miR-103靶向钙调磷酸酶调节蛋白1对糖尿病肾病足细胞损伤的影响

目的探讨微小RNA-103(miR-103)在高糖诱导足细胞损伤中的作用及其可能的分子机制。方法本研究从2018年1月至2019年1月期间,体外培养人足细胞(HPC),以高糖刺激足细胞6、12、24 h,qRT-PCR与Western blotting分别检测高糖刺激下HPC细胞miR-103、钙调磷酸酶调节蛋白1(RCAN1)表达;采用ELISA检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;流式细胞仪检测细胞凋亡率。检测干扰miR-103的表达及RCAN1过表达后细胞凋亡率及IL-6、TNF-α水平变化;双荧光素酶报告基因检测验证miR-103与RCAN1的靶向调控关系。结果高糖诱导的足细胞中miR-103的表达量升高[(1.00±0.07)比(4.51±0.34)](P<0.05),而RCAN1表达水平降低[mRNA(1.00±0.08)比(0.59±0.06);蛋白(0.86±0.05)比(0.36±0.04)](P<0.05),足细胞凋亡率增加[(5.31±0.52)%比(24.36±1.58)%](P<0.05),IL-6、TNF-α水平升高[(7.23±0.33)ng/mL比(18.84±0.85)ng/mL;(0.34±0.03)ng/mL比(0.95±0.07)ng/mL](P<0.05);干扰miR-103的表达及RCAN1过表达后,足细胞凋亡率降低[(22.87±1.55)%比(14.72±0.82)%;(22.76±1.14)%比(13.88±0.85)%](P<0.05),IL-6[(18.54±0.62)ng/mL比(12.74±0.44)ng/mL;(19.74±0.61)ng/mL比(14.87±0.56)ng/mL]、TNF-α[(0.92±0.05)ng/mL比(0.54±0.06)ng/mL;(0.90±0.06)ng/mL比(0.56±0.04)ng/mL]水平降低(P<0.05);miR-103与RCAN1存在靶向关系,miR-103能够负向调控RCAN1的表达与活性;干扰RCAN1的表达部分逆转干扰miR-103的表达对高糖刺激足细胞的保护作用。结论干扰miR-103的表达可通过促进RCAN1的表达而减轻糖尿病肾病足细胞损伤。