肥胖患者减重成功后其脂肪干细胞的生物学特性变化

目的探索肥胖患者减重成功后其脂肪干细胞(ASC)的生物学特性变化,为该类ASC在难愈性创面修复中的临床应用提供参考。方法该研究为实验研究。将2021年4月—2023年4月郑州大学第一附属医院收治的12例肥胖减重成功后行腹壁皮肤松弛矫正术的患者纳入减重组[女8例、男4例,年龄为(50±9)岁],将该单位同期收治的行腹部抽脂后面部填充术的12名健康志愿者纳入健康组[女10例、男2例,年龄为(50±9)岁]。收集减重组患者与健康组志愿者的脂肪组织并提取ASC,取第4、5代ASC进行实验。于培养0(即刻)、24、48、72 h,采用噻唑蓝法检测细胞增殖水平。行细胞划痕试验,计算划痕后12、24 h细胞迁移率。行细胞Transwell试验,培养24 h后计数迁移细胞。行成脂诱导、成骨诱导实验,分别于诱导18、21 d后观测细胞成脂、成骨分化水平。采用实时荧光定量反转录PCR法检测细胞中脂蛋白脂肪酶(LPL)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨桥蛋白、碱性磷酸酶(ALP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、转化生长因子β(TGF-β)的mRNA表达。各实验样本数均为12。结果培养0 h,减重组患者与健康组志愿者细胞增殖水平分别为1.022±0.056、1.000±0.144,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。培养24、48、72 h,减重组患者细胞增殖水平分别为1.366±0.030、1.353±0.012、1.390±0.016,明显低于健康组志愿者的1.755±0.077、1.737±0.014、1.700±0.023(t值分别为16.27、71.35、38.56,P值均<0.05)。细胞划痕试验中,划痕后12、24 h,减重组患者细胞迁移率均低于健康组志愿者,但差异均无统计学意义(P>0.05)。细胞Transwell试验中,培养24 h后,健康组志愿者和减重组患者细胞迁移数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。成脂诱导18 d后,减重组患者细胞成脂分化水平明显低于健康组志愿者(t=27.81,P<0.05);成骨诱导21 d后,减重组患者细胞成骨分化水平明显低于健康组志愿者(t=14.85,P<0.05)。与健康组志愿者比较,减重组患者细胞中LPL、PPARγ、TGF-β和Runx2的mRNA表达均明显降低(t值分别为59.48、146.10、46.10、3.13,P<0.05),而骨桥蛋白、ALP和MMP-9的mRNA表达均无明显变化(P>0.05)。结论相对于健康志愿者,肥胖患者减重成功后其ASC的增殖功能明显减弱,分化功能相对较弱,与成脂、成骨分化对应的部分基因表达水平下降,这可能会影响用这些ASC治疗由烧伤、糖尿病和放射性损伤等导致的难愈性创面的效果,故在临床应用时,需要考虑ASC的供体差异。