湖北省恩施土家族苗族自治州环境硒水平与老年性白内障的相关性

目的探讨湖北省恩施土家族苗族自治州(简称恩施州)环境硒水平与老年性白内障的相关性。方法参考《恩施土壤全硒含量分布的研究》,将恩施州分为富硒环境区(土壤硒含量≥1.28 mg/kg)和缺硒环境区(土壤硒含量<1.28 mg/kg)。选取健康体检的600例老年人为研究对象,其中来源于富硒环境区及缺硒环境区的老年人各300例。记录研究对象的老年性白内障患病情况,检测研究对象的血硒含量、发硒含量、血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和血清硒蛋白P1(SEPP1)水平。采集富硒环境区及缺硒环境区的居民饮用水和原产土豆样本各100份,检测居民饮用水和土豆的硒含量。结果600例老年人中,老年性白内障患者244例(40.67%),白内障老年人血硒、发硒含量均低于非白内障老年人(均P<0.05)。富硒环境区老年人的血硒含量、发硒含量、血清GSH-Px活性和血清SEPP1水平均高于缺硒环境区老年人,老年性白内障发生率低于缺硒环境区老年人(均P<0.05)。富硒环境区的居民饮用水及土豆硒含量均高于缺硒环境区(均P<0.05)。血硒含量、发硒含量与老年性白内障发生率均呈负相关(均P<0.05)。结论湖北省恩施州环境硒水平与老年性白内障的发生具有相关性,环境硒水平越高,老年人的老年性白内障发生率越低。

湖北省恩施州不同硒含量地区初中生近视情况分析

目的:调查湖北省恩施州不同硒含量地区初中生的近视情况,分析血硒和发硒含量与近视发生的相关性。方法:横断面研究。以随机抽样方法分别抽取2020-09/2021-09富硒(土壤硒含量≥1.28mg/kg)及缺硒(土壤硒含量<1.28mg/kg)地区初中1~3年级学生共600名,各年级学生100名。检测血硒和发硒含量及谷胱甘肽过氧化物酶浓度和近视情况。结果:近视组学生244名(40.7%)血硒含量为75.14±11.16μg/L,发硒含量为0.51±0.01μg/g,非近视组学生356名(59.3%)血硒含量为110.24±12.14μg/L,发硒含量为0.68±0.02μg/g,两组血硒和发硒含量均有差异(均P<0.01)。低硒地区300名学生血硒含量为76.74±11.25μg/L,发硒含量为0.45±0.01μg/g,近视人数154名(51.3%);富硒地区300名学生血硒含量为102.31±10.26μg/L,发硒含量为0.71±0.02μg/g,近视人数90名(30.0%),与低硒地区学生比较,富硒地区学生血硒和发硒含量明显较高,近视发病率明显减少(均P<0.01)。富硒地区学生的GSH-Px活力含量为114.65±12.12U/L,低硒地区为75.34±13.20U/L(Z=37.994,P<0.01)。血硒和发硒含量与近视发病率负相关(r=-0.542、-0.621,P<0.05)。结论:恩施地区初中生血硒和发硒含量与近视的发生显著相关,有可能为临床上防治近视提供新思路。

干眼症患者结膜上皮细胞及泪液中CCL1、miR-21-5p表达及临床意义

目的分析干眼症患者结膜上皮细胞及泪液中趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)、微小RNA(miR)-21-5p表达水平及其临床意义。方法以恩施土家族苗族自治州中心医院收治的118例干眼症患者作为干眼组,92例体检健康者作为对照组;根据病情严重程度将干眼症组分为轻度组(39例)、中度组(46例)及重度组(33例)。收集2组对象结膜上皮细胞及泪液并检测CCL1、miR-21-5p表达水平,比较2组CCL1、miR-21-5p表达水平以及泪膜破裂时间(BUT)值、泪液分泌试验(SIT)值、角膜荧光素染色(CFS)评分差异。分析CCL1、miR-21-5p表达水平与SIT值、BUT值、CFS评分的相关性。受试者工作特征曲线(ROC)分析CCL1、miR-21-5p诊断干眼症的效能。结果干眼组患者结膜上皮细胞中CCL1、miR-21-5p表达水平为(353.26±70.45)ng/L、1.67±0.38,显著高于对照组的(263.16±49.27)ng/L、1.01±0.12(P<0.05);干眼组泪液中CCL1、miR-21-5p表达水平为(265.29±55.90)ng/L、1.45±0.28,显著高于对照组的(189.71±32.56)ng/L、0.98±0.13(P<0.05)。干眼组患者SIT值、BUT值低于对照组,CFS评分高于对照组(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组结膜上皮细胞、泪液CCL1、miR-21-5p表达水平及CFS评分逐次升高,SIT值、BUT值逐次降低(P<0.05)。相关性分析显示,结膜上皮细胞及泪液中CCL1与miR-21-5p表达水平呈正相关(r=0.706、0.752,P=0.000),结膜上皮细胞及泪液CCL1、miR-21-5p与SIT值、BUT值呈显著负相关,与CFS评分呈正相关(P<0.05)。结膜上皮细胞CCL1、miR-21-5p以及CCL1联合miR-21-5p诊断干眼症的价值分别为0.850、0.869、0.937。泪液CCL1、miR-21-5p以及CCL1联合miR-21-5p诊断干眼症的价值分别为0.907、0.881、0.964。结论干眼症患者结膜上皮细胞及泪液中CCL1、miR-21-5p表达水平均升高,CCL1、miR-21-5p均与病情以及SIT值、BUT值、CFS评分有关,联合检测结膜上皮细胞或泪液CCL1、miR-21-5p表达水平有助于干眼症的辅助诊断。

微小RNA-182-5p和信号转导分子7在翼状胬肉中的表达及临床意义

目的检测微小RNA-182-5p(miR-182-5p)和信号转导分子7(SMAD7)在翼状胬肉中的表达情况,探讨二者与患者临床病理特征及预后的相关性。方法选择2018年6月—2021年6月在本院眼科进行手术切除的原发性翼状胬肉组织标本150例进行研究,另选择同期因白内障手术获取的正常球结膜标本60例作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测标本miR-182-5p、SMAD7 mRNA表达水平;采用免疫组织化学染色检测SMAD7蛋白表达水平;采用Pearson法分析翼状胬肉组织中miR-182-5p与SMAD7 mRNA表达水平的相关性;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-182-5p和SMAD7的靶向关系。结果翼状胬肉组织中,miR-182-5p表达水平为(2.26±0.45),高于正常结膜组织的(1.05±0.12);SMAD7 mRNA表达水平为(0.67±0.12),低于正常结膜组织的(1.03±0.15);SMAD7蛋白阳性表达率为23.33%,低于正常结膜组织的71.67%;上述组间差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,翼状胬肉组织中miR-182-5p与SMAD7 mRNA表达呈负相关(r=-0.536,P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-182-5p与SMAD7存在靶向关系;miR-182-5p在进展期表达水平高于静止期,SMAD7在进展期阳性表达低于静止期,差异有统计学意义(P<0.05);与治愈组比较,复发组翼状胬肉组织miR-182-5p表达水平较高,SMAD7 mRNA表达水平及SMAD7阳性表达率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论翼状胬肉组织中,miR-182-5p呈高表达,SMAD7呈低表达,且二者均与患者临床病理特征和预后有关,或可成为翼状胬肉的治疗靶点。

闭眼游戏对上睑下垂矫治术儿童黑暗恐惧与心理适应的影响研究

目的:探讨闭眼游戏对上睑下垂矫治术儿童黑暗恐惧与心理适应的影响。方法:选取2019年1月-2020年12月接受上睑下垂矫治手术的65例患儿为研究对象,采用随机数字表法将患儿分为试验组和对照组,试验组32例、对照组33例。对照组在术前24 h使用床旁移动电脑播放自制动画视频3 min,播放结束对患儿以关键词形式询问宣教内容。试验组在对照组基础上采取闭眼游戏干预。比较两组患儿术后护理难度、术后黑暗恐惧程度及心理适应能力。结果:试验组患儿术后护理难度评分低于对照组(P<0.05),护理难度分级比较,试验组优于对照组(P<0.05);试验组患儿术后黑暗恐惧程度评分低于对照组(P<0.05);试验组患儿术后心理适应评分高于对照组(P<0.05)。结论:闭眼游戏能够有效降低上睑下垂矫治术患儿术后护理难度,改善上睑下垂矫治术患儿术后黑暗恐惧程度,提高上睑下垂矫治术患儿术后心理适应能力。

OCT检测POAG患者RNFL厚度的改变及视野缺损情况

目的:探讨OCT检测原发性开角型青光眼(POAG)患者视网膜神经纤维层厚度(RNFL)的改变及视野缺损情况。方法:回顾性病例系列研究。将POAG患者158例158眼作为POAG组,其中早期81眼,中期47眼,晚期30眼,选取同期体检无眼部相关疾病者50例50眼作为对照组。检测上方、下方、鼻侧、颞侧RNFL厚度及视野平均缺损值,POAG患者随诊3mo观察连续性变化。结果:POAG组随诊前及随诊3mo上方、下方、鼻侧、颞侧RNFL厚度均低于对照组,视野平均缺损值多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);早期POAG患者各部位RNFL厚度、视野平均缺损值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但各部位RNFL厚度高于中期、晚期POAG患者,视野平均缺损值少于中期、晚期POAG患者,差异有统计学意义(P<0.05);POAG组随诊前和随诊3mo各部位RNFL、视野平均缺损值比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析显示,上方、下方、鼻侧、颞侧RNFL厚度与视野平均缺损值均呈负相关关系(r=-0.719、-0.615、-0.681、-0.518,均P<0.05)。结论:OCT可监测POAG患者RNFL厚度变化,且与视野平均缺损呈负相关关系,可用于POAG早期诊断。

Ahmed青光眼阀植入术与小梁切除术治疗眼外伤继发性青光眼的疗效观察

目的:探讨Ahmed青光眼阀植入术与小梁切除术治疗眼外伤继发性青光眼的临床疗效。方法:选取2014年12月至2016年3月湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院眼科收治的眼外伤继发性青光眼患者128例(128眼),随机分为观察组和对照组,每组64例(64眼)。观察组行Ahmed青光眼阀植入术,对照组行小梁切除术,术后均随访12个月,比较两组患者术前及术后3个月、6个月、12个月视力、眼压、手术成功率及并发症发生情况。结果:两组患者术后眼压均较术前明显降低(均P<0.05),且末次随访观察组眼压明显低于对照组(P<0.05)。观察组术后视力提高率为71.88%,明显高于对照组的45.31%(P<0.05)。观察组术后12个月功能性滤过泡为43眼(67.19%),显著高于对照组的28眼(43.75%),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组手术完全成功率高于对照组(P<0.05),失败率低于对照组(P<0.05)。观察组并发症发生率较对照组低(P<0.05),两组患者均未出现眼内炎、恶性青光眼、视网膜脱离、眼球萎缩等并发症。结论:Ahmed青光眼阀植入术治疗眼外伤继发性青光眼疗效确切,相比小梁切除术可有效控制眼压,改善视力,且手术成功率高,值得临床推广应用。

两种方法治疗急性闭角型青光眼的疗效观察

目的探讨超声乳化白内障吸除人工晶体植入联合房角分离治疗急性闭角型青光眼合并白内障的临床疗效。方法收集2014年12月至2016年3月该院眼科收治的急性闭角型青光眼合并白内障患者128例(128眼),随机分为观察组和对照组各64例(64眼),观察组行超声乳化白内障吸除人工晶体植入联合房角分离术,对照组行复合式小梁切除术,观察术前及术后3个月视力、眼压、中央前房深度、前房角开放程度及并发症发生情况。结果术后观察组和对照组视力提高,眼压降低,中央前房深度加深(P<0.05),观察组改善程度优于对照组(P<0.05)。术后观察组前房角开放程度相比术前明显改善(P<0.05),而对照组前房角无明显改善(P>0.05)。结论白内障超声乳化吸除人工晶体植入联合房角分离术治疗急性闭角型青光眼合并白内障疗效确切,术后眼压控制良好,视力改善,中央前房深度增加,前房角形态改善,值得临床推广。

白藜芦醇通过miR-937/FOXQ1信号通路抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖

目的:研究白藜芦醇(RES)对视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法:CCK-8方法和流式细胞术分析细胞增殖和凋亡情况;TargetScan软件预测miR-937与叉头框蛋白Q1(FOXQ1)之间的关系,并采用双荧光素酶报告基因系统检测它们之间的相互作用;miR-937和FOXQ1 mRNA和蛋白表达水平分别采用逆转录-定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)和Western blot法检测。结果:RES抑制Y79细胞增殖,诱导其凋亡;视网膜母细胞瘤细胞系中miR-937表达水平较正常组织明显降低,而RES可明显诱导Y79细胞中miR-937表达;FOXQ1可以与miR-937直接相互作用,且其表达水平与miR-937呈负相关性;视网膜母细胞瘤细胞系中FOXQ1表达水平较正常细胞明显增高,而RES可明显抑制Y79细胞中FOXQ1表达;与RES单纯处理组相比,RES+miR-937 inhibitor组明显降低miR-937表达,促使了FOXQ1表达,诱导Y79细胞增殖,并降低其凋亡。结论:RES通过上调miR-937水平降低FOXQ1表达,进而抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖、诱导其凋亡,提示miR-937/FOXQ1信号通路可能是视网膜母细胞瘤治疗的新靶标。

青蒿琥酯对体外培养的视网膜神经节细胞氧化应激损伤的保护机制研究

目的:研究青蒿琥酯对体外培养的视网膜神经节细胞氧化应激损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法:体外培养视网膜神经节RGC-5细胞,将细胞分为空白对照组、H 2O 2组、H 2O 2+低剂量青蒿琥酯组、H 2O 2+中剂量青蒿琥酯组、H 2O 2+高剂量青蒿琥酯组,CCK8法检测各组细胞的相对存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,试剂盒检测各组细胞匀浆中氧化应激产物MDA、NO、SOD1水平,Western blot检测各组细胞中HO-1、SOD1、PI3K、Akt及p-Akt蛋白表达水平。结果:与H 2O 2组比较,不同剂量青蒿琥酯可以促使RGC-5细胞增殖,抑制其凋亡,差异比较有统计学意义(P<0.05);各药物组中MDA、NO显著低于H 2O 2组,而SOD1活性显著高于H 2O 2组;各药物组HO-1、SOD1、PI3K及p-Akt蛋白表达水平均显著高于H 2O 2组,差异均有统计学意义(P<0.05);并且PI3K抑制剂能降低青蒿琥酯对RGC-5细胞的保护作用。结论:青蒿琥酯能明显降低H 2O 2诱导的视网膜神经节细胞氧化应激损伤,其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。

五味子乙素通过诱导血红素加氧酶1表达改善糖尿病大鼠的视网膜病变

目的探讨五味子乙素(SchB)对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠视网膜组织中新生血管形成、炎症反应及氧化应激的影响,及其对血红素加氧酶1(HO-1)表达的诱导作用。方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组、DR组、DR+SchB组及DR+SchB+锌原卟啉组,采用尾静脉注射链脲佐菌素构建DR模型,并同时给予药物干预。药物干预8周后处死大鼠取材,检测血清缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)水平,同时检测视网膜组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)水平,分析超氧化物歧化酶1(SOD1)和过氧化氢酶(CAT)活性。采用Western Blot法检测视网膜组织中HO-1蛋白表达量。结果与正常对照组比较,DR组大鼠HIF-1α(t=3.439,P=0.016)、VEGF(t=6.092,P=0.006)、ICAM-1(t=10.043,P=0.000)、TNF-α(t=10.192,P=0.000)、NO(t=8.328,P=0.003)及MDA(t=4.219,P=0.017)水平显著升高,而SOD1(t=5.313,P=0.007)和CAT(t=12.331,P=0.000)活性及HO-1(t=4.336,P=0.008)表达显著降低,均有统计学意义(P<0.05),并且血管密度升高;与DR组大鼠比较,SchB治疗后降低了HIF-1α(t=5.109,P=0.009)、VEGF(t=3.286,P=0.019)、ICAM-1(t=4.573,P=0.015)、TNF-α(t=5.937,P=0.009)、NO (t=7.649,P=0.004)及MDA (t=4.315,P=0.008)水平,增强了SOD1(t=6.312,P=0.002)和CAT(t=11.094,P=0.000)活性及HO-1(t=6.113,P=0.006)表达及降低了血管密度,且上述指标变化能被锌原卟啉逆转,差异均有统计学意义。结论 SchB对DR大鼠的早期保护作用可能通过上调HO-1表达抑制新生血管形成、炎性反应及氧化损伤。

玉液汤合温阳活血利水方治疗糖尿病性黄斑水肿的临床疗效及对血清可溶性E选择素、血管内皮生长因子水平的影响

目的观察玉液汤合温阳活血利水方治疗糖尿病性黄斑水肿(DME)的临床疗效及对血清可溶性E选择素(s E-sel)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。方法将93例DME患者随机分为2组。2组均行激光光凝治疗,对照组46例予曲安奈德注射液眼内注射;治疗组47例予玉液汤合温阳活血利水方治疗2个月。观察比较2组治疗前及治疗1、2个月后视力、黄斑厚度情况,以及治疗前、治疗2个月后s Esel、VEGF水平变化情况,并统计临床疗效及毒副反应发生情况。结果治疗组总有效率80.85%,对照组总有效率60.87%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。2组治疗1、2个月后黄斑厚度均降低(P<0.05),视力均升高(P<0.05),且治疗2个月后改善情况均优于治疗1个月后(P<0.05)。治疗组治疗1、2个月后黄斑厚度均低于对照组(P<0.05),视力均优于对照组(P<0.05)。2组治疗2个月后s E-sel、VEGF水平均降低(P<0.05),且治疗组均低于对照组(P<0.05)。2组毒副反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论玉液汤合温阳活血利水方可改善DME患者黄斑厚度、视力,下调s E-sel、VEGF表达,疗效显著,且安全性高。

白藜芦醇通过上调miR-26a改善高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞损伤

目的:研究白藜芦醇(RES)对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19损伤的保护机制。方法:高葡萄糖(HG)刺激ARPE-19细胞诱导建立损伤模型。分别采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞活力、流式细胞术检测细胞凋亡率、DCFH-DA染色流式细胞仪检测活性氧(ROS)生成和定量即时聚合酶链锁反应(RT-qPCR)技术检测miR-26a表达水平。Western blot方法分析相关蛋白表达水平。结果:HG刺激明显降低ARPE-19细胞活力,凋亡率升高及氧化应激损伤加重。RES改善HG诱导的ARPE-19细胞损伤;上调HG诱导的ARPE-19细胞中miR-26a表达,miR-26a沉默部分逆转了RES对HG诱导的ARPE-19细胞损伤的保护效应。另外,RES还可通过上调miR-26a表达降低细胞外调节蛋白激酶(ERK)和Wnt/β-catenin信号通路活化。结论:RES通过上调miR-26a表达,伴随抑制ERK和Wnt/β-catenin信号传导,改善HG诱导的ARPE-19细胞损伤。RES可能成为治疗糖尿病视网膜病变的药物。

眼罩模拟联合过渡期护理对就医者重睑术后适应及恢复效果的影响

目的:探讨眼罩模拟联合过渡期护理对就医者重睑术后适应及恢复效果的影响。方法:选取2019年1月-2020年12月于笔者医院行重睑术的就医者64例作为研究对象,按照入院顺序,先入院者为对照组,后入院者为观察组,每组各32例。对照组采用重睑术常规护理,观察组在常规护理的基础上给予眼罩模拟联合过渡期护理。比较两组就医者应对适应能力、自我护理能力、术后满意度及重睑效果。结果:观察组就医者术后适应能力得分为(50.72±2.81)分,高于对照组的(45.36±2.74)分,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组自我护理得分及各维度得分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组就医者满意度及重睑效果评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:眼罩模拟联合过渡期护理能够有效提高就医者术后适应能力及自我护理能力,提高手术满意度及重睑效果。

增生性玻璃体视网膜病变患者血清及玻璃体炎症相关因子水平变化

目的:分析人血清和玻璃体炎症相关因子在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)发生发展中的作用。方法:46例视网膜疾病患者,依据临床诊断分为视网膜前膜/黄斑裂孔组(对照组,n=15)、孔源性视网膜脱离组(RRD组,n=14)以及PVR组(n=17),在Luminex xMAP平台上采用免疫复合分析法检测炎症相关因子水平,包含4种生长因子[细胞生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)、转化生长因子-α(TGF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)]、12种非白介素细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、干扰素-α2(IFN-α2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤生长相关因子(GRO)、巨细胞源性趋化因子(MDC)、可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)、趋化因子IP-10、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、单核细胞趋化蛋白1α(MIP-1α)、单核细胞趋化蛋白1β(MIP-1β)]和15种白细胞介素[白细胞介素-1α(IL-1α)、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12 p70、IL-13、IL-15、IL-17A],分析患者外周血和玻璃体中炎症相关因子水平差异。结果:共收集46份血清标本和38份玻璃体标本;三组患者血清中31种炎症相关因子水平并没有发生明显变化(P>0.05);对玻璃体中10种不同生长因子和细胞因子检测发现,与对照组比较,PVR组患者PDGF-AA、TGF-α、VEGF、IL-6、IL-8和TNF-β水平显著增高(P<0.01)。结论:相较于外周血,PVR组患者玻璃体中有反映疾病进展的更敏感的炎症相关因子。

青蒿琥酯通过Akt/HO-1信号通路抑制诱导H2O2的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡

目的研究青蒿琥酯(Art)对H2O2诱导的晶状体上皮细胞(HLEB3)氧化应激和凋亡的影响及其机制。方法补充分组及各组处理情况采用CCK8法检测细胞活力;通过测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSH)和丙二醛(MDA)水平来评估氧化应激损伤;流式细胞仪检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA水平;western blot分析Bax、Bcl-2、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及HO-1蛋白表达。结果(1)细胞活力:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=26.794,P=0.000);B组与A比较细胞活力降低,有统计学意义(t=34.364,P=0.000),C组与B组比较细胞活力升高,有统计学意义(t=17.358,P=0.000)。(2)氧化应激损伤:(1)SOD活性:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=21.634,P=0.000)。B组与A组比较SOD活性降低,有统计学意义(t=31.024,P=0.000),C组与B组比较SOD活性升高,有统计学意义(t=21.526,P=0.000);(2)CAT活性:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=15.607,P=0.000)。B组与A组比较CAT活性降低,有统计学意义(t=43.629,P=0.000),C组与B组比较CAT活性升高,有统计学意义(t=25.564,P=0.000);(3)GSH活性:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=38.347,P=0.000)。B组与A组比较GSH活性降低,有统计学意义(t=31.416,P=0.000),C组与B组比较GSH活性升高,有统计学意义(t=11.503,P=0.000);(4)MDA水平:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=23.614,P=0.000)。B组与A组比较MDA水平升高,有统计学意义(t=26.342,P=0.000),C组与B组比较MDA水平降低,有统计学意义(t=6.215,P=0.000)。(3)细胞凋亡:(1)细胞凋亡率:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=49.356,P=0.000)。B组与A组比较细胞凋亡率升高,有统计学意义(t=53.264,P=0.000),C组与B组比较细胞凋亡率降低,有统计学意义(t=10.629,P=0.000);(2)Bax表达水平:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=34.751,P=0.000)。B组与A组比较Bax表达升高,有统计学意义(t=32.169,P=0.000),C组与B组比较Bax表达降低,有统计学意义(t=14.317,P=0.000);(3)Bcl-2表达水平:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=29.648,P=0.000)。B组与A组比较Bcl-2表达降低,有统计学意义(t=49.634,P=0.000),C组与B组比较Bcl-2表达升高,有统计学意义(t=22.258,P=0.000)。(4)Akt/HO-1信号通路:(1)p-Akt表达水平:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=46.391,P=0.000)。B组与A组比较p-Akt表达降低,有统计学意义(t=38.561,P=0.000),C组与B组比较p-Akt表达升高,有统计学意义(t=26.146,P=0.000)。(2)HO-1表达水平:A组、B组和C组之间比较,差异有统计学意义(F=34.268,P=0.000)。B组与A组比较HO-1表达降低,有统计学意义(t=41.028,P=0.000),C组与B组比较HO-1表达升高,有统计学意义(t=26.551,P=0.000)。结论Art通过激活Akt/HO-1信号通路保护H2O2诱导的氧化应激和细胞凋亡,提示Art对氧化应激损伤诱导的白内障具有保护作用。

五味子乙素抑制视网膜母细胞瘤细胞生物学行为的分子机制研究

目的:研究五味子乙素对人视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响,及其对共济失调毛细血管扩张突变基因(ATM)/转录因子E2F1信号通路的作用。方法:体外培养Y79细胞,ATM inhibitor质粒和ATM mimics质粒转染Y79细胞进行ATM沉默或过表达,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定细胞活力和增殖情况,流式细胞仪分析Y79细胞凋亡及周期分布,划痕实验检测Y79细胞迁移,Transwell实验分析细胞侵袭,Western Blotting实验检测Y79细胞中细胞周期蛋白(cyclin D1、cyclin B1和CDK2)、抑癌基因周期蛋白依赖性激酶抑制4b(INK4b)、INK4a、肿瘤抑制蛋白ARF、人体抑癌基因p53、人视网膜母细胞抑制蛋白pRB、ATM及E2F1蛋白表达。结果:五味子乙素呈浓度依赖性抑制Y79细胞活力、克隆、迁移及侵袭,将Y79细胞阻滞在G0/G1期,诱导其凋亡;另外,五味子乙素显著诱导INK4b、INK4a、ARF、p53、pRB、ATM及E2F1蛋白表达,显著抑制cyclin D1、cyclin B1及CDK2蛋白水平(P<0.05);ATM沉默能部分降低五味子乙素对Y79细胞生物学行为的抑制作用。结论:五味子乙素通过激活ATM/E2F1信号传导,进而抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖,提示ATM/E2F1信号通路可能是视网膜母细胞瘤治疗的新靶标。

渥曼青霉素抑制脉络膜黑色素瘤细胞生物学行为的分子机制研究

目的观察渥曼青霉素对脉络膜黑色素瘤MuM-2C细胞增殖、克隆、迁移、侵袭及凋亡的影响,及其作用分子机制。方法CCK-8方法检测了MuM-2C细胞活力,Caspase-glot-3/-9活性测定试剂盒检测了Caspase-3/9活性,Western blot实验分析了Cleaved caspase-3、Cleaved PARP、p-P85(Y458)、p-AKT(S473和T308)和p-S6K(T389)蛋白表达水平,ELISA法检测了单链DNA(ss DNA)的水平,流式细胞术检测了MuM-2C细胞凋亡率。结果渥曼青霉素处理MuM-2C细胞48 h后,呈浓度和时间依赖性的抑制细胞增殖、诱导Caspase-3/9活性的增强、增高了细胞凋亡标志物ss DNA水平、还促使了促凋亡蛋白Cleaved caspase-3和Cleaved PARP的表达;4μM的渥曼青霉素处理细胞48 h后,能明显诱导MuM-2C细胞的早期和晚期凋亡,还显著抑制了P85(Y458)、AKT(S473和T308)和S6K(T389)的磷酸化水平;渥曼青霉素相比于同浓度的PI3K-AKT-mTOR信号通路抑制剂(LY3023414、纳巴霉素、OSI-027和MK-2206)抗A431细胞增殖的活性更强。结论渥曼青霉素通过阻滞PI3K-AKT-mTOR信号传导抑制脉络膜黑色素瘤MuM-2C细胞的生物学行为。

五味子乙素通过上调miR-374a改善过氧化氢诱导人视网膜色素上皮细胞损伤

目的研究五味子乙素(SchB)对过氧化氢(H2O2)诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)氧化损伤的保护效应及其作用机制。方法H2O2诱导ARPE-19细胞氧化损伤模型,分别采用CCK8实验、流式细胞术、DCFH-DA染色和RT-qPCR技术检测细胞活力、凋亡、ROS含量及miR-374a表达水平;Western blot方法检测、氧化应激相关蛋白表达水平,PI3K/AKT和MEK/ERK信号通路相关蛋白表达情况。结果H2O2刺激明显降低了ARPE-19细胞活力,诱导其凋亡及氧化应激损伤;SchB改善H2O2诱导的ARPE-19细胞损伤;SchB上调H2O2诱导的ARPE-19细胞中miR-374a表达,并且miR-374a沉默部分逆转了SchB对H2O2诱导的ARPE-19细胞损伤的保护效应;SchB还可通过上调miR-374a表达降低PI3K/AKT和MEK/ERK信号通路活化。结论SchB通过上调miR-374a表达,抑制PI3K/AKT和MEK/ERK信号传导,改善H2O2诱导的ARPE-19细胞氧化损伤;SchB可能成为治疗视网膜氧化损伤的药物。

儿茶素没食子酸酯对人视网膜色素上皮细胞氧化应激损伤的机制研究

目的探讨儿茶素没食子酸酯(EGCG)对过氧化氢(H_2O_2)诱导人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞氧化应激损伤及TRAF6/TAK1信号通路活化的影响。方法采用H_2O_2(100μmol/L)体外诱导ARPE-19细胞氧化应激损伤模型,将ARPE-19细胞分为正常对照组、H_2O_2诱导组、H_2O_2+低剂量(40μmol/L)EGCG组、H_2O_2+中剂量(80μmol/L)EGCG组、H_2O_2+高剂量(160μmol/L)EGCG组;CCK8法检测ARPE-19细胞相对存活率,相关试剂盒检测氧化应激产物MDA、NO水平及SOD1活性,Western Blot方法分析HO-1、SOD1、TRAF6、TAK1及p-TAK1蛋白表达。结果与H_2O_2诱导组比较,不同浓度EGCG干预的ARPE-19细胞相对存活率明显升高(P<0.05),细胞匀浆氧化应激产物MDA、NO水平明显降低(P<0.05),匀浆中SOD1活性显著升高(P<0.05),细胞中HO-1及SOD1表达水平显著升高(P<0.05),细胞中TRAF6及p-TAK1蛋白表达显著降低(P<0.05),并表现出剂量依赖性。结论 EGCG能明显抑制H_2O_2诱导的ARPE-19细胞氧化应激损伤,其作用机制可能与抑制TRAF6/TAK1信号通路活化有关。