IL-34的生物学特性及与心血管疾病和自身免疫性疾病关系的研究进展

IL-34可由神经元、角质形成细胞和成骨细胞等分泌,并在多种组织中表达。目前发现的受体有巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)和蛋白酪氨酸磷酸酶ζ(PTP-ζ),其中最重要的是M-CSFR。IL-34与M-CSF的生物学活性相似,能促进单核-巨噬细胞系统的增殖与分化,能诱导多种细胞因子和趋化因子生成增加,具有促炎,促进破骨细胞形成以及神经保护的作用。在心血管疾病和自身免疫性疾病中,IL-34水平有明显增高,表明其与这些疾病关系密切,可能在疾病的发生、发展中起重要作用。

HSV-TK/CD20双自杀基因系统慢病毒载体的构建及应用

目的构建同时表达单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)和RQR8膜蛋白双自杀可控开关的Jurkat细胞,使之可通过更昔洛韦药物(GCV)或利妥昔单抗(RTX)实现可控性细胞消除。方法 RQR8膜蛋白小分子含利妥昔单抗识别的模拟表位和抗CD34单抗表位。合成编码RQR8及HSV-TK的基因,构建慢病毒共表达载体pLV-RQR8-T2A-TK;脂质体Lipofectamine3000转染Jurkat细胞,流式荧光抗CD34单抗检测RQR8的表达,通过磁珠筛选获得RQR8+TK+Jurkat细胞;分别加入GCV或RTX检测自杀可控开关功能:CCK8法检测加药后细胞增殖情况,Annexin-V/PI检测细胞凋亡情况。结果慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK酶切片段大约1 670 bp,测序进一步证实外源片段插入正确。慢病毒感染Jurkat细胞,感染率为45.21%,磁珠纯化得到99.4%纯度的RQR8+TK+Jurkat。GCV对RQR8+TK+Jurkat具有细胞毒性作用,GCV浓度为40μmol/L时,其存活率为(52.11±7.04)%,IC50为20.66μmol/L。80μmol/L GCV作用RQR8+TK+Jurkat细胞72 h后凋亡率达(41.28±2.78)%。在血清(含补体)存在情况下,320μg/ml RTX可通过补体介导的细胞杀伤作用杀伤RQR8+TK+Jurkat,其存活率为(29.64±4.52)%。结论双自杀可控开关慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK构建成功,加入GCV或RTX可通过2种不同路径成功杀伤细胞,达到细胞清除目的,提高了安全性,为临床治疗过继免疫不良反应提供多种选择。

香菇多糖对约氏疟原虫感染小鼠树突状细胞的免疫调节作用

目的观察香菇多糖(lentinan,Lent)对约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,Py17XL)感染小鼠树突状细胞(dendritic cells,DCs)的免疫调节作用。方法 120只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,腹腔接种1×106Py17XL寄生的红细胞后,实验组用香菇多糖腹腔注射处理,对照组仅采用PBS腹腔注射处理,分别统计小鼠的平均生存时间和原虫血症水平;分离小鼠脾脏DCs细胞,用Western blot检测其IL-2、IL-10、IL-12、TGF-β、CD86和TLR-9蛋白表达水平。结果实验组和对照组小鼠平均生存时间为(8.35±2.55)d和(5.30±1.26)d,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组脾脏DCs细胞IL-2、IL-12、TGF-β、CD86和TLR-9蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05),IL-10蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05)。结论香菇多糖具有抗疟作用,能通过上调IL-2、IL-12、TGF-β、CD86和TLR-9等细胞因子水平促使DCs成熟和加强抗原递呈作用。