几种药食同源植物来源中药肝毒性机制研究进展

药食同源植物在《食品安全法》中被称为“按照传统既是食品又是中药材的物质”,被广泛应用于日化产品、保健食品和日常饮食。现中华人民共和国国家卫生健康委员会公布的药食同源资源共110种,其中药食同源植物共99种,其中部分植物可造成肝损伤。本文主要概括薄荷、栀子、肉桂、决明子和白果等几种药食同源植物来源中药通过氧化应激途径、线粒体途径和P450酶系代谢途径等造成肝损伤的主要作用机制,以期为药食同源植物的合理安全用药提供科学指导,对其在食疗、药用及保健等领域的深入研究提供参考资料。

一种药膳火锅底料的研制工艺

火锅底料作为火锅的核心,是火锅的关键部分。然而,不良的火锅底料会引起“火锅综合征”,可能会诱发口腔溃疡、咽喉肿痛、胃炎、胃溃疡等一系列病症。本工艺基于栀子、玉竹和荷叶等药食同源中药材的养生保健效果,以中医药理论为指导,在藤椒火锅制备工艺的基础上,选用栀子、玉竹、荷叶、余甘子和甘草进行组合,结合食品加工工艺等多环节的系统性,形成既有清热泻火之功,又兼具食品属性的药食同源产品,以丰富火锅产品种类,并为药膳食品的开发提供参考。

一种药膳火锅底料的研制及挥发性成分分析

文章在已有的火锅底料配方的基础上,以药食同源中药材栀子、玉竹、余甘子、荷叶和甘草为主要原料,以鲜藤椒、豆豉、豆瓣酱、干辣椒和香辛料等为辅料制作药膳火锅底料,并研究其挥发性成分。通过单因素试验和正交试验,确定了药膳火锅底料的最佳配方:600 g火锅底料中含栀子7.5 g、玉竹5.0 g、余甘子9.5 g、荷叶10.0 g。采用水蒸气蒸馏法提取火锅底料的挥发性风味成分,气相色谱-质谱联用法(GC-MS)检出挥发性风味成分共37种,其中烃类化合物15种,醇类化合物7种,酯类化合物5种,醛类化合物5种,醚类化合物2种,酮类化合物1种,酚类化合物2种。其中前3种主要成分及其含量为芳樟醇40.57%、柠檬烯15.02%、茴香脑12.64%。在此条件下研制的药膳火锅底料油水红润,分层明显,无中药苦味,咸淡适中,浓郁鲜香。

木姜子新鲜果实挥发油成分分析及抗氧化活性研究

目的:明确川产木姜子新鲜果实挥发油的主要成分及其抗氧化活性,为木姜子的开发利用提供理论依据。方法:利用单因素试验和正交试验优化水蒸气蒸馏法挥发油的提取工艺,通过GC-MS检测挥发油中的主要成分,采用羟自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)清除试验测定其抗氧化活性。结果:木姜子鲜果挥发油得率在加热时间6 h,料液比1∶20 g/mL的条件下达到最优,其得率为4.59%。GC-MS分析木姜子鲜果挥发油中的主要成分为柠檬醛、芳樟醇和柠檬烯。抗氧化试验测得其·OH和DPPH·清除能力的IC_(50)分别为19.650 mg/mL和18.994 mg/mL。结论:优化后木姜子鲜果挥发油的提取工艺稳定、可靠,通过GC-MS分析发现木姜子鲜果挥发油中含有丰富的芳香化合物和抗氧化物质,说明木姜子可以作为天然食品添加剂的原料。

清汁型米酒的研制及挥发性风味成分分析

以糯米、紫薯和玫瑰为主要原料,研制清汁型米酒。通过单因素和正交试验探究清汁型米酒的最佳制备工艺条件;采用顶空固相微萃取-气质联用(HS-SPME-GC-MS)技术检测清汁型米酒的挥发性风味物质;参考国家标准进行清汁型米酒的理化及微生物指标测定。结果表明,以100.0 g糯米、100 m L纯净水为基准,清汁型米酒的最佳工艺条件为紫薯60.0 g,玫瑰1.2 g,甜酒曲0.8 g,30℃恒温发酵48 h。清汁型米酒中共检出挥发性风味物质23种,其中醇类5种、酯类8种、烯烃类1种、羧酸类2种、酮类2种、其他类5种。清汁型米酒的总酸含量为0.25 g/100 g,还原糖含量为2.51 g/100 g,蛋白质含量为3.26 g/100 g,酒精度为7.18%vol;菌落总数为9 CFU/g,大肠菌群未检出。清汁型米酒的感官评分83分,呈清澈紫红色,米香、醇香与玫瑰花香交融,口感细腻柔和,酸甜协调。

原代心肌细胞培养方法的研究进展

体外培养的原代心肌细胞具有良好的自发节律性和收缩性,且不受神经、体液等因素的影响,被认为是研究和治疗心血管系统疾病的稳定而有效的研究对象。传统方法培养的心肌细胞活力、纯度不高,且获得的细胞数量少,因此国内外诸多学者对心肌细胞的培养方法进行研究和改进,旨在建立便捷、高效、稳定的培养方法,以获得存活率、纯度及活性较高、结构功能完整、生长状态好的心肌细胞。目前原代心肌细胞的培养方法纷繁各异,笔者拟就心肌细胞培养方法的研究进行综述,且着重对心肌细胞分离、纯化、培养等方面进行介绍,以期为初次接触原代心肌细胞培养的研究者提供技术支持。

藤椒及其干燥品的急性毒性和胃肠动力学比较研究

目的:探讨干燥前后藤椒急性毒性的变化及其对小鼠胃肠道作用的影响。方法:采用灌胃给药的方式,单次灌胃鲜藤椒水提物(生药量2.00 g/kg、2.60 g/kg、3.40 g/kg、4.50 g/kg、6.00 g/kg),干藤椒水提物(生药量3.53 g/kg、4.20 g/kg、5.00 g/kg、5.96 g/kg、7.10 g/kg),通过改良Bliss法计算半数致死量(LD 50),观察给药后小鼠体质量、摄食量、饮水量的变化,计算主要脏器系数,检测血生化、血常规指标进行急性毒性评价。连续灌胃鲜藤椒、干藤椒水提液(生药量1.48 g/kg、0.74 g/kg、0.37 g/kg),采用营养型半固体糊法进行胃排空和小肠推进率实验来考察藤椒对小鼠胃肠动力的影响。结果:鲜藤椒的LD 50为3.70 g/kg、干藤椒的LD 50为5.03 g/kg。中毒反应均表现为活跃增加、呼吸浅快、四肢颤动等症状并随给药时间延长出现死亡或行动迟缓、精神萎靡、反应迟钝。观察期内小鼠体重、摄食量、饮水量、血生化与血常规与对照组相比无明显变化(P>0.05)。实验结束剖检各脏器无明显肉眼可见器质性病变,个别剂量组心脏、肺脏、肾脏系数发生改变(P<0.05或P<0.01),猜测可能存在心脏、肾脏、肺脏毒性。连续给药后,两者均能明显促进小鼠的胃肠道运动(P<0.05或P<0.01)。结论:藤椒的急性毒性明显,鲜藤椒的毒性大于干藤椒,证明干燥能降低藤椒的毒性。干燥前后的藤椒均可明显促进小鼠的胃排空与肠推进,发挥其促胃肠动力作用。

竹叶花椒提取物抑制大鼠肝细胞BRL 3A自噬而诱导ROS累积

目的研究竹叶花椒甲醇提取物(ZADCM)对BRL 3A细胞自噬水平与活性氧(ROS)生成量的影响。方法体外培养BRL 3A细胞,将其与ZADCM(70μg·mL^(-1))处理3、6、12、24 h或不同浓度的ZADCM(30、50、70μg·mL^(-1))孵育24 h,干预给药用3-甲基腺嘌呤(10 mmol·L^(-1))、二甲双胍(2.5 mmol·L^(-1))处理;采用CCK-8法检测BRL 3A细胞存活率,流式细胞术检测BRL 3A细胞内ROS生成量,免疫荧光法观察自噬标志性蛋白LC3B的荧光强度,Western blotting检测p-mTOR、mTOR、p-ULK1、ULK1、Beclin-1和LC3B蛋白的表达。结果不同浓度ZADCM处理24 h后,与正常对照组比较,免疫荧光结果显示LC3B荧光强度降低;ZADCM(70μg·mL^(-1))处理12或24 h后,Western blotting结果显示,LC3B和Beclin-1蛋白表达水平均降低(P<0.05或P<0.01),p-mTOR^(2448)/mTOR、p-ULK1^(757)/ULK1均显著升高(P<0.05)。激光共聚焦结果显示ROS灶点增加,且流式细胞术结果显示,药物处理组的ROS水平均明显升高(P<0.05或P<0.01);采用3-甲基腺嘌呤或二甲双胍干预后,与药物处理组比较,细胞内ROS升高或降低,自噬相关蛋白表达降低或升高,ZADCM组BRL 3A细胞存活率降低或升高。结论ZADCM可能通过激活BRL 3A细胞内mTOR/ULK1信号通路,抑制细胞自噬,并伴随ROS累积,引起细胞活力下降。

藤椒对小鼠肠粘膜屏障的影响及其抗化疗性腹泻作用机制研究

目的:探讨藤椒甲醇提取物对化疗相关性腹泻小鼠肠粘膜屏障的影响与抗炎止泻作用及其机制。方法:60只雄性小鼠随机分成正常对照组、模型对照组、阳性药洛哌丁胺0.5 mg/kg组、藤椒甲醇提取物0.22、0.45、0.89 g/kg组。连续腹腔注射5-氟尿嘧啶50 mg/kg诱导化疗相关性腹泻模型,并在建模前预防性灌胃藤椒甲醇提取物及洛哌丁胺,连续11 d,记录小鼠的体质量、摄食量以及腹泻评分;检测小鼠血清二胺氧化酶(DAO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)含量;苏木精-伊红(HE)和过碘酸雪夫氏(PAS)染色观察小鼠回肠粘膜损伤情况;免疫组化检测回肠组织闭锁蛋白(Occludin)、增殖细胞核抗原(PCNA)、环氧合酶-2(COX-2)的表达;免疫印迹法检测回肠组织P38分裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核转录因子(NF-κB)信号通路蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比,模型对照组体质量和摄食量显著下降,腹泻评分显著升高(P<0.01);回肠肠绒毛高度与隐窝深度显著下降(P<0.01),杯状细胞数目锐减(P<0.01),Occludin、PCNA表达下调(P<0.01),COX-2表达上调(P<0.01);小鼠血清DAO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量升高,IL-10含量降低(P<0.01);P38MAPK/NF-κB通路蛋白磷酸化表达明显上调(P<0.05)。与模型对照组比较,藤椒甲醇0.45、0.89 g/kg组体质量增加,腹泻评分明显降低(P<0.05或P<0.01);小鼠回肠粘膜及杯状细胞损伤程度明显减轻(P<0.05或P<0.01);小鼠回肠Occludin、PCNA表达明显上调,COX-2明显下调(P<0.05或P<0.01);小鼠血清DAO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量明显降低,IL-10含量明显增加(P<0.05或P<0.01);P38MAPK/NF-κB通路蛋白磷酸化表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:藤椒甲醇提取物可减轻化疗相关性腹泻的严重程度及回肠黏膜损伤,其机制可能与其抑制P38MAPK/NF-κB信号通路活化,减轻肠道炎症,修复肠粘膜屏障有关。

竹叶花椒提取物诱导BRL 3A细胞产生DNA损伤和凋亡的机制研究

目的 探讨竹叶花椒甲醇提取物(ZADCM)对大鼠肝细胞BRL 3A的DNA损伤和凋亡的潜在作用机制。方法 体外培养大鼠正常肝细胞(BRL 3A),CCK-8法测量细胞毒性,荧光探针测定ROS变化,微核实验检测细胞染色体损伤,彗星实验检测DNA损伤,流式细胞术测定细胞凋亡情况,Western blot测定DNA损伤相关蛋白以及凋亡相关蛋白表达量。结果 随着ZADCM浓度增加,细胞存活率下降,具有时间-剂量关系;ZADCM可以剂量依赖方式诱导细胞内ROS累积,导致染色体损伤与DNA损伤,表现为微核细胞率、细胞尾长、尾部DNA含量、OTM值以及γH2AX、p-ATM和p-Chk2表达量升高;并进一步诱导细胞凋亡。结论 竹叶花椒甲醇提取物可导致细胞存活率下降,直接诱导细胞内ROS升高,进一步引起细胞染色体损伤和ATM介导的DNA损伤,最终导致细胞凋亡。