱼腥草样品进行微生物计数、耐热菌计数和致病菌的检查,掌握其生物负载水平。结果对10份鱼腥草样品检测发现微生物污染较为严重,样品需氧菌总数计数结果介于10~4~10~7 CFU/g,霉菌和酵母菌总数计数结果介于10~2~10~5 CFU/g,耐胆盐革兰阴性菌污染比较严重且出现较为异常的实验现象,两批次来源于同一厂家的样品检出控制菌大肠埃希菌,未检出沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌。此外10批样品中还分离到3株典型污染微生物,分别为1株产气肠杆菌和2株阴沟肠杆菌。结论中药饮片微生物污染较为严重,需要积累更多的数据以完善其检验方法和评价标准,以提升中药饮片及中药制剂的质量。

如何提高临床微生物检验的质量

要提高临床微生物检验质量,为临床提供及时、准确和可靠的结果,就必须进行全面的质量管理即质量保证[1].质量保证也就是为了使检验结果更好地反映患者的实际情况,必须对检验的全过程进行质量控制,包括从临床医师开出检验单,到病人准备、标本采集、标本运送、标本处理、标本分析及结果处理,直至最后发出报告的整个过程[2].下面就从分析前质量保证、分析中质量控制、分析后质量保证进行阐述.

双重荧光定量PCR技术在药品微生物检验中的应用

目的建立快速检测金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的双重荧光定量PCR方法并在药品微生物检测中应用。方法通过设计特异性引物和探针,扩增金黄色葡萄球菌的femB基因和铜绿假单胞菌的DNA gyrase subunit B基因,建立荧光定量PCR方法。将该方法应用于30批次药品微生物检测。结果建立同时检测金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的双重荧光定量PCR方法,从DNA提取到检测完毕仅需2 h。检测灵敏度为50 copies/μL,特异性为100%。30批次样品检验结果表明该方法与传统细菌培养方法结果一致。结论该法缩短了检测时间,具有良好的灵敏性和特异性,在药品微生物检验中有很好的应用前景。

重症患者组织标本病原微生物分析

目的通过针对重症感染患者组织标本病原微生物分析,了解临床致病微生物分布。方法收集2019年1至6月95例重症感染病人组织标本行细菌学和药敏检测、分析。结果来自95例样本的有效组织标本共2803份,555份有阳性结果,阳性率为19.9%。各类型的组织标本培养阳性的细菌共11种,分别为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、洋葱伯克霍尔德氏菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、奇异变形杆菌、表皮葡萄球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、屎肠球菌和大肠杆菌。在本研究的时间段内送检标本阳性最多的依次为痰液、尿液和全血;常见的5个菌种依次为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌和洋葱伯克霍尔德氏菌。痰组织标本中阳性微生物例数最多,为373份,穿刺液标本获取的阳性例数最少,为1例。总体而言,铜绿假单胞菌仍是本次收集组织样本分析获取的最多菌属(共182份),大肠杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌最少(分别为7份和11份)。结论个别致病菌的常驻和耐药是重症医学的临床难题,需要严格个体化管控。