Cx43基因修饰对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移能力的影响

目的探讨Cx43基因对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、细胞周期及细胞迁移等方面的作用。方法采用LipofectamineTM2000转染的方法将重组表达质粒p Bud CE4.1-Cx43转染人肝癌SMMC-7721细胞(实验组),对照组细胞仅转染空载质粒p Bud CE4.1,空白组为未转染的SMMC-7721细胞。通过RT-PCR、Western blot检测转染后Cx43的mRNA和蛋白的表达情况,划痕荷载染料传输实验检测细胞间通讯功能,流式细胞仪检测细胞周期并通过CCK-8增殖实验、细胞划痕损伤实验、小室侵袭实验评价转染Cx43基因对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。结果实验组Cx43 mRNA和蛋白表达高于对照组和空白组,差异有统计学意义(均P<0.05)。实验组细胞传递的荧光强度高于对照组和空白组(P<0.05),实验组细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少(P<0.05)。实验组与对照组和空白组比较,SMMC-7721细胞的增殖受到抑制(P<0.05),尤以72小时为著。实验组迁移能力下降,细胞侵袭能力下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论转染Cx43基因能够抑制人肝癌SMMC-7721细胞迁移的能力,并可以抑制肿瘤细胞增殖。

Cx26基因修饰对人胃癌MGC-803细胞增殖和迁移能力的影响

目的探讨Cx26基因对人胃癌MGC-803细胞的生长、细胞周期及迁移的影响。方法将重组表达质粒p Bud CE4.1-Cx26转染至人胃癌MGC-803细胞(转染组),另设空白组(未经任何特殊处理)和对照组(空载质粒组)。收集40例胃癌组织及对应癌旁正常组织。通过RT-PCR和Western blot法测定细胞及组织中的Cx26 mRNA及蛋白表达水平。划痕染料示踪法检测细胞间通讯功能。采用MTT比色法及Transwell迁移实验分别检测转染后细胞增殖及迁移的变化,Western blot法检测各组细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase 3)表达情况,流式细胞仪检测转染后细胞周期变化。结果 Cx26基因mRNA和蛋白在人胃癌组织中的表达量低于癌旁组织,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。Cx26基因修饰人胃癌MGC-803细胞后,转染组与对照组和空白组比较,Cx26 mRNA和蛋白表达升高(均P<0.05),细胞传递的荧光强度亦升高(P<0.01)。转染后48 h、72 h细胞增殖均受到抑制(均P<0.01)。转染24 h后,转染组MGC-803细胞穿膜数低于对照组和空白组(均P<0.01),细胞凋亡相关蛋白Bax和caspase 3表达均增加(均P<0.01),Bcl-2表达各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。转染后48 h,转染组MGC-803细胞被阻滞在G2期(P<0.01)。结论转染Cx26基因对人胃癌MGC-803细胞的增殖与迁移具有抑制作用,对细胞凋亡有促进作用,并可阻滞细胞在G2期。