尼古丁对SZ95人皮脂腺细胞增殖、凋亡及脂质合成的影响

目的观察尼古丁对永生化SZ95人皮脂腺细胞增殖、凋亡及脂质合成的影响,探讨吸烟与皮脂腺活性及痤疮发生的关系。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法结合显微镜观察不同浓度尼古丁作用24,48及72h后对SZ95细胞毒性及增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测尼古丁作用48h后对细胞凋亡的影响;尼罗河红荧光染色及油红光学染色法定量并定性观察尼古丁作用48h后SZ95细胞内中性脂质含量的变化。结果 MTT法及光学显微镜观察显示,尼古丁在1.0×10-2mol/L时对SZ95细胞有毒性效应,1.0×10-3mol/L及以下浓度对细胞增殖无明显影响。FCM示尼古丁作用48h后细胞凋亡比例较对照组呈剂量依赖性增加,以晚期凋亡增加为主,早期凋亡变化不明显。尼罗河红荧光染色结合油红光学染色法示:尼古丁在1.0×10-3mol/L及1.0×10-4mol/L时呈剂量依赖性,显著促进SZ95细胞内中性脂质合成(P<0.05)。结论尼古丁体外对SZ95细胞呈剂量依赖性诱导细胞凋亡,促进细胞脂质合成,提示香烟可能通过促进皮脂腺脂质分泌参与了皮脂腺相关疾病,如痤疮的发生。

白细胞介素6体外对SZ95人皮脂腺细胞脂质合成的影响

目的研究白细胞介素(IL)-6体外对SZ95人皮脂腺细胞脂质合成的影响。方法CCK8法及尼罗河红染色法检测IL-6对细胞增殖和细胞脂质合成的影响,实时荧光聚合酶链反应(PCR)及蛋白印迹法检测IL-6对脂质合成相关基因(PPARG、SREBP1和FAS)表达的影响。结果10 ng/ml IL-6作用24 h和48 h后细胞活力百分率分别为120%和126%,10 ng/ml及1 ng/ml IL-6作用48 h后细胞中性脂质百分率分别为125%和116%,均显著高于对照组(P<0.05);伴随PPARG、SREBP1和FAS mRNA及蛋白表达上调。结论IL-6体外促进SZ95人皮脂腺细胞脂质合成,显示IL-6可能通过促进皮脂腺细胞脂质合成而参与寻常痤疮等相关疾病的发生。

香烟烟雾提取物对SZ95人皮脂腺细胞增殖、凋亡及脂质合成的影响

[背景]吸烟与痤疮及反向痤疮关系密切,香烟是否通过影响皮脂腺细胞生物学功能参与相关疾病的发生,目前仍不清楚。[目的]研究香烟烟雾提取物(CSE)体外对SZ95人皮脂腺细胞增殖、凋亡、脂质合成的影响及机制。[方法]体外培养永生化SZ95人皮脂腺细胞,设置不同浓度CSE刺激组及相应的PBS对照组进行研究。采用MTT法检测体积百分比(余同)为5%、2.5%、1%、0.5%、0.25%、0.1%的CSE染毒24、48、72 h后细胞活力的变化;FITC Annexin/PI双染法检测5%、2.5%、1%CSE染毒24、48、72 h后细胞凋亡的变化;尼罗河红及油红染色法检测1%CSE对细胞脂质合成的影响;实时荧光定量PCR法及蛋白印迹法检测1%CSE作用前后细胞内芳香烃受体(AhR)及其下游经典靶位基因细胞色素P4501A1(CYP1A1)的基因及蛋白表达情况。[结果]MTT实验结果显示,与对照组相比,2.5%和5%CSE诱导细胞不同时间(24、48、72 h)的细胞活力下降(P<0.01):2.5%CSE组细胞活力分别为81%、60%、66%,5%CSE组细胞活力分别为54%、16%、12%。2.5%和5%CSE剂量依赖性诱导细胞晚期凋亡:24、48、72 h后2.5%CES组细胞晚期凋亡比例(Annexin+/PI+)分别为3.74%、6.71%、56.6%,5%CSE组分别为22.9%、27.1%、64.5%。1%CSE作用48 h后细胞脂质合成减少(P<0.01),CSE组的脂质合成量是对照组的85%。1%CSE作用2 h时细胞内AhR及CYP1A1 mRNA的相对表达水平分别是对照组的1.68倍和4.53倍(P<0.01),48 h时蛋白的相对表达水平是对照组的2.10倍和3.48倍(P<0.01)。[结论]CSE呈剂量依赖性抑制体外细胞增殖,诱导细胞晚期凋亡,一定浓度时抑制细胞脂质合成,上调AhR及CYP1A1蛋白及mRNA的表达。本研究结果提示香烟烟雾可能通过干扰人皮脂腺细胞的正常生物学功能而参与皮脂腺相关疾病的发生。

芳香烃受体在人表皮、毛囊和皮脂腺上的表达及其意义

目的 观察芳香烃受体（AhR）在人表皮、毛囊及皮脂腺细胞上的表达及在二噁英作用下的激活情况。方法 采用免疫荧光和免疫组化法观察AhR蛋白在人面部表皮、毛囊、皮脂腺及体外培养的HaCaT细胞和SZ95人皮脂腺细胞上的表达情况；Western印记法观察2,3,7,8-四氯二苯-p-二噁英（TCDD）作用HaCaT细胞和SZ95细胞3 d后AhR蛋白表达的变化情况。结果 AhR蛋白在人面部皮肤表皮、毛囊、皮脂腺细胞上表达，并且AhR蛋白在表皮棘层和颗粒层的表达强于基底细胞层，在皮脂腺小叶的外周和中央表达强于皮脂腺小叶中间，在毛囊外毛根鞘和近毛小皮细胞上的表达强于内毛根鞘细胞。AhR蛋白在HaCaT细胞和SZ95细胞的细胞核和胞质中高表达。在TCDD作用下，HaCaT细胞和SZ95细胞内AhR蛋白表达明显下降，显示AhR在TCDD作用下被激活。结论 AhR在人表皮、毛囊、皮脂腺、HaCaT细胞及SZ95细胞上高表达，并在TCDD作用下激活，显示二噁英有可能通过AhR信号途径引起了人表皮、毛囊和皮脂腺的异常分化。