小鼠离体工作心脏模型及功能评价

目的 :为心力衰竭的基因研究提供理想的实验模型。方法 :建立小鼠离体工作心脏模型 ,并评价心功能状态。结果 :后负荷固定 (5 0mmHg) ,前负荷 5mmHg至 2 5mmHg范围内 ,左室收缩压 (LVPsys)、最大左室压力上升 /下降速率 (dLVPdtmax/dLVPdtmin)、冠状动脉流量 (CFlow)在前负荷 10mmHg时达最大值 ;平均主动脉压力 (AP mean)、平均主动脉流量 (AFmean)在前负荷 2 0mmHg达最大值 ;左室舒张末压 (LVEDP)与前负荷正相关 ,r=0 986 1。前负荷固定 (10mmHg) ,后负荷 4 0mmHg至 10 0mmHg范围内 ,LVEDP、CFlow与后负荷无关 ;LVPsys、dLVPdtmax、dLVPdtmin分别于后负荷 90、6 0、70mmHg时达最大值 ;APmean随后负荷的递增而增加 ;AFmean随后负荷的递增而减少。结论 :小鼠离体工作心脏在不同前后负荷下功能的改变完全符合Frank -Starling定律 。

鞬抗原蛋白基因在皮肤良、恶性角质细胞株中的表达及其意义

用抗原蛋白（Ｔｅｎａｓｃｉｎ）基因探针及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术检测皮肤良、恶性角质细胞株（ＨａＣａｔ、ｓＣＬⅠ、ＳＣＬⅡ）中抗原蛋白ｍＲＮＡ表达水平。结果表明抗原蛋白基因在正常角质细胞及良性角质细胞株中不表达，而恶性角质细胞株中高度表达（７．８ｋｂ和６．２ｋｂ）。它们在恶性角质细胞中的特异表达，认为有助于判断角质细胞的良、恶性肿瘤，并可成为有关肿瘤的标记物之一。

18三体腭裂小鼠颅上颌复合体发育的比较组织形态学研究

目的 :研究 18三体腭裂小鼠实验动物模型的颅上颌复合体组织学发育异常。方法 :30对胎鼠 (每对包括 1只正常胎鼠和 1只与其体重相近的三体腭裂的胎鼠 )的颅上颌复合体分别作序列连续切片 (厚度 7μm) ,再从每组序列切片中选择 6张有特殊结构的特征切片 ,并借助显微形态学的研究手段对各特征切片中的特殊结构进行比较组织形态学观察研究。结果 :该模型虽无原发腭裂却伴有原发腭的发育不足 ;腭裂组上腭骨性结构及鼻中隔内硬组织 (包括鼻中隔软骨、鼻中隔旁软骨及犁骨等 )呈现明显的发育障碍 ;腭裂样本伴有明显的腭咽闭合不全 (VIP)鼻囊发育扁平。结论 :18三体腭裂小鼠颅上颌复合体的发育伴有严重的硬组织发育障碍和不足 ,可能与其常染色体三体密切相关。

腭裂与非腭裂小鼠鼻发育的比较形态测量学研究

目的 :观察腭裂与鼻发育的关系。方法 :借助计算机图象处理系统 ,测定了 30对处于相同或相近发育阶段的腭裂与非腭裂NMRI小鼠的颅上颌复合体冠状序列连续切片 (厚度 7μm)中鼻囊、鼻中膈及鼻中膈软骨的宽度、高度及横截面积。进一步对腭裂及非腭裂组进行量化的比较。结果 :18三体伴腭裂小鼠连续序列切片中腭裂小鼠鼻囊、鼻中膈及鼻中膈软骨的高度和横截面积及鼻中膈软骨的宽度均小于非腭裂小鼠 ,而鼻囊与鼻中膈的宽度则明显大于非腭裂小鼠。结论 :整个外鼻和鼻中膈的发育是与鼠胚的

GB病毒研究进展

继发现甲、乙、丙、丁、戊五种肝炎病毒后,尚存在其他经肠道外传播并可引起人类肝炎的致病因子,GB病毒就是其中之一。近年对GB病毒的研究有了较大进展,本文就其生物学特性、感染的检测手段以及动物实验等方面的进展作一简述。

肝细胞癌与丙型肝炎病毒感染关系的研究进展

肝细胞癌是常见的恶性肿瘤之一,近年发现丙型肝炎病毒(HCV)感染是发生肝细胞癌的重要危险因素之一。目前已开始对两者之间的关系进行分子生物学、流行病学和临床等方面的研究,并取得一些进展。本文就长期HCV感染后与肝细胞癌相关的分子生物学基础以及HCV感染者发生肝细胞癌的主要危险因素等问题的研究进展作一简要综述。

大肠粘膜增殖细胞核抗原的免疫组织化学研究

研究了增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学检测方法.发现PCNA可用于常规石腊包埋组织和冰冻组织,测量细胞的增殖活性.PCNA的检测受固定剂的影响.在石腊包埋组织4％付甲醛为最好,冰冻组织以甲醇为最佳.PCNA的阳性率与Ki67阳性率呈正相关.所以PCNA成为第一个能应用于常规病理组织,反映细胞增殖活性的指标.

腭裂小鼠鼻中隔前部附属器官发育的比较形态测量学研究

目的 :探讨腭裂与胚鼠的犁骨、Jacobson器官和鼻中隔旁软骨发育的关系。方法 :借助计算机图像处理系统 ,测定 30对处于相同或相近发育阶段的 18三体伴腭裂胚鼠和正常胚鼠颅上颌复合体冠状序列连续切片中犁骨最大横截面积和Jacobson器官、鼻中隔旁软骨在原发腭与继发腭交界平面的横截面积 ,并估算犁骨在矢状平面的长度。进一步对腭裂及非腭裂组进行量化比较。结果 :18三体伴腭裂小鼠的鼻中隔旁软骨及犁骨在冠状面和矢状面的发育均伴有严重的发育不足 ,而Jacobson器官在腭裂及非腭裂组无显著性差异。结论 :18三体伴腭裂小鼠鼻中隔前部附属器官硬组织发育不足不仅与腭裂密切相关 。

GBV-C和HCV共同感染的研究

目的：了解ＧＢＶＣ和ＨＣＶ的共同感染率，及不同引物和自制ＤＩＧ标记探针检测ＧＢＶＣ的效果。方法：定量ＲＴＰＣＲ检测肝炎患者血清标本中的ＨＣＶ，ＲＴｎｅｓｔｅｄＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ阳性标本中的ＧＢＶＣ，分析部分标本扩增产物的核苷酸和氨基酸序列，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定ＧＢＶＣ扩增产物的特异性。结果：２１１例丙型肝炎病人血清标本中，ＧＢＶＣ５’ＮＣＲ和ＧＢＶＣＮＳ３区检出率分别为３１．８％和２２．８％，总阳性率为３５．１％。部分标本扩增产物的核苷酸序列分析证实，ＲＴｎｅｓｔｅｄＰＣＲ获得的检测结果可靠，但序列中存在较高频率的随机突变。自制的ＧＢＶＣ５’ＮＣＲ和ＮＳ３ＤＩＧ标记探针有较高的特异性，可用于检测相应的扩增产物。结论：ＧＢＶＣ５’ＮＣＲ引物的检测效果优于ＧＢＶＣＮＳ３，ＧＢＶＣ与ＨＣＶ有较高的共同感染率。

c-myc癌基因在大肠组织中表达的免疫组织化学和原位杂交研究

本文应用 c-myc 癌基因蛋白免疫组织化学和 mRNA 原位杂交方法研究了 c-myc 癌基因在大肠组织中的表达,并以胎盘作为阳性对照。发现在胎盘合体滋养叶细胞和结肠粘膜表面上皮都有 c-myc 癌基因的表达。结肠肿瘤 c-myc 表达增加,腺癌表达高于腺瘤。腺瘤中以绒毛状腺瘤表达最高。研究表明 c-myc 癌基因表达并不绝对与细胞增殖状态相关。

18三体及正常NMRI小鼠腭皱发育的形态学研究

目的 通过对 18三体伴及不伴腭裂NMRI胚鼠和正常胚鼠的腭皱形态的比较形态学观察研究 ,认识其腭皱发育的不同特点。方法 6 0只Han -NMRI母鼠及 11只具有Rb(2 .18) 6Rma/Rb(1.18)Rma染色体结构的雄鼠被用于该研究 ,从 5 6 9只子代活胚中选择 82只整倍体鼠胚、17只 18三体不伴腭裂鼠胚和 32只 18三体伴腭裂鼠胚 ,对其腭皱形态进行形态学观察和分类。结果 非腭裂小鼠腭皱有四种不同的表现型 ,整倍体小鼠腭皱表型以Ⅰ类为主 ,18三体小鼠腭皱则以Ⅳ类多见。 18三体伴腭裂小鼠腭皱有两种不同类型 ,其中以Ⅰ类多见。结论 18三体小鼠的过量基因不仅可导致其子代腭裂发生率的增高 ,也使其腭皱发育呈现明显的不连续及个别缺失畸形 ;

肠粘膜组织APAAP法产生的非特异性染色及其消除

本文研究了肠粘膜活检组织免疫组织化学APAAP法所产生的非特异性染色及其消除办法.发现肠粘膜表面的粘液层能非特异地与抗体结合.内源性碱性磷酸酶主要存在于粘膜上皮肠腔面、固有膜、血管内皮细胞和间质细胞.石蜡包埋过程不同程度地破坏这种酶,但固有膜血管内皮的酶不能完全被破坏.这些内源性酶在染色基质液中加入左旋咪唑或20%醋酸作预处理可完全抑制之.末端回肠的内源性酶与大肠不同,除了大量存在于固有膜外,也存在于绒毛上皮,且这些酶不能被左旋咪唑抑制,必须用20%醋酸处理.

抗-GOR和丙型肝炎病毒感染

最近研究发现,实验性感染HCV的黑猩猩血浆中所分离的cDNA克隆(GOR47-1),具有相应的氨基酸序列抗原决定簇,并证实许多HCV感染者的血清中存在这种抗原决定簇的抗体(抗-GOR)。进一步研究发现,HCV核心蛋白与GOR抗原决定簇氨基酸序列具有部分同源性,GOR反应性起源于HCV Core 9～17区,而且发现抗-GOR与自身免疫性肝炎-2型有关,认为它本身就是一种自身抗体。因此,是否存在由HCV引起的自身免疫性肝炎问题日益受到研究者关注。本文就这些问题的最新研究进展作一综述。

RNA-RNA原位杂交实验条件探讨

将Vigilin和qroal(Ⅰ)cDNA亚克隆到pGEM3Z和pGEM4Z载体,体外转录合成35s标记的cRNA探针。经RNA凝胶电泳,Southern Northern,杂交检查探针长度,杂交特性和特异性,通过系列实验探讨了RNA-RNA原位杂交实验中固定、杂交前处理、杂交温度,探针量、探针长度,洗脱严格性和RNA酶处理等对杂交结果的影响,建立了简化的RNA-RNA原位杂交方法。

白蛋白对大鼠肝脏缺血、缺氧损伤的保护作用

缺血、缺氧可引起大鼠离休灌流肝脏的损伤,这种损伤涉及反应性氧族对肝脏的氧化破坏.白蛋白具有很强的抗氧化作用.在本研究中,0.1％、1％、2％和5％的牛血清白蛋白可保护大鼠离体灌流肝脏由缺血、缺氧引起的损伤,而且不合流基和脂肪酸的牛血清白蛋白制剂及人白蛋白也有同样的保护作用.该保护作用不是通过白蛋白结构上的巯基,也不是通过白蛋白结合的脂肪酸来实现的.很可能是通过白蛋白与催化产生羟自由基或类羟自由基的跃迁金属离子及与反应性氧族的非特异性结合而实现的。

BCG激活淋巴细胞对膀胱肿瘤细胞的抗肿瘤作用研究

利用ＢＣＧ激活的外周血单核细胞（ＰＢＭＮＣ）作为肿瘤杀伤细胞———ＢＡＫ细胞，观察其对移行上皮肿瘤细胞系ＢＴＡ和１１例原代培养细胞的细胞毒作用。结果表明，单独ＢＣＧ对培养肿瘤细胞没有细胞毒作用；ＮＫ细胞仅表现较低的细胞毒作用，在效靶比４０∶１对ＢＴＡ的特异性杀伤率为１７．６３％，对原代细胞为１２．４９％；ＢＡＫ细胞分别为３１．２６％和１９．１６％（Ｐ＜０．０５）；ＬＡＫ细胞分别为３５．５３％和２４．２１％；对ＢＴＡ细胞的细胞毒作用ＬＡＫ细胞＞ＢＡＫ细胞（Ｐ＜０．０５），对原代细胞的细胞毒作用ＬＡＫ细胞和ＢＡＫ细胞之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。认为ＢＡＫ细胞是不同于ＬＡＫ细胞的一类肿瘤杀伤细胞，在ＢＣＧ抗肿瘤的过程中起着重要作用。

胰腺癌的Ki-67抗原表达

应用Raine Ki-67等效抗体(MIB-1)测定40例胰腺癌和10例慢性胰腺炎中Ki-67核抗原的表达,结果发现:这种新型Ki-67等效抗体在石蜡切片中显示了较好的敏感性和特异性;胰腺癌癌巢细胞中Ki-67抗原的表达明显高于非癌巢细胞和慢性胰腺炎,而且Ki-67指数与胰腺癌组织学分级高度相关,提示Ki-67核抗原的测定有助于肿瘤临床病理分级诊断。

139例HIV感染者P_(24)抗原,HIV DNA,HIV RNA相关研究

目的探讨ＨＩＶＤＮＡ，ＨＩＶＲＮＡ，Ｐ２４Ａｇ与宿主的相互关系及三者间的内在联系。方法收集１３９例抗ＨＩＶ阳性血标本，用固相免疫酶法测Ｐ２４Ａｇ，定量逆转录聚合酶链生物酶法测定ＨＩＶＲＮＡ和巢式聚合酶链法测ＨＩＶＤＮＡ。结果ＨＩＶＲＮＡ阳性数１０８／１３９，ＨＩＶＤＮＡ阳性数１０９／１３９，Ｐ２４Ａｇ阳性数为３４／１３９。进一步分析，同一标本ＨＩＶＤＮＡ，ＨＩＶＲＮＡ均阳性的占８０％，单一阳性为２０％。结论三种ＨＩＶ检测方法的敏感性、一致性与ＨＩＶ毒株变异、个体宿主免疫应答及抗病毒治疗密切相关。多引物多区域同时测ＨＩＶＤＮＡ，ＨＩＶＲＮＡ和抗原，并结合临床进行综合分析。

血清HIV抗体阴性静脉药瘾者肝组织HIVDNA测定

目的了解血清抗－ＨＩＶ阴性的静脉药瘾者肝组织是否存在前病毒ＨＩＶＤＮＡ。方法选择３８例抗－ＨＩＶ阴性的静脉药瘾者肝组织，１０例非静脉药瘾者肝组织，用巢式聚合酶链反应，分别在ＨＩＶｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖ三大结构区，用六对引物进行ＨＩＶＤＮＡ扩增。结果３８例中有３例同时在三个区域测到ＨＩＶＤＮＡ，１２例分别在二个区域、１７例在单一区域检测到ＨＩＶＤＮＡ，６例在ＨＩＶ三个区域均阴性。对照组１０例无一例检到ＨＩＶＤＮＡ。结论抗－ＨＩＶ阴性的静脉药瘾高危人群，存在潜在ＨＩＶ感染。提示潜在ＨＩＶ感染的检测及加强“窗口期”

原位杂交结合免疫组化研究Ki-67基因的表达和调控

为研究Ｋｉ－６７基因的表达和调控，我们应用原位杂交和免疫组化研究Ｋｉ－６７抗原的ｍＲＮＡ转录和蛋白表达的相关性。采用常规福尔马林固定和石蜡包埋的人类扁桃体，地高辛标记的ｃＲＮＡ探针进行ｍＲＮＡ原位杂交，杂交信号显示方法为直接免疫磷酸复和物法（ｄｉｒｅｃｔｉｍｍｕｎｏａｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＩＡＰ）。结果发现：地高辛标记的Ｋｉ－６７ｃＲＮＡ探针首次成功地检测到常规处理的扁桃体石蜡切片中的Ｋｉ－６７ｍＲＮＡ，Ｋｉ－６７ｍＮＡ的转录和其蛋白表达存在着相关性。结果说明：本实验中建立的方法有助于深入地分析Ｋｉ－６７基因表达和调控。