通过2 mM Ni2+孵化辣根过氧化物酶,可制备活化辣根过氧化物酶(Ni2+-HRP),实验验证了Ni2+-HRP的活性和稳定性,并对Ni2+-HRP催化2-二叔丁基苯酚反应的生成物进行了GC/MS,HPLC和核磁共振鉴定,确定为2,4,2',4'-四羟基-5,5'-二...通过2 mM Ni2+孵化辣根过氧化物酶,可制备活化辣根过氧化物酶(Ni2+-HRP),实验验证了Ni2+-HRP的活性和稳定性,并对Ni2+-HRP催化2-二叔丁基苯酚反应的生成物进行了GC/MS,HPLC和核磁共振鉴定,确定为2,4,2',4'-四羟基-5,5'-二叔丁基联苯,是一种几乎无毒的化合物,可作为制药前体的使用。展开更多
文摘对邻苯二酚-苯胺和苯酚-氨基安替吡啉构成的两组测定HRP酶活性的体系进行了研究和比较。紫外可见光光谱和高效液相色谱分析表明,在HRP催化过程中,邻苯二酚-苯胺氢供体对会生成为一种粉红色产物,该产物最大吸收波长在510 nm,可用于HRP的活性测量。且与常规使用的苯酚-氨基安替吡啉氢供体对的情况相比,具有更高的灵敏度、更低的检测限值和很好的重复性,在对HRP分别进行20次酶活测量,所得相对标准偏差仅为2.9%。使用邻苯二酚-苯胺氢供体对的方法可计算得到酶动力学参数Km(12.5 mM)和Vmax(12.2 mM min-1mg-1)。
文摘通过2 mM Ni2+孵化辣根过氧化物酶,可制备活化辣根过氧化物酶(Ni2+-HRP),实验验证了Ni2+-HRP的活性和稳定性,并对Ni2+-HRP催化2-二叔丁基苯酚反应的生成物进行了GC/MS,HPLC和核磁共振鉴定,确定为2,4,2',4'-四羟基-5,5'-二叔丁基联苯,是一种几乎无毒的化合物,可作为制药前体的使用。