聚乙二醇沉淀剂有效分离尿外泌体(英文)

尿外泌体是病毒大小的胞外囊泡,是非侵入性获得肾及泌尿生殖道细胞生理病理信息的重要靶标。聚乙二醇沉淀剂可经济高效地分离富集血清等外泌体,但未见用于尿外泌体富集的详细报道。本研究采用聚乙二醇沉淀剂分离鉴定尿外泌体,并对其RNA组分进行检测,以期建立一个经济、高效、简便的尿外泌体分离富集方法。采集10例健康志愿者晨尿20 m L,聚乙二醇沉淀剂分离尿外泌体。透射电镜观察到直径30~100 nm双层膜包绕的囊性小泡,中央有直径5~15 nm高电子密度区。Western印迹检测到外泌体标记蛋白CD63、CD9、TSG101、ADAM10和内标蛋白β-肌动蛋白的表达。纳米粒径仪测定粒子直径介于30~130 nm,并可见25.37 nm和95.07 nm二个粒子峰。qRT-PCR扩增得到β-肌动蛋白和RNU6 RNA产物带。上述结果表明,聚乙二醇沉淀剂可分离富集尿外泌体,该法简单、高效,不需要超速离心机等昂贵设备,且采用该法富集到的外泌体可用于后续蛋白质与核酸分析。该方法可望加速液体活检应用,尤其是肾及泌尿生殖道病变的无创检测。

PEDF、END在UUO肾组织的表达及ADSCs对其的影响

目的动态观察大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)肾组织中色素上皮衍生因子(PEDF)及内皮抑素(END)的变化,以及脂肪干细胞(ADSCs)对其的影响。方法复制UUO动物模型,以ADSCs进行干预,选取UUO术后第3、7和14天为时间点,观察大鼠在UUO后肾损伤及纤维化的进程,以及PEDF和END蛋白的表达变化。结果肾损伤、纤维化程度及PEDF的表达随梗阻时间延长而加重或增加。END在术后先增加后降低,但仍高于对照组。ADSCs干预在各个时间点均能使END和PEDF的表达降低。结论 UUO后PEDF和END蛋白表达上调可能是梗阻后微血管损伤、血管生成调节异常介导的微血管闭塞产生的重要机制之一。ADSCs干预可通过抑制PEDF和END的表达,促进损伤血管的修复和新生血管的生成。

EV71型重症手足口病致死法医学鉴定1例

1案例资料1.1病历资料摘要患儿,女,2岁。因＂发热伴呕吐2天＂于某日18时入某医院诊治。血常规结果：白细胞11.35×109/L,中性粒细胞72.2%,淋巴细胞20.1%。体温38.2℃,精神萎靡,未见皮疹,咽部充血,初步诊断为上呼吸道感染（胃肠型）。收入院后予抗感染、补液及止吐等对症支持治疗。