一期腹腔镜手术与分期内镜加腹腔镜手术治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床效果和安全性比较

目的比较一期腹腔镜手术与分期内镜加腹腔镜手术治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床效果和安全性。方法回顾性分析121例胆囊结石合并胆总管结石患者的临床资料,根据治疗方法分为一期组69例与分期组52例。一期组患者接受一期腹腔镜手术治疗,包括腹腔镜胆囊切除术、腹腔镜胆总管探查术和一期缝合术;分期组患者接受内镜逆行胰胆管造影术及内镜下乳头括约肌切开术+择期腹腔镜胆囊切除术治疗。比较两组患者的手术成功率、残余结石率、围术期指标、社会经济指标、术后近期并发症发生率及术后远期并发症发生率。结果两组患者的手术成功率、残余结石率、手术时间、术中出血量、术后排气时间、术后近期并发症发生率及术后远期并发症发生率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。一期组的术后住院时间短于分期组,住院费用少于分期组(均P<0.05)。结论一期腹腔镜手术和分期内镜加腹腔镜手术均是治疗胆囊结石合并胆总管结石安全、有效的微创手术方案,而一期腹腔镜手术的术后住院时间更短、住院费用更低。在实际临床中,需严格掌握手术适应证,根据患者具体情况选择个性化的治疗方案。

肝细胞癌循环肿瘤细胞标志物及检测方法研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)在中国是一种高发病率和高死亡率的恶性肿瘤。肿瘤切除、肝移植是治疗该病最有效的手段,但术后的高复发率和高转移率是影响患者预后的重要因素。外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)是导致肝细胞癌术后复发和转移的必要因子。综述了CTCs的标记物——磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3、转铁蛋白受体、甲胎蛋白、α-L岩藻糖苷酶、上皮细胞粘附因子、高尔基蛋白73和异常凝血酶原等,以及利用这些标记物检测CTCs的特异性和灵敏度,以期为肝细胞癌转移的早期检测、术后的复发、预后评估和选择治疗方案等提供依据。

肝硬化门静脉高压症危险因素分析

目的：探讨肝硬化门静脉高压症发生危险因素。方法：收集122例肝硬化患者临床资料,其中伴门静脉高压50例设为肝硬化门静脉高压组,单纯肝硬化72例设为肝硬化组。Logistic回归分析肝硬化门静脉高压症发生的危险因素。结果：单因素分析显示,两组男性比例、腹水形成、血清白蛋白、血小板计数（PLT）、脾门静脉内径和脾脏长度差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。Logistic回归分析显示,腹水形成[OR=1.957,95%CI（1.37～2.45）]、脾门静脉内径增加[OR=2.334、95%CI（1.99～3.02）]、PLT降低[OR=2.439,95%CI（2.07～2.80）]是肝硬化门静脉高压症形成的危险因素。结论：临床腹水形成、门静脉内径增加和PLT降低是肝硬化患者门静脉高压形成的危险因素,肝硬化患者应定期检查上述指标,以便早期预防肝硬化门静脉高压症。

超声引导腰方肌阻滞联合全身麻醉对老年结直肠癌患者术后早期认知功能及应激的影响

目的评价超声引导腰方肌阻滞(QLB)联合全身麻醉对老年结直肠癌患者术后早期认知功能及应激的影响。方法选择2018年7月~2019年7月恩施土家族苗族自治州中心医院行开腹结直肠癌手术的患者60例,依据随机数字表法将其分为超声引导QLB联合全身麻醉组(T组)和全身麻醉组(C组),每组30例。T组患者术前在超声引导下行双侧QLB,阻滞20 min后开始麻醉诱导;C组同法注射等量生理盐水。记录并比较两组入室10 min(T1)、麻醉诱导5 min(T2)、切皮后5 min(T3)、切皮后2 h(T4)及手术结束时(T5)平均动脉压(MAP)、心率(HR)、血糖(GLu)和C-反应蛋白(CRP)水平。记录并比较两组手术当晚8时及次日清晨6时BIS值,记录深睡眠时间(BIS<80)和有效睡眠指数(SEI)。记录并比较术后24、48 h视觉模拟评分(VAS),术后第1天、第3天认知功能障碍(POCD)例数,术后舒芬太尼用量及恶心呕吐例数。记录并比较术前1 d(Ta)、术后1 d(Tb)、术后3 d(Tc)及术后5 d(Td)简易智力状态量表(MMSE)及蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分。结果T组术后第1天POCD例数、恶心呕吐例数、术后舒芬太尼用量、术后24 h VAS评分低于C组,差异均有统计学意义(均P<0.05);两组术后第3天POCD例数、术后48 h VAS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。T组术后当晚8时、次日清晨6时BIS值小于C组,SEI值大于C组,深睡眠时间长于C组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。T组Tb MMSE及MoCA评分低于C组,Tc MMSE评分低于C组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。T组T3~T5 MAP低于C组,T3、T5 HR低于C组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。T组T3~T5 Glu水平低于C组,T2 CRP水平低于C组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论QLB联合全身麻醉可减轻老年结直肠癌患者围术期应激反应,降低术后早期POCD的发生率。

不同吻合方式对行胰十二指肠切除术患者术后并发症和营养状态的影响

胰头癌和壶腹周围癌起病隐匿,患者常合并胆管十二指肠梗阻和顽固性疼痛等症状,胰十二指肠切除术（PD）是治疗该类肿瘤的标准手术方式。尽管日趋完善的手术技术和围术期处理显著降低了患者围术期死亡,但诸如胰瘘、围术期出血、胃排空延迟（DGE）等术后相关并发症发生率仍高达30%-50%,

利用GEO数据库分析肝细胞癌组织中着丝粒蛋白F基因的表达及其与预后的相关性

目的探讨着丝粒蛋白F(CENPF)基因在肝细胞癌(HCC)患者组织中的表达情况及与临床特征和预后的相关性。方法利用在线工具Oncomine分析CENPF在HCC与正常肝组织的表达情况,从美国国立生物技术信息中心的GEO数据库下载相关芯片数据(GSE14520),收集215例HCC组织的基因表达谱及相关临床数据,将其分为CENPF低表达组(n=107)和CENPF高表达组(n=108)。对样本中的CENPF基因表达数据及其对应的临床信息进行分析。计量资料组间比较采用t检验;计数资料组间比较采用χ~2检验;生存分析采用log-rank(Mantel-Cox)检验;生存资料单因素及多因素分析采用Cox比例风险模型。结果数据集证实HCC组织中CENPF表达水平明显高于正常肝组织(t=12.217,P<0.001)。CENPF基因表达水平与AFP水平、肿瘤大小、TNM分期、转移风险有关系(χ~2值分别为6.463、4.338、7.951、17.331,P值均<0.05)。生存分析显示CENPF高表达患者预后明显差于CENPF低表达组(风险比=1.92,95%可信区间:1.24~2.96,P=0.005)。Cox单因素分析显示,HCC患者预后与AFP水平、肿瘤直径、合并肝硬化、肿瘤分期、转移风险及CENPF表达相关(P值均<0.05);Cox多因素分析显示,合并肝硬化、肿瘤分期及CENPF高表达是HCC患者预后的独立危险因素(P值均<0.05)。结论 CENPF基因高表达可能与HCC进展相关,可作为HCC患者的潜在预后生物标志物。

原发性肝细胞癌患者血清TATIP2/TIP30、RBBP4水平与临床病理的关系

目的：探讨原发性肝细胞癌患者外周血中人类免疫缺陷病毒体外转录结合蛋白2（TATIP2／TIP30）、视网膜母细胞瘤结合蛋白4（RBBP4）的检测水平及临床意义。方法选择2013年8月至2015年10月该院肝胆外科收治的原发性肝细胞癌患者（肝细胞癌组）40例、肝硬化患者（肝硬化组）40例、体检健康者（健康对照组）40例作为研究对象。采用双抗夹心法酶联免疫吸附试验检测3组人群外周血TATIP2／TIP30、RBBP4水平并进行比较。结果肝细胞癌组TATIP2／TIP30水平低于肝硬化组和健康对照组，差异有统计学意义（F＝43．19，P＜0．05），而RBBP4水平高于肝硬化组和健康对照组，差异有统计学意义（F＝69．61，P＜0．05）。肝硬化组和健康对照组TATIP2／TIP30、RBBP4水平比较差异无统计学意义（t＝0．98、0．87，P＞0．05）。Ⅲ～Ⅳ期患者TATIP2／TIP30水平低于Ⅰ～Ⅱ期患者，而RBBP4水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差异均有统计学意义（t＝5．93、5．81，P＜0．05）。肝癌伴淋巴结转移患者TATIP2／TIP30水平低于原发性肝细胞癌不伴淋巴结浸润患者，而RBBP4水平高于原发性肝细胞癌不伴淋巴结浸润患者，差异均有统计学意义（t＝5．81、8．59，P＜0．05）。低分化肝癌患者TATIP2／TIP30水平低于中、高分化肝癌患者，而RBBP4水平高于中、高分化肝癌患者，差异均有统计学意义（t＝5．56、8．28，P＜0．05）。原发性肝癌患者血清TATIP2／TIP30、RBBP4水平呈负相关（r＝－0．491，P＝0．036）。结论TATIP2／TIP30、RBBP4在原发性肝细胞癌患者血清中呈异常表达，TATIP2／TIP30、RBBP4的异常分泌与原发性肝细胞癌的发病及进展密切相关。

肿瘤相关中性粒细胞与肝癌发展的相关性研究进展

中国为原发性肝癌高发地区,大部分肝癌患者首诊时已为晚期,具有治疗效果欠佳、预后差、5年生存率低等特点。肝癌发病机制复杂,针对肝癌防治的新靶点亟待探索。中性粒细胞在机体固有免疫中发挥防御作用,而研究发现中性粒细胞在肝癌肿瘤微环境中也扮演了重要角色,参与了肝癌发生、发展和转移等多个环节。本研究对肿瘤相关中性粒细胞在肝癌肿瘤微环境中相关作用的研究进展进行分析,探索肝癌的潜在治疗靶点,并为肝癌的防治策略提供新的思路。

口服左旋肉碱对经动脉化疗栓塞术后中期肝癌患者肝功能的影响

中期肝细胞癌（HCC）被定义为广泛的多灶性疾病,常无血管浸润,肝功能常好,无明显癌症相关症状。经动脉化疗栓塞术（TACE）为其常用治疗方法。左旋肉碱（4-N-三甲基-3-羟基丁酸铵）是由必需氨基酸甲硫氨酸和赖氨酸合成的必需氨基酸,存在于人体肝脏,肾脏和脑中,但主要从饮食中获得。一些研究报道了左旋肉碱对肝脏的保护作用。近年来,我们也对左旋肉碱在中期HCC TACE后患者肝脏保护作用作了评估,探其近期和远期疗效报道如下。

硒-甲基硒代半胱氨酸抑制原发性肝癌大鼠肿瘤血管生成的作用及机制

目的探讨硒-甲基硒代半胱氨酸(Se-methyl selenocysteine,MSC)抑制原发性肝癌大鼠肿瘤血管生成的作用及机制。方法选取重庆医科大学实验动物中心提供的清洁级SD大鼠120只,采用随机数字表法分成4组,分别为对照组(30只)、MSC低剂量组(30只)、MSC中剂量组(30只)和MSC高剂量组(30)只,采用小剂量间断DNE法制备原发性肝癌大鼠模型,MSC低、中、高剂量组大鼠分别使用12.5 mmol/L、50 mmol/L和200 mmol/L MSC灌胃,给药剂量为5 ml/kg,对照组使用等剂量生理盐水灌胃,每周5次,共进行6周。采用全自动生化分析仪检测血清AST和ALT水平,酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)水平,观察大鼠肝脏病理状态,采用免疫组织化学法检测大鼠微血管密度(microvascular density,MVD)与组织内VEGF、HIF-α的表达。结果 MSC低剂量组AST水平最高,对照组ALT水平最高,组间大鼠血清AST、ALT水平差异有统计学意义(F值分别为13.057、12.991,P值分别为0.015,0.023)。对照组大鼠HIF-1α、VEGF及MVD水平最高,组间差异有统计学意义(F值分别为13.054、12.973、13.068,P值分别为0.029、0.014、0.032)。MSC中、高剂量组大鼠肝组织内VEGF、HIF-1α表达强度显著低于对照组(χ~2值分别为13.521、14.205,P值分别为0.042、0.033)。结论 MSC可有效抑制原发性肝癌大鼠模型瘤体中新生血管的生成,其机制与MSC抑制癌组织内HIF-1α和VEGF的表达有关。

急救早期诱导亚低温在院外心脏骤停患者抢救中的应用价值分析

目的探讨急救早期诱导亚低温在院外心脏骤停患者抢救中的应用价值。方法回顾性分析2012年3月～2016年10月在恩施土家族苗族自治州中心医院接受抢救的院外心脏骤停患者的临床资料。根据是否采用早期诱导亚低温抢救分为常规抢救组和早期诱导亚低温抢救组。观察两组患者抢救成功率，比较两组患者抢救前后心功能、心肌酶指标、血气指标以及并发症发生率的差异。结果早期诱导亚低温抢救组抢救成功率为10．90％，明显高于对照组（P〈0．05）；早期诱导亚低温抢救组的心跳复跳时间低于对照组；两组患者抢救前心功能和心肌酶指标的差异无统计学意义；早期诱导亚低温抢救组抢救后左心房内径、右室内径和肌酸激酶同工酶均较抢救前降低（P〈0．01），左室射血分数水平较抢救前增高（P〈0．01）。两组患者抢救前血气指标的差异无统计学意义；早期诱导亚低温抢救组抢救后血氧饱和度水平高于对照组（P〈0．01），终末潮气CO2分压水平低于对照组（P〈0．01）。两组患者抢救后肝肾功能损伤、脑损害和心力衰竭发生率的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论急救早期诱导亚低温对院外心脏骤停息者有较好的应用效果，可明显提高患者抢救成功率，改善患者心功能和血气指标，具有良好的应用价值。

腹腔镜胆囊切除术高位胆管损伤的预防及处理

目的探讨腹腔镜胆囊切除术中高位胆管损伤的原因、预防及处理方法。方法对2009年1月至2014年1月我科收治外院转入的16例腹腔镜胆囊切除术后胆管损伤的病例和同期我科腹腔镜胆囊切除术2200例无胆管损伤的临床资料进行分析。结果16例胆管损伤的部位均为肝总管横断及毁损伤，其中11例行肝总管-空肠Roux-en-Y吻合术，5例行左右肝管整形-空肠Roux-en-Y吻合术，16例病人术后恢复良好，无死亡病例。同期2200例LC术中采用“肝总管显露”确认后再行胆囊切除无一例发生胆管损伤。结论腹腔镜胆囊切除术高位胆管损伤最多见，术中“肝总管显露”是预防高位胆管损伤的可靠方法。肝总管（或左右肝管整形）-空肠Roux-en-Y吻合术是治疗高位胆管损伤最有效的手术方式。

肝癌组织中D-氨基酸氧化酶基因表达的临床意义

目的探讨肝癌组织中D-氨基酸氧化酶(DAO)基因表达水平与其临床特征及预后的相关性。方法收集214例肝癌患者的肝癌组织的基因表达谱及相关临床数据,对DAO基因表达水平与其临床特征及预后进行单变量和多变量分析。结果单变量分析提示,DAO高表达组中,血AFP水平较低(P=0.001),结节数目较少(P=0.042),TNM分期较好(P=0.014),转移风险较低(P=0.001),且预后较好(P=0.011)。多变量分析发现,DAO高表达组中,血AFP水平较低(OR为0.162,95%CI为0.078~0.336),转移风险较低(OR为0.140,95%CI为0.069~0.284),且预后明显优于低表达组患者(OR为0.833,95%CI为0.700~0.992)。结论肝癌组织中,DAO表达水平与患者血AFP水平、转移风险及预后相关,其高表达是肝癌的保护性因素之一。

垂盆草苷对胆道梗阻大鼠肝脏组织形态及PERK/eIF2α信号通路的影响

目的:研究垂盆草苷对胆道梗阻大鼠肝脏组织形态及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核翻译起始因子2α(eIF2α)信号通路的影响。方法:60只SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、阳性对照组(异甘草酸镁,15 ml·kg^(-1))、垂盆草苷低(15 ml·kg^(-1))、高(60 ml·kg^(-1))剂量组,每组12只。除正常对照组外,其余各组建立胆道梗阻模型。各给药组灌胃给药,正常对照组和模型组给与等量蒸馏水,1次/d,连续1周。采用HE染色法观察肝脏组织病理形态;PCR检测PERK、eIF2α基因表达水平;黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD);TBA法检测丙二醛(MDA);四唑盐比色法检测黄嘌呤氧化酶(XOD);比色法检测谷胱甘肽(GSH);TUNEL检测肝细胞凋亡;Western Blot检测肝组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl2关联X蛋白(Bax)、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白表达水平。结果:正常对照组肝脏细胞结构完整;模型组肝细胞结构模糊,有局灶性坏死及炎性细胞浸润;阳性对照组和垂盆草苷低、高剂量组以上情况均有所改善,以垂盆草苷高剂量组效果更佳。与正常对照组相比,模型组PERK和eIF2α基因水平、XOD、MDA、肝细胞凋亡率、Bax、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白水平显著升高(P<0.05),SOD、GSH、Bcl-2水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组和垂盆草苷低、高剂量组PERK和eIF2α基因水平、XOD、MDA、肝细胞凋亡率、Bax、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH、Bcl-2水平显著升高(P<0.05)。垂盆草苷低、高剂量组与阳性对照组相比,各指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:垂盆草苷可改善肝组织病理形态及氧化应激水平,降低肝细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PERK/eIF2α通路的激活有关。

肝癌组织上皮细胞转化序列2基因的表达及其临床意义

目的探讨肝癌组织上皮细胞转化序列2(ECT2)基因的表达及其临床意义。方法从GEO数据库下载相关芯片数据,选取GPL3921平台包含的220例正常肝组织和215例肝癌组织及其附带临床信息进行分析。根据ECT2基因(219787_s_at)表达值的中位数(5. 54)将肝癌患者分为ECT2基因低表达组107例和ECT2基因高表达组108例,比较两组患者的临床特征以及预后。采用Cox模型分析肝癌患者预后的影响因素。结果肝癌组织中ECT2基因表达水平高于正常肝组织(P <0. 05);相比于ECT2基因低表达组,ECT2基因高表达组的甲胎蛋白(AFP)水平、原发肿瘤-区域淋巴结-远处转移(TNM)分期和肿瘤转移风险更高,肿瘤直径更大,预后更差(P <0. 05)。多因素Cox分析结果显示,AFP>300 ng/ml、TNM分期Ⅱ～Ⅲ期、高转移风险、ECT2基因高表达均是患者预后的独立危险因素(均P <0. 05)。结论 ECT2基因在肝癌组织中高表达,是肝癌患者预后的独立危险因素,ECT2基因高表达患者预后较差。

腹腔镜联合胆道镜治疗肝内外胆管结石的临床分析

目的 探讨腹腔镜与胆道镜联合胆管切开取石术在肝内外胆管结石中的应用效果。方法 选取2012年1月至2015年4月间的110例肝内外胆管结石患者为研究对象,将其按照随机数字表法分为腔镜、胆道镜联合组（联合组）与开腹组,两组各55例。采取SPSS 19.0统计学软件进行数据分析与处理,手术时间、术中出血量、肛门排气时间、住院时间计量资料采取均数±标准差（x±s）表示,采用t检验;术后并发症、残石率计数资料采取χ-2进行检验,P〈0.05为差异有统计学意义。结果 联合组与开腹组患者手术时间、术中出血量、肛门排气时间和住院时间为（99.5±10.7）min比（132.6±12.7）min、（89.5±11.4）ml比（163.6±23.5）ml、（24.5±1.7）h比（85.2±8.3）h、（7.5±1.1）d比（12.7±2.7）d,差异有统计学意义（t=23.308,t=10.471,t=16.443,t=6.216,P〈0.05）。联合组比开腹组术后并发症发生率9.1%比20.0%,差异有统计学意义（χ^2=6.301,P〈0.05）。联合组比开腹组残石率10.9%比41.8%,差异有统计学意义（χ^2=4.682,P〈0.05）。结论 临床中对于肝内外胆管结石患者实施腹腔镜与胆道镜联合治疗效果显著,属于微创手术,手术时间短,术中出血量少,术后恢复快,并发症相对较少,治疗安全性高,值得临床中应用与推广,实际应用价值高。

射频消融联合经皮无水乙醇注射对比单独射频消融治疗肝癌的Meta分析

目的:比较射频消融联合经皮无水乙醇注射(RFA+PEI)和单独射频消融(RFA)治疗肝癌的临床疗效。方法:利用计算机和人工检索的方式检索PubMed、Cochrane Library、Embase、Clinicaltrials.gov、维普期刊、万方数据和CNKI,全面搜集国内外关于射频消融联合经皮无水乙醇注射对比单独射频消融治疗肝癌的临床对照试验。按照Cochrane协作网提供的方法用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入6篇文献,包括737例患者,其中RFA+PEI组340例,单独RFA组397例。Meta分析合并效应示:在治疗肝癌上,RFA+PEI组在1,3,5年生存率优于单独RFA组,差异均有统计学意义(均P<0.01);RFA+PEI组在肿瘤完全消融率亦高于单独RFA组(RR:1.06,95%CI:1.02~1.11,P=0.003),且不增加主要并发症的发生率(RR:0.95,95%CI:0.64~1.42,P=0.81)。结论:在肝癌的治疗中,与单独RFA相比,RFA联合PEI体现更多的优势。

肝脏手术围手术期应用等渗性和高渗性白蛋白的临床疗效比较

目的探讨肝脏手术患者围手术期应用等渗性和高渗性白蛋白的临床疗效。方法前瞻性收集恩施土家族苗族自治州中心医院肝胆外科2008年5月至2013年10月期间收治的113例行肝癌切除术的患者,随机分为等渗组(47例)和高渗组(66例),等渗组自手术之日起给予5%人血白蛋白100 m L/d,高渗组给予20%人血白蛋白100 m L/d,连续3 d,比较2组患者的临床疗效指标。结果 2组患者的住院时间、下床活动时间、胆汁漏发生率及切口感染发生率,以及术后第3天的丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血红蛋白(Hb)水平及白细胞(WBC)计数比较差异均无统计学意义(P>0.05);而术后3 d等渗组的尿量和腹腔引流量均高于高渗组(P<0.05),术后第3天的白蛋白水平却低于高渗组(P<0.05)。结论在肝脏手术围手术期输入等渗性人血白蛋白有利于扩充血容量,输入高渗性人血白蛋白有利于减少腹水形成和纠正低蛋白血症。

miR-200b-3p下调VEGFA调控胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的分子机制研究

目的探讨miR-200b-3p通过血管内皮生长因子A(VEGFA)调控胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胰腺癌组织和细胞中miR-200b-3p表达水平;胰腺癌细胞PANC-1分为NC组、miR-200b-3p mimic组、si-VEGFA组及si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组。CCK-8和Transwell检测胰腺癌PANC-1细胞增殖活力以及细胞迁移和侵袭能力;Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡实验检测PANC-1细胞凋亡;Western blotting和双荧光素酶报告基因验证miR-200b-3p与VEGFA的靶向关系。结果miR-200b-3p在胰腺癌组织和细胞中低表达。PANC-1细胞过表达miR-200b-3p 48 h后,NC组和miR-200b-3p mimic组细胞增殖活性分别为1.250±0.028、0.983±0.044;迁移细胞数分别为402.700±21.530、158.000±17.620,侵袭细胞数分别为478.300±31.050、170.000±32.470,细胞凋亡百分比为(5.280±0.352)%、(7.430±0.393)%;miR-200b-3p mimic组细胞增殖活性、迁移和侵袭能力均显著低于NC组(t=5.060,P=0.007;t=8.796,P=0.001;t=6.863,P=0.002),细胞凋亡百分比显著高于NC组(t=4.076,P=0.015)。VEGFA-WT单独转染细胞荧光强度为1.000±0.027,显著高于VEGFA-WT+miR-200b-3p mimic共转染细胞(0.632±0.048;t=6.637,P=0.003)。VEGFA-MUT单独转染细胞荧光强度为1.000±0.049,与VEGFA-MUT+miR-200b-3p mimic共转染细胞差异无统计学意义(0.868±0.047;t=1.944,P=0.124)。PANC-1细胞过表达miR-200b-3p 48 h后,NC组和miR-200b-3p mimic组中VEGFA相对表达量分别为1.000±0.058、0.762±0.020,miR-200b-3p mimic组显著低于NC组(t=3.908,P=0.017)。PANC-1细胞转染si-VEGFA或同时转染si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor 48 h后,NC组、si-VEGFA组及si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组PANC-1细胞增殖活性分别为1.300±0.058、0.943±0.047、1.143±0.023,迁移细胞数分别为446.000±17.350、206.300±19.360、428.300±30.330,侵袭细胞数分别为510.300±24.550、175.700±24.290、473.700±35.530,组间差异具有统计学意义(F=15.830,P=0.004;F=33.530,P=0.001;F=38.860,P<0.001)。si-VEGFA组细胞增殖活性、迁移和侵袭能力均显著低于NC组(P=0.003,P<0.001,P<0.001),而si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组细胞增殖活性、迁移和侵袭能力与NC组差异无统计学意义(P=0.107,P=0.854,P=0.671)。NC组、si-VEGFA组及si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组细胞凋亡百分比分别为(3.810±0.577)%、(7.373±0.482)%、(3.650±0.514)%,组间差异具有统计学意义(F=16.020,P=0.004),si-VEGFA组细胞凋亡百分比显著高于NC组(P=0.007),而si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组与NC组差异无统计学意义(P=0.975)。结论miR-200b-3p通过靶向下调VEGFA表达,进而抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移,并促进细胞凋亡。

垂体肿瘤转化因子1和Ten-eleven转运因子1在肝细胞癌中的表达及相关性分析

目的探讨肝癌组织中垂体肿瘤转化因子1(PTTG1)及Ten-eleven转运因子1(TET1)表达水平及其与临床病理的相关性,为预测肝癌的发生及发展提供理论基础。方法选择2017年2月至2019年1月恩施土家族苗族自治州中心医院行根治性切除手术肝细胞癌病例标本129例作为实验组,另选取129例对应的癌旁组织作为对照组。应用免疫组织化学法检测PTTG1和TET1在肝癌组织及癌旁组织中的表达,分析PTTG1和TET1的表达与肝细胞癌临床病理指标的关系,对PTTG1和TET1表达水平进行相关性分析。结果PTTG1在肝细胞癌组织的高表达率(53.5%,69/129)显著高于癌旁组织(1.6%,2/129)(χ^2=84.646,P<0.001),TET1在癌组织的表达(45.0%,58/129)显著低于癌旁组织(81.4%,105/129)(χ^2=35.255,P<0.001)。PTTG1的表达水平与TET1表达水平呈负相关关系(r=-0.726,P<0.001)。PTTG1的表达水平与卫星结节、Edmondson病理分级密切相关(P<0.05),TET1的表达水平与肿瘤包膜状况、卫星结节密切相关(P<0.05)。结论PTTG1和TET1在肝细胞癌组织中异常表达,并且与肝细胞癌的发生、发展密切相关,临床上有望成为肝癌的诊断和根治性切除治疗预后的生物标志物。