丙型肝炎病毒感染人单核细胞系U_(937)的研究

利用HCV RNA阳性血清感染人类单核细胞(U_(?)37),并利用RT-PCR测定感染后的产物,于感染后的第2天、第4天和第7天发现HCV RNA的正、负链。结果表明,采用本方法可以建立HCV RNA体外感染人类单核细胞的模型,并有病毒复制现象。

丙型肝炎干扰素治疗前后外周血单个核细胞中HCV RNA检测研究

丙肝病毒(HCV)是引起非甲非乙型肝炎常见的病原体,HCV感染的病原学诊断,检测血清中特异性抗体采用ELISA或RIB-A和用PCR法检测血清中HCV RNA已有大量报道,但是应用非同位素原位杂交技术检测患者外周血单个核细胞中HCV RNA报告甚少.本文采用地高辛标记的HCV531bp正链和负链(中间复制体),RNA探针,应用原位杂交的方法检测20例慢性丙肝患者用干扰素治疗前和治疗以后的外周血单个核细胞中HCV RNA.旨在探讨干扰素对丙型肝炎的疗效以及丙肝病毒复制情况,现报告如下.

丙型肝炎病毒在人T淋巴细胞中的体外感染

用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ阳性的血清感染人类Ｔ淋巴细胞（Ｍｏｌｔ－４），１２小时后继续孵化１～２８天，将感染后的产物用聚合酶链反应（ＰＣＲ）测定，于第１、２、３天和第８天发现ＨＣＶ－ＲＮＡ的正链，第２和第８天发现ＨＣＶ－ＲＮＡ的负链。

二甲双胍对磷酸烯醇丙酮酸羧激酶基因表达调节的研究

目的 通过观察抗高血糖药物二甲双胍对肝糖异生中的关键限速酶磷酸烯醇丙酮酸羧激酶 (PEPCK)基因表达的调节以及胰岛素信号转导抑制剂的影响 ,探讨二甲双胍在肝细胞中作用的分子机制。方法 培养的小鼠肝癌细胞系 (H4IIE)用 0 1mmol/L二甲双胍温育 16h ,并加用不同的调节因子 ,如胰岛素、环磷酸腺苷 (cAMP)、地塞米松、胰岛素信号转导抑制剂等。PEPCK的mRNA水平通过Northernblot分析。结果 治疗浓度 0 .1mmol/L二甲双胍显著降低了基础PEPCK的mRNA水平约 75 % (P <0 .0 1) ,对cAMP和地塞米松刺激的PEPCKmRNA表达 ,二甲双胍单独作用无显著性效果 ,但通过与胰岛素的联合作用可抑制cAMP和地塞米松刺激的PEPCK的基因表达。当培养液中加入 0 .1nmol/L低浓度胰岛素与二甲双胍共同温育时 ,cAMP和地塞米松引起的PEPCKmRNA表达显著降低了 94 % (P <0 .0 1)。胰岛素信号转导抑制剂如磷脂酰肌醇 3激酶 (PI3K)抑制剂渥蔓青霉素(wortmannin)和有丝分裂原激活蛋白激酶 (MAPK)抑制剂UO12 6对二甲双胍的作用无显著影响 ,但wortmannin显著阻止了胰岛素对PEPCK基因表达的调节作用。结论 二甲双胍可通过独立的非胰岛素信号转导途径或是与胰岛素的联合作用抑制PEPCK的基因表达 。