NK-1R在胰腺癌中的表达、组织学定位和临床意义

目的探讨胰腺癌中P物质(SP)受体NK-1R的表达、组织学定位,并将结果结合临床资料分析,以期找出其中相关性。方法33个胰腺癌标本取自胰头癌根治术,男性19例,女性14例,正常胰腺组织取自20个器官捐献者,男性11例,女性9例。应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RQ-RT-PCR)技术,检测正常胰腺、胰腺癌组织和7株胰腺癌细胞中NK-1R的mRNA水平,应用Western blot技术检测NK-1R的蛋白水平,应用免疫组织化学方法进行NK-1R的组织学定位。结果与正常胰腺相比,胰腺癌组织中NK-1R mRNA和蛋白都过度表达,免疫组织化学结果提示:正常胰腺的腺泡和导管中有微弱的NK-1R表达,胰腺癌组织中有较强的NK-1R表达,主要位于胰腺癌细胞、神经纤维和炎性细胞。结论胰腺癌组织中NK-1R mRNA和蛋白表达水平都明显上调,扰乱了神经激肽的作用环节,促进胰腺癌细胞的发生和发展。

神经激肽-2受体的过度表达与慢性胰腺炎的疼痛相关(英文)

目的 :了解神经激肽 - 2受体 (NK - 2R)在正常胰腺和慢性胰腺炎组织中的表达 ,探讨其表达与慢性胰腺炎疼痛发生的关系。方法 :2 5个慢性胰腺炎标本取自慢性胰腺炎手术 ,男性 18例 ,女性 7例 ,正常胰腺组织取自 2 0个器官捐献者 ,男性 11例 ,女性 9例。应用实时定量逆转录聚合酶链反应技术 ,检测正常胰腺和慢性胰腺炎组织NK - 2R的mRNA水平 ,应用Westernblot技术检测NK - 2R的蛋白水平 ,应用免疫组织化学方法进行NK - 2R的组织学定位。将NK - 2RmRNA水平与疼痛的程度、发作频率和持续时间进行分析 ,寻找其中的相关性。结果 :与正常胰腺相比 ,慢性胰腺炎组织中NK - 2RmRNA和蛋白都过度表达 ,NK - 2RmRNA水平与疼痛的程度 (r =0 .5 9,P <0 0 1)、发作频率 (r=0 .5 1,P <0 0 5 )和持续时间 (r=0 5 3,P <0 0 5 )明显相关。免疫组化检查显示 ,NK - 2R的表达主要位于胰腺腺泡、胰腺导管、神经纤维和炎性细胞。结论 :慢性胰腺炎组织中NK - 2R的mRNA和蛋白表达水平都明显上调 ,扰乱了神经激肽的作用环节 ;NK - 2R的过度表达与疼痛发生有关。

胰腺癌细胞对5-氟尿嘧啶和健择产生获得性耐药的分子生物学机制初探

目的 探索胰腺癌细胞对 5 氟尿嘧啶 ( 5 FU)和健择产生获得性耐药的机制 ,分析这种耐药与凋亡的调控基因———bcl 2家族之间的关系。方法 5 FU和健择的细胞毒性作用通过磺酰罗丹明B蛋白染色法 (SRB)来检测 ,应用RNA酶保护分析法来检测化疗药物作用前后bcl 2家族mRNA表达水平。结果 5 FU和健择对 3株胰腺癌细胞均产生了细胞毒性作用 ,5 FU长期作用后 ,Capan 1细胞 5 0 %抑制浓度 (IC50 )上升了 2 .1倍 (P <0 .0 5 )。健择长期作用后 ,Capan 1细胞IC50 上升了 1.8倍 (P <0 .0 5 )。RNA酶保护分析结果提示 ,bcl xL 和mcl 1上调的细胞产生了获得性耐药。结论 化疗药物长期作用后 ,抑凋亡基因bcl xL 和mcl 1上调 ,胰腺癌细胞产生了获得性耐药。阻断这些抑凋亡基因的表达可能提高胰腺癌细胞对 5 FU和健择的敏感性 ,从而产生治疗作用。

神经激肽-1受体在溃疡性结肠炎黏膜中的表达

目的 了解神经激肽 1受体 (NK 1R)在溃疡性结肠炎 (UC)病人结肠活检黏膜中的表达 ,探讨该受体的表达与UC严重程度的关系。方法 38个UC黏膜标本取自因该病而行结肠镜检查的病人 ,男 2 3例 ,女 15例 ;对照组结肠黏膜取自 15例肠易激综合征 (IBS)病人 ,男 8例 ,女 7例。应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测对照组和UC肠黏膜NK 1R的mRNA表达水平 ,应用Westernblot技术检测NK 1R的蛋白水平 ,以免疫组化方法进行NK 1R的组织学定位。结果 与对照组肠黏膜相比 ,UC黏膜中NK 1RmRNA和蛋白都过度表达 ,NK 1RmRNA的表达与疾病的严重程度相关。免疫组化检查显示 ,NK 1R的表达主要位于UC的肠黏膜表面、黏膜固有层的单核细胞、黏膜下层的动静脉等处。结论 UC黏膜组织中NK 1R的表达水平明显上调 ,扰乱了神经激肽的作用环节 ,加剧了肠黏膜的病理改变。

胰腺癌细胞对5氟脲嘧啶和健择的获得性耐药机制的研究

目的探讨胰腺癌细胞对 5氟脲嘧啶 (5 FU)和健择产生获得性耐药的机制。方法用磺酰罗丹明B蛋白染色法检测细胞毒性作用 ,根据药物剂量与细胞生存的关系计算 5 0 %抑制浓度(IC50 ) ;用RNA酶保护分析和Westernblot法来检测Bcl xL和mcl 1的表达水平。结果 5 FU和健择对 3株胰腺癌细胞均产生了细胞毒性作用。 5 FU长期作用后 ,Capan 1细胞IC50 上升了 2 1倍 (P <0 0 5 ) ;健择长期作用后 ,Capan 1细胞IC50 上升了 1 8倍 (P <0 0 5 ) ;而Mia Paca 2细胞在 5 FU和健择作用前后IC50 明显降低 (P <0 0 5 )。产生获得性耐药细胞的Bcl xL 和mcl 1的表达均上调。结论胰腺癌细胞对 5 FU相对耐药 ,而对健择较为敏感。化疗药物长期作用后 ,抑凋亡基因Bcl xL和mcl 1的表达上调 ,胰腺癌细胞产生了获得性耐药。

激光微切和巢式逆转录聚合酶链反应联合检测单个肝细胞的基因表达

目的 探讨检测单个肝细胞基因表达的方法。方法应用激光微切的方法从冰冻切片上将单个肝细胞切下,提取总RNA,将RNA逆转录成cDNA,采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mRNA的表达。结果在显微镜下用紫外激光微切机,将单个肝细胞成功切下,提取RNA后,逆转录成cDNA,巢式RT-PCR的扩增产物在琼脂糖凝胶上清晰可见,其表达与细胞数量成正比。结论联合应用激光微切和巢式RT-PCR可以检测单个肝细胞的基因表达。

P物质及其受体在慢性胰腺炎组织的表达和临床意义

目的 了解P物质及其受体NK 1R在正常胰腺和慢性胰腺炎中的表达 ,探讨它们与慢性胰腺炎时疼痛发生的关系。方法 2 5个慢性胰腺炎标本取自慢性胰腺炎手术 ,男性 18例 ,女性 7例 ,正常胰腺组织取自 2 0个器官捐献者 ,男性 11例 ,女性 9例。应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术 ,检测正常胰腺和慢性胰腺炎组织P物质和NK 1R的mRNA水平 ,应用Westernblot技术检测NK 1R的蛋白水平 ,应用免疫组织化学方法进行NK 1R的组织学定位。将P物质及其受体NK 1RmRNA水平与疼痛的的程度、发作频率和病程进行分析 ,寻找其中的相关性。结果 与正常胰腺相比 ,慢性胰腺炎组织中P物质和NK 1RmRNA和蛋白都过度表达 ,NK 1RmRNA水平与疼痛的程度、发作频率和病程明显相关。免疫组化检查显示 ,NK 1R的表达主要位于胰腺腺泡、胰腺导管、神经纤维和炎性细胞。结论 慢性胰腺炎组织中P物质和NK 1R的表达水平都明显上调 ,扰乱了神经激肽的作用环节 ,NK 1R的过度表达与疼痛发生有关。

P物质受体NK-1R在克罗恩病组织中的表达和临床意义

目的 探讨P物质受体NK 1R在克罗恩病的病理生理过程中所起的作用。方法2 3例克罗恩病标本取自因该病并发症而手术的患者 ,正常肠管取自 2 4名器官捐献者。应用逆转录聚合酶链反应技术检测正常肠管和克罗恩病组织NK 1R的mRNA水平 ,应用Westernblot技术检测NK 1R的蛋白水平 ,应用免疫组织化学方法进行NK 1R的组织学定位。结果 克罗恩病组织中NK 1RmRNA和蛋白过度表达 ,NK 1R的表达主要位于肠粘膜表面、固有层的单核细胞、粘膜下层的血管和肌层等处。结论 克罗恩病组织中NK 1R的表达水平明显上调 ,扰乱了神经激肽的作用环节 ,可能与肠管的病理改变有关。

联合应用激光微切和实时定量RT-PCR检测单个胰岛的基因表达

在显微镜下用紫外激光微切机将单个胰岛从胰腺切片中切下,提取RNA后逆转录成cDNA并在实时定量RT-PCR中得到有效的扩增,其表达量与细胞数量成正比。