社会隔离对BALB／c小鼠认知功能和海马5-HT2CR、ADAR1表达的影响

目的探讨社会隔离对BALB／c小鼠认知功能及5羟色胺2c受体（5-HT2Creceptor，5-HT2CR）和RNA腺苷脱氨酶1（adenosinedeaminasethatactOnRNA1，ADARl）表达的影响。方法选取健康BALB／c小鼠，按照随机原则（随机数字表法）分组，分别自生后21d起单笼饲养2周、4周和8周，建立社会隔离模型。对应的相同年龄正常群居饲养BALB／c小鼠作为相应对照组。采用新物体定位和新物体识别实验评估小鼠空间和非空间认知功能的改变，采用免疫蛋白印迹实验检测小鼠脑海马区5-HT2CR和ADARl表达的改变。结果新物体定位和新物体识别实验结果显示，与相应对照组相比，隔离2周组BALB／c小鼠的空间辨别指数明显降低[对照组为（0．075＋0．340），隔离组为（一0．653＋0．308），P〈O．05]，隔离2周和4周组BALB／c小鼠空间辨别指数无明显差异；隔离2周和4周组BALB／c小鼠非空间辨别指数明显降低[对照2周组为（0．088＋-0．210），隔离2周组为（-0．945＋-0．194），P〈0．05；对照4周组为（0．105＋0．267），隔离4周组为（-0．506＋-0．215），P〈0．05]，隔离8周组没有明显的改变；Westernblot结果显示，在海马区，与相应对照组相比，隔离2周BALB／c小鼠的5-HT2CR和ADARl蛋白表达明显减少[5-HT2CR：对照组为（1．025＋-0．144），隔离组为（0．891＋-0．026），P〈0．05][ADARl：对照组为（0．839--0．120），隔离组为（O．629＋-0．094），P〈0．05]。结论2周社会隔离可导致BALB／c小鼠的空间和非空间认知功能降低，同时引起BALB／c小鼠海马区5-HT2CR和ADARl蛋白表达的降低。

RNA腺苷脱氨酶对社会隔离小鼠攻击行为的缓解作用及5-羟色胺-2C受体机制

目的探讨RNA腺苷脱氨酶1(adenosine deaminase acting on RNA 1,ADAR1)作用于5-羟色胺-2C受体对社会隔离小鼠攻击行为的缓解作用。方法60只21日龄的健康雄性BALB/c小鼠按照随机数字表法分为6组:社会隔离组、群居对照组、ADAR1诱导剂隔离组、ADAR1抑制剂隔离组、ADAR1诱导剂群居组和ADAR1抑制剂群居组,采用单笼饲养4周方法建立社会隔离模型,采用群居饲养方法作为对照组。ADAR1诱导剂隔离组和ADAR1抑制剂隔离组分别给予ADAR1诱导剂(5.0×10^4U/kg)和抑制剂(10 mg/kg)进行腹腔注射。采用入侵者实验评价小鼠的攻击性行为,免疫组化和蛋白免疫印迹实验检测小鼠脑内ADAR1和5-羟色胺-2C受体的表达变化。结果社会隔离组小鼠的攻击潜伏期明显低于群居对照组[(43.15±6.99)s,(542.40±30.50)s;t=15.906,P<0.01],ADAR1诱导剂隔离组小鼠的攻击潜伏期[(256.70±29.49)s]明显高于社会隔离组(t=7.046,P<0.01),ADAR1抑制剂隔离组小鼠的攻击潜伏期[(15.25±2.18)s]明显低于社会隔离组(t=3.809,P<0.01)。社会隔离组小鼠杏仁核各区ADAR1免疫反应阳性表达细胞的光密度值显著低于群居对照组相应脑区[BLA区:(0.038±0.002),(0.074±0.004);LaDL区:(0.033±0.002),(0.060±0.002);LaVM区:(0.045±0.003),(0.073±0.004);LaVL区:(0.044±0.003),(0.070±0.003);t=8.428,9.037,6.462,5.698,均P<0.01];ADAR1诱导剂隔离组小鼠的杏仁核区ADAR1免疫反应阳性表达细胞的光密度值[BLA区:(0.060±0.003),LaDL区:(0.042±0.002),LaVM区:(0.056±0.004),LaVL区:(0.054±0.003)]明显高于社会隔离小鼠对应脑区,分别为(t=6.055,2.876,2.312,2.492;均P<0.05]。社会隔离组小鼠杏仁核区ADAR1蛋白和5-羟色胺-2C受体蛋白的表达均明显低于群居对照组(t=11.37,12.65;均P<0.01)。ADAR1诱导剂隔离小鼠杏仁核区ADAR1蛋白和5-羟色胺-2C受体蛋白表达均明显高于社会隔离组(t=3.02,4.401;均P<0.05)。结论ADAR1诱导剂可通过增强社会隔离BALB/c小鼠杏仁核5-羟色胺-2C受体的蛋白表达缓解社会隔离BALB/c小鼠的攻击性行为。

ADAR1诱导剂和抑制剂对社会隔离小鼠认知功能及ADAR1蛋白表达的影响

目的 探讨ADAR1诱导剂和抑制剂对社会隔离BALB/c小鼠认知功能和ADAR1表达的影响.方法 选取60只健康BALB/c小鼠按照区组随机化分为6组：群居对照组（GH）、社会隔离模型组（SI）、ADAR1诱导剂干预群居组（GH＋ IFN-γ）、ADAR1抑制剂干预群居组（GH＋EHNA）、ADAR1诱导剂干预隔离组（SI＋IFN-γ）和ADAR1抑制剂干预隔离组（SI＋EHNA）,每组10只小鼠.干预方式为腹腔注射,ADAR1诱导剂或抑制剂的给药剂量分别为5.0× 104 U/kg或10 mg/kg.采用物体识别实验检测小鼠认知功能改变.免疫组化和Western blot检测小鼠脑内ADARI的免疫反应活性和蛋白表达的改变.结果 在物体识别实验中,与GH组（0.41±0.17）相比,SI组（-0.16 ±0.09）小鼠的非空间辨别指数明显降低（P＜0.01）;SI＋IFN-y组（0.20±0.09）和SI＋EHNA组（-0.29 ±0.12）小鼠的非空间辨别指数分别高于（P＜0.01）和低于SI组（P＜0.05）.免疫组化实验结果显示,与GH组相比,SI组小鼠海马Hilus区[（0.021±0.002）,（0.013 ±0.003）,P＜0.01]和CA1区[（0.047 ±0.004）,（0.021±0.005）,P＜0.01]的ADARI免疫反应活性明显减弱;与SI组相比,SI＋ IFN-γ组小鼠海马Hilus区[（0.013 ±0.003）,（0.023±0.004）,P＜0.01]和CA1区[（0.021±0.005）,（0.040 ±0.005）,P＜0.01]的ADAR1免疫反应活性明显升高,ADAR1诱导剂干预隔离组逆转社会隔离引起的降低的ADAR1免疫反应活性.Western blot结果显示与GH组（1.00±0.00）相比,SI组小鼠海马区ADAR1的蛋白表达（0.48±0.07）明显降低（P＜0.01）;SI＋IFN-γ组小鼠海马区ADAR1的蛋白表达（0.82±0.04）与SI组相比,明显增加（P＜0.01）.结论 4周社会隔离应激刺激可导致BALB/c小鼠的非空间认知能力降低,海马区ADARI表达降低,ADARI诱导剂和抑制剂可分别逆转和加重社会隔离引起的认知功能障碍,相关机制与ADAR1表达有关.