神经病理性疼痛大鼠脊髓背角一氧化氮合酶各亚型的表达及活性变化

目的比较神经病理性疼痛大鼠模型脊髓背角中神经型（nNOS）、诱导型（iNOS）和内皮型（eNOS）三种一氧化氮合酶（NOS）的表达及活性变化。方法雌性SD大鼠20只，150～200g，随机均分为坐骨神经保留性损伤（SNI）组和对照组。SNI组大鼠于左后肢制备SNI模型，对照组大鼠暴露坐骨神经后立即缝合手术切口。术后观测疼痛的变化，于术后第14天断头处死大鼠，截取L4-6段脊髓，分离左右侧脊髓，于-80℃储存。SNI组和对照组各取5只大鼠脊髓，RT—PCR技术扩增nNOS、eNOS和iNOS片段，以β—actin作为内参照，比较SNI组与对照组NOS表达的相对差异。取两组另外5只大鼠脊髓冰上迅速匀浆，均取40μg的蛋白，分别检测组成型NOS（cNOS，即nNOS和eNOS）和iNOS的活性。结果SNI组手术侧nNOS、iNOS的mRNA表达均高于SNI组非手术侧和对照组手术侧（P＜0．05），而eNOS的表达在SNI组手术侧、非手术侧和对照组手术侧之间差异并无统计学意义。NOS亚型催化活性检测显示SNI组手术侧iNOs和cNOS的活性均高于SNI组非手术侧和对照组手术侧（P＜0．05）。结论神经病理性疼痛大鼠模型脊髓背角中iNOS的表达及其合成NO的活性均增加，可能促进了疼痛的发生，nNOS在疼痛中可能具有较强的调节能力。

PC12细胞转染nNOSα和nNOSβ对NF-kappa B转录活性和细胞凋亡的影响

目的:比较转染nNOSα和nNOSβ的PC12细胞NF-kappaB转录活性和细胞凋亡百分数,探讨nNOSα和nNOSβ在功能上的差异性.方法:将携带nNOSα和nNOSβ基因的pcDNA3.0表达质粒转化感受态细胞,在大肠杆菌中扩增后,提纯质粒酶切鉴定.nNOSα和nNOSβ基因的pcDNA3.0表达质粒通过脂质体转染PC12细胞,G418筛选,使用抗nNOS羧基端的抗体,通过免疫组织化学和WesternBlot方法检测nNOS的表达效率.提取经G418筛选PC12细胞核蛋白,采用凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测细胞核NF-kappa B转录活性.不同PC12细胞经PI染色后流式细胞仪分选,测定不同增殖周期的细胞数.结果:质粒酶切鉴定结果与携带nNOSα和nNOSβ基因的pcDNA3.0质粒结构相符;免疫组织化学和Western Blot方法检测转染nNOS基因后表达的nNOSα和nNOSβ均高于未转染的PC12细胞(P<0.05),PC12细胞转染nNOSα增加NF-kappa B转录活性(P<0.05),而nNOSβ降低NF-kappaB转录活性(P<0.05);转染nNOSα和nNOSβ及未转染的PC12细胞均不改变细胞凋亡百分数(P>0.05).结论:nNOSα增加PC12细胞NF-kappaB转录活性,nNOSβ降低C12细胞NF-kappa B转录活性,但均不改变细胞凋亡百分数,nNOSα和nNOSβ在功能上具有差异性.

围手术期心律失常病人的处理

心律失常为器质性心脏病所致,麻醉手术常有一定危险性。因此,在围手术期应加强心电图监测,以便迅速和正确地作出诊断,明确诱发因素,采取积极有效的防治措施。自1990年以来我科对18例心律失常病人施行手术时,无1例发生意外,现将其处理过程报告如下。