心血管内科老年住院病人营养不良和营养风险评估分析

目的:调查心血管内科老年病人入院时的营养状况,为存在营养不良和有营养风险病人实施及时的营养支持提供参考依据。方法:采用体质指数(BMI)、血清清蛋白(ALB)和前清蛋白(PA)水平等指标进行营养不良评估。采用NRS2002营养风险筛查法,选择入院48 h内、符合NRS2002标准、可获得BMI的病人200例。以BMI<18.5者计3分进行营养风险评分(NRS);对不完全符合NRS2002标准,不能获得BMI的54例病人,以ALB替代,ALB<30 g/L者计3分,来进行营养风险评分。NRS2002≥3分判定有营养风险,统计营养不良和有营养风险的发生率。结果:在符合NRS2002标准的病人中,营养风险发生率为38.0%。符合和不完全符合NRS2002标准的病人共254例,营养风险发生率为38.6%。BMI<18.5、ALB<30 g/L和PA<200 mg/L的病人,营养不良的发生率分别为9.0%、2.8%和29.1%。在BMI≥18.5病人中,NRS评分≥3分者占总调查病人的29%。农村和城市老年病人营养风险发生率分别为48.5%和32.5%,两者有显著性差异(P<0.05)。结论:心血管内科老年病人营养风险的发生率较高,应重视老年病人特别是农村老年病人营养风险的发生。NRS2002方法能预测和及时发现营养不良病人。

钙激动剂介导血管平滑肌细胞增殖的信号转导途径

为探讨钙调神经磷酸酶依赖的信号通路在雷尼丁剌激的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用 ,以培养的大鼠血管平滑肌细胞为模型 ,用雷尼丁剌激其内贮Ca2 + 释放入胞浆 ,环孢素A阻断钙调神经磷酸酶信号通路 ,维拉帕米阻断钙通道 ,检测血管平滑肌细胞钙调神经磷酸酶、丝裂素活化蛋白激酶和蛋白激酶C活性 ,用 3 H -亮氨酸及3 H -胸腺嘧啶掺入量作为反应细胞增殖的指标。结果显示 ,雷尼丁剌激组蛋白核酸合成速率明显增高 ,与对照组相比差异显著 (P <0 .0 1) ;环孢素A及维拉帕米能明显抑制雷尼丁介导的平滑肌细胞蛋白核酸合成速率增高 ,与雷尼丁剌激组相比差异显著 (P <0 .0 1)。同时发现雷尼丁剌激组钙调神经磷酸酶、蛋白激酶C活性与对照组平滑肌细胞相比差异显著 (P <0 .0 5或 0 .0 1)。环孢素A和维拉帕米抑制雷尼丁介导的平滑肌细胞钙调神经磷酸酶活性增高 ,维拉帕米抑制雷尼丁介导的平滑肌细胞蛋白激酶C活性的增高。提示钙调神经磷酸酶信号通路在雷尼丁剌激的平滑肌细胞增殖中起重要作用 ,但钙调神经磷酸酶信号通路不是雷尼丁介导平滑肌细胞增殖的唯一信号通路 ,以丝裂素活化蛋白激酶为核心的信号通路亦参与了雷尼丁剌激的平滑肌细胞增殖。

3种钙激动剂促培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的 :探讨不同来源的细胞内钙离子 ( [Ca2 +]i)对血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells,VSM Cs)丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)介导的增殖反应的作用。方法 :以培养的大鼠VSMCs为靶细胞 ,用血管紧张素II(AngⅡ )剌激VSMCs跨膜Ca2 +内流、三磷酸肌醇 (IP3)和雷尼丁 (RY)剌激胞内Ca2 +释放 ,[γ - 32 P]-ATP掺入法和免疫印迹 (Westernblot)测MAPK活性及蛋白含量 ,氚 -亮氨酸 ( [3H]-Leu)、氚 -胸腺嘧啶 ( [3H]-TdR)掺入量作为VSMCs增殖的指标。结果 :AngⅡ、IP3和RY均能显著增加VSMCs的 [Ca2 +]i浓度、MAPK活性及蛋白含量 ,并提高氚-亮氨酸 ( [3H]-Leu)、氚 -胸腺嘧啶 ( [3H]-TdR)掺入量 ,与对照组VSMCs相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :钙激动剂诱导的MAPK活性及含量的增加参与了VSMCs的增殖 ,VSMCs的肥大增殖与 [Ca2 +]i浓度增加有关 ,而与[Ca2 +]i的来源无关。

细胞内钙信号的变化调节血管平滑肌细胞增殖

目的探讨细胞内钙信号的变化对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖作用的影响及其对细胞内信号转导机制的变化。方法以培养的大鼠VSMC为模型,用雷尼丁(RY)剌激VSMC内贮Ca2+释放入胞浆,用3H亮氨酸及3H胸腺嘧啶掺入量作为反应VSMC增殖的指标,加入不同的细胞内信号转导阻断剂,观察对RY效应的影响。结果与对照组相比,RY浓度依赖性地促进细胞内游离钙浓度的增高,差异显著(P<0.05或0.01)。RY剌激组蛋白核酸合成速率明显增高,与对照组相比差异显著(P<0.01);尼卡地平(Nicardipine),蛋白激酶C抑制剂(H7),钙调素激酶(CaMPK)抑制剂(W7)和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂(PD98059)能明显抑制RY介导的VSMC蛋白核酸合成速率增高,与RY剌激组相比差异显著(P<0.01)。结论细胞内钙信号的变化明显促进VSMC增殖,但其效应可能通过Ca2+、PKC、MAPK来介导。钙离子拮抗剂可抑制血管平滑肌细胞增殖。

血管紧张素1-7抑制血管外膜成纤维细胞增殖

目的 探讨血管紧张素1 -7对血管外膜成纤维细胞增殖的影响。方法 在培养大鼠血管外膜成纤维细胞中,用血管紧张素Ⅱ和血管紧张素1 7刺激,检测蛋白激酶C、丝裂素活化蛋白激酶及钙调神经磷酸酶活性,以氚标胸腺嘧啶和氚标亮氨酸掺入量反映血管外膜成纤维细胞增殖的指标。结果 血管紧张素1 -7既能明显抑制基础状态下血管外膜成纤维细胞蛋白激酶C、丝裂素活化蛋白激酶和钙调神经磷酸酶活性(P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,又能抑制血管紧张素Ⅱ刺激下的血管外膜成纤维细胞蛋白激酶C、丝裂素活化蛋白激酶和钙调神经磷酸酶活性(P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。血管紧张素1 7能明显抑制血管外膜成纤维细胞氚标胸腺嘧啶和氚标亮氨酸掺入(P <0 .0 1或P<0 .0 5 ) ;而血管紧张素Ⅱ则促进血管外膜成纤维细胞氚标胸腺嘧啶和氚标亮氨酸掺入(P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。血管紧张素1- 7还能抑制血管紧张素Ⅱ刺激下的血管外膜成纤维细胞氚标胸腺嘧啶和氚标亮氨酸掺入(P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。结论 血管紧张素1- 7可能通过影响蛋白激酶C、丝裂素活化蛋白激酶和钙调神经磷酸酶信号通路,发挥抑制血管外膜成纤维细胞增殖的作用。

压力负荷下血管紧张素Ⅱ对心肌基质金属蛋白酶和纤连蛋白的影响

目的探讨压力负荷下心肌组织基质金属蛋白酶家族(MMPs)MMP-2、3、9与其抑制物-1(TIMP-1)的变化,及血管紧张素受体拮抗剂对MMP-2、3、9、TIMP-1及细胞外基质纤连蛋白(fibronectin,FN)的影响。方法腹主动脉缩窄法建立大鼠超压力负荷模型,实验动物分为手术组(n=8);缬沙坦(val-sartan)组(n=8):手术组+缬沙坦(1 mg/kg.d);PD123319组(n=8):手术+PD123319(30 mg/kg.d)组;假手术组(n=8)。免疫沉淀法检测心肌组织MMP-2、3、9及TIMP-1,免疫荧光检测FN分布。结果大鼠术后14 d,缬沙坦组血浆AngⅡ浓度显著高于假手术组及PD123319组(P<0.05),缬沙坦组心肌AngⅡ浓度则低于假手术组及PD123319组(P<0.05)。手术组MMP-2、3、9蛋白表达显著高于假手术组(P<0.01),手术组TIMP-1、FN蛋白表达显著低于假手术组(P<0.01);缬沙坦组MMP-2、3、9显著低于手术组及PD123319组(P<0.05),缬沙坦组TIMP-1、FN显著高于手术组及PD123319组(P<0.05)。MMP-2、3、9、TIMP-1及FN蛋白表达在手术组与PD123319组间差异没有显著性(P>0.05)。结论超压力负荷下,心肌组织MMP-2、3、9表达量的增高,细胞外基质FN,参与心肌重构的病理过程,主要通过AT1起作用。

转染血管紧张素Ⅱ1型受体反义核苷酸对血管外膜成纤维细胞增殖的影响

为了评价转染血管紧张素Ⅱ 1型受体反义核苷酸对血管外膜成纤维细胞血管紧张素Ⅱ受体亚型mRNA表达 ,及细胞内核酸蛋白质的合成水平的作用。采用逆转录—聚合酶链反应克隆血管紧张素Ⅱ 1型受体cDNA序列 (476bp) ,将克隆cDNA反向插入PLXSN ,构建一完整的含血管紧张素Ⅱ 1型受体的质粒 ,并转染入培养的血管外膜成纤维细胞 ,逆转录—聚合酶链反应和免疫印迹鉴定其转染后血管紧张素Ⅱ 1型受体mRNA和蛋白表达。比较血管紧张素Ⅱ 10 7mol/L刺激 2 4h后的转染及非转染的血管外膜成纤维细胞血管素Ⅱ受体各亚型mRNA表达、细胞内核酸蛋白质的合成水平。转染组血管紧张素Ⅱ 1型受体mRNA和蛋白表达量显著减少 ,对照组相比差异显著(P <0 .0 1)。血管紧张素Ⅱ 10 7mol/L刺激 2 4h后 ,与对照组血管外膜成纤维细胞相比 ,转染组血管紧张素Ⅱ 1型受体mRNA表达明显减少 ,血管紧张素Ⅱ受体Ⅱ型mRNA表达明显增加 (P <0 .0 1) ,但两组间核酸和蛋白合成均无显著差异 (P >0 .0 5 )。提示反义核苷酸封闭后 ,血管外膜成纤维细胞血管紧张素Ⅱ 1型受体mRNA表达显著抑制 ,同时血管紧张素Ⅱ受体Ⅱ型mRNA上调。单纯封闭血管紧张素Ⅱ 1型受体mRNA并不能有效阻断血管紧张素Ⅱ介导的血管外膜成纤维细胞生长。

血管紧张素Ⅱ介导心肌成纤维细胞增殖的信号转导

目的探讨钙调神经磷酸酶（ＣａＮ）依赖的信号通路在血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）刺激的乳鼠心肌成纤维细胞（ＦＢｓ）增殖中的作用。方法以培养的ＦＢｓ为模型，用ＡｎｇⅡ刺激ＦＢｓ外Ｃａ２＋入流，环抱素Ａ（ＣｓＡ）阻断ＣａＮ信号通路，维拉帕米（Ｖｅｒ）阻断ＦＢｓ钙通道，检测ＦＢｓ ＣａＮ、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）、蛋白激酶 Ｃ（ＰＫＣ）活性，用［３Ｈ］－亮氨酸及［３Ｈ］－胸腺嘧啶参入量作为反应 ＦＢｓ增殖的指标。结果Ａｕｇ Ⅱ刺激组ＦＢｓ蛋白核酸合成速率明显增高，与对照组相比差异有显著性（Ｐ＜０．０１）；ＣｓＡ及Ｖｅｒ能明显抑制Ａｎｇ Ⅱ介导的ＦＢｓ蛋白核酸合成速率增高，与ＡｎｇⅡ血刺激组相比差异有显著性（ Ｐ＜ ０． ０１）。同时发现 Ａｎｇ Ⅱ刺激组 ＣａＮ、ＰＫＣ活性与对照 ＦＢｓ相比差异有显著性（ Ｐ＜ ０． ０５或 Ｐ＜０．０１）。 ＣｓＡ和Ｖｅｒ抑制ＡｎｇⅡ介导的 ＦＢｓ ＣａＮ活性增高，Ｖｅｒ抑制Ａｎｇ Ⅱ介导的ＦＢｓＰＫＣ活性的增高。结论 ＣａＮ信号通路在ＡｎｇⅡ刺激的ＦＢｓ增殖中起重要作用，但ＣａＮ信号通路不是ＡｎｇⅡ介导ＦＢｓ的增殖的唯一信号通路，以ＭＡＰＫ为核心的信号通路亦参与了ＡｎｇⅡ刺激的ＦＢｓ增殖。

钙调神经磷酸酶信号通路参与钙激动剂介导的心肌细胞肥大

目的 :在于探讨不同来源的细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)对钙调神经磷酸酶 (calcineurin ,CaN)依赖信号通路和心肌细胞肥大的影响。方法 :以原代培养的乳鼠心肌细胞为模型 ,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、雷尼丁 (RY)和三磷酸肌醇 (IP3 ) (浓度均为 10 - 7mol/L)激活心肌细胞 [Ca2 + ]i,应用钙荧光指剂Fura 2 /AM动态观测心肌细胞 [Ca2 + ]i浓度 ,同时检测心肌细胞CaN活性及蛋白表达。用氚 亮氨酸 (3 H Leu)掺入量测定心肌细胞蛋白质合成速率。结果 :发现AngⅡ、RY和IP3明显增加心肌细胞 [Ca2 + ]i浓度、CaN活性及蛋白表达并提高3 H Leu的掺入量 ,与对照组心肌细胞相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :激活心肌细胞 [Ca2 + ]i可明显提高心肌细胞蛋白合成速率 ,心肌细胞CaN活性及蛋白表达似与细胞[Ca2 + ]i变化有明显关系而与其来源无关 。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期病人体质指数与临床结局的关系研究

目的:探讨体质指数(BMI)与慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)病人临床结局的关系。方法:计算177例AECOPD病人的BMI,并进行不同BMI组间AECOPD病人血气指标分析、BMI与机械通气关系分析、BMI与病情转归关系分析和BMI与住院时间(LOS)的相关性分析。结果:低BMI组(BMI<18.5)、正常BMI组(BMI 18.5～23.9)以及高BMI组(BMI>24.0)组间病人PCO2值和PO2/PCO2值均有显著性差异(P=0.032,P=0.024)。多重比较显示,低BMI组病人的PCO2值较正常BMI组高(P=0.020),而PO2/PCO2值和pH值低于正常BMI组(P=0.013,P=0.027)。低BMI组病人实施机械通气的概率比(OR)为正常BMI组的6.015倍。采用年龄分层卡方检验显示,低BMI组中年龄≥70岁的病人死亡OR为正常BMI组的4.06倍,<70岁病人死亡率未显示BMI与死亡率之间的相关性。排除年龄因素,BMI与LOS呈负相关关系(r=-0.165,P=0.038)。结论:低BMI可能导致AECOPD病人机械通气概率增高、住院时间延长、病死率升高等不良临床结局。

基质金属蛋白酶及其抑制物-1与左心室重构的关系

目的探讨基质金属蛋白酶家族(MM P s)2、3、9及其抑制物-1(T IM P-1)与心衰患者心肌重构、心功能损害的关系。方法选择因二尖瓣关闭不全心脏病接受二尖瓣置换术的慢性充血性心力衰竭(CHF)患者39例,其中心功能Ⅱ级12例,Ⅲ级15例,Ⅳ级12例。正常对照38例(8例来自意外伤亡的器官捐献者)。彩色多普勒超声心动图检测心功能参数,免疫沉淀法检测心肌组织MM P-2、3、9及T IM P-1蛋白表达。结果瓣膜病所致心力衰竭患者心肌组织呈心肌重构的病理改变;心衰患者心肌组织MM P-2、3、9表达较正常人高,且随着心功能的恶化,其蛋白含量相对增高(P<0.05或0.01);T IM P-1则相反。结论MM P-2、3、9表达量的增高及T IM P-1的降低参与了心肌重构的病理过程,是影响心衰患者心功能的重要因素之一。

缬沙坦对压力负荷心肌肥大钙调神经磷酸酶(CaN)通路的作用

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体(AngⅡ,AT1及AT2)拮抗剂对致心肌肥厚的钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路的影响。方法腹主动脉缩窄法建立大鼠压力负荷模型,实验动物分为手术组(n=8);缬沙坦组(n=8):手术组+缬沙坦(1mg/kg·d);PD123319(AT2R受体拮抗剂)组(n=8):手术组+PD123319(30mg/kg·d);假手术组(n=8)。放射免疫法检测血浆、心肌AngⅡ浓度,免疫沉淀法检测心肌钙蛋白酶(ucalpain,mcalpain)及CaN蛋白表达及其磷酸化。结果缬沙坦组血浆AngⅡ浓度显著高于假手术组及PD123319组(P<0.05),缬沙坦组心肌AngⅡ浓度则低于假手术照组及PD123319组(P<0.05)。手术组ucalpain蛋白表达显著高于假手术组(P<0.01),缬沙坦组显著低于手术组及PD123319组(P<0.05),手术组与PD123319组间差异没有显著性(P>0.05)。手术组CaN磷酸化显著高于假手术组(P<0.01),缬沙坦组显著低于手术组及PD123319组(P<0.05),手术组与PD123319组间差异没有显著性(P>0.05)。结论ucalpain参与激活高压力负荷下心肌组织CaN通路,ucalpain的上调通过AT1起作用,AT1受体拮抗剂的心脏保护作用与其抑制了m-calpain有关。

钙调神经磷酸信号通路参与心肌成纤维细胞的增殖

目的 :探讨钙调神经磷酸酶 (Ca N)依赖的信号通路在三磷酸肌醇 (IP3 )刺激的乳鼠心肌成纤维细胞 (FBs)增殖中的作用。方法 :以培养的 FBs为模型 ,用 IP3 刺激 FBs内 Ca2 +释放 ,环孢素 A(Cs A)阻断 Ca N,维拉帕米 (Ver)阻断 FBs钙通道 ,检测 FBs Ca N、丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK )、蛋白激酶 C(PKC)活性 ,用 3 H-亮氨酸及 3 H-胸腺嘧啶掺入量作为反映 FBs增殖的指标。结果 :IP3 刺激组 FBs蛋白核酸合成速率明显增高 ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 1) ;Cs A及 Ver能明显抑制 IP3 介导的 FBs蛋白核酸合成速率增高 ,与 IP3 刺激组相比差异显著 (P<0 .0 1)。同时发现 IP3 刺激组 Ca N、PKC活性与对照 FBs相比差异显著 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。 Cs A和 Ver抑制 IP3 介导的FBs Ca N活性增高 ,Ver抑制 IP3 介导的 FBs PKC活性的增高。结论 :Ca N在 IP3 刺激的 FBs增殖中起重要作用 ,其它信号通路可能也参与了 IP3 刺激的

转染bcl-2基因对心肌细胞缺氧耐受性的影响

目的 探讨转染bcl 2基因能否提高心肌细胞对缺氧的耐受性。方法 ①重组真核细胞表达载体 :将含编码人bcl 2cDNA完整开放阅读框的bcl 2cDNA重组至逆转录病毒载体 pLXSN的EcoRⅠ位点上 ,用脂质体包裹重组质粒导入PA317细胞株 ,并经G4 18筛选阳性克隆 ;②用含高滴度重组病毒的上清感染心肌细胞 ,原位杂交鉴定其转染是否成功 ;③观察转染心肌细胞在缺氧环境下的生存率。结果 ①重组了含bcl 2的真核细胞表达质粒 ;②转染bcl 2基因能明显提高心肌细胞对缺氧的耐受能力。结论 转染bcl 2基因能显著提高心肌细胞在缺氧环境下的存活能力。

压力负荷下缬沙坦对钙调神经磷酸酶介导心肌肥大通路的影响

目的 :探讨压力超负荷模型下血管紧张素 ( Ang )受体拮抗剂缬沙坦对钙调神经磷酸酶 ( Ca N)介导心肌肥大通路的影响及 Ang 的致心肌肥厚作用。方法 :腹主动脉缩窄法建立大鼠压力超负荷模型 ,放射免疫法检测血浆、心肌 Ang 浓度 ,Western Blot检测心肌 Ca N,活化 T细胞核因子 ( NFAT3 )蛋白表达 ,发色底物法检测 Ca N比活性 ,并测定左室重量指数。结果 :缬沙坦组血浆 Ang 浓度高于对照组 ( P<0 .0 5 ) ,心肌 Ang 浓度则相反 ( P<0 .0 5 ) ,缬沙坦组 Ca N表达及活性低于对照组 ( P<0 .0 1) ,NFAT3 表达低于对照组 ( P<0 .0 5 ) ,两组各项指标与假手术组相比均差异显著。结论 :Ang 参与激活压力负荷下钙调神经磷酸酶通路 。

超压力负荷左心室心肌β受体相关信号通路的变化

目的探讨超压力负荷左心室心肌β1受体、β2受体和β3受体mRNA表达及钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)通路的变化,及美托洛尔改善心肌重构的机制。方法用腹主动脉缩窄法建立大鼠超压力负荷模型,手术组、美托洛尔组及假手术组各10只。用免疫沉淀法检测左心室心肌CaN、活化T细胞核因子(nuclear factor-3 of activated T cells,NFAT3)、锌指转录因子4(zinc finger transcription factor-4,GATA4)磷酸化及蛋白表达以及原癌基因c-myc蛋白表达。结果大鼠术后14d左心室明显肥厚,手术组β1受体mRNA表达较假手术组明显减少(P<0.01),美托洛尔组β1受体mRNA表达明显回升,美托洛尔组与手术组差异有统计学意义(P<0.01);各组间β2受体mRNA表达差异无统计学意义;手术组β3受体mRNA表达较假手术组增加,美托洛尔组与手术组相比差异无统计学意义,与假手术组相比。CaN、GATA4磷酸化增强、c-myc蛋白表达增加(P<0.01),NFAT3磷酸化减弱,美托洛尔明显改善左心室肥厚。结论美托洛尔能明显改善左心室肥厚,其作用机制可能与抑制了CaN信号通路有关。

钙蛋白酶参与压力超负荷下肥厚心肌的信号调控机制探讨

目的探讨压力超负荷下,血管紧张素受体(AT1及AT2)拮抗剂对肥厚心肌组织中钙敏感的钙蛋白酶系统的信号调节。方法采用腹主动脉缩窄法建立大鼠压力超负荷模型,实验动物分为手术组、手术+缬沙坦(valsartan,1mg/kg.d)组、手术+PD123319(30mg/kg.d)组和假手术组,每组大鼠10只。免疫沉淀法检测大鼠左室间隔心肌组织钙蛋白酶系统(calpains)、钙调神经磷酸酶(CaN)及其抑制蛋白(cain/cabin1)的表达、CaN磷酸化。RT-PCR检测大鼠室间隔心肌组织肌球蛋白(β-MHC)mRNA表达。结果手术后14d,valsartan组大鼠血浆Ang浓度高于假手术组及PD123319组(P<0.05),valsartan组心肌Ang浓度则低于假手术照组及PD123319组(P<0.05)。手术组大鼠左室间隔心肌组织u-calpain蛋白表达、CaN磷酸化、β-MHCmRNA表达高于假手术组(P<0.01)。手术组大鼠左室间隔心肌组织cain/cabin1蛋白表达低于假手术组(P<0.01);valsartan组大鼠心肌u-calpain蛋白表达、CaN磷酸化、β-MHCmRNA表达显著低于手术组及PD123319组(P<0.05),valsartan组cain/cabin1高于手术组及PD123319组(P<0.05),u-calpain蛋白表达及CaN磷酸化、cain/cabin1蛋白表达及β-MHCmRNA表达手术组与PD123319组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论压力超负荷下,心肌组织中的calpain降解cain/cabin1,进而激活CaN信号通路,参与心肌肥厚的病理过程,主要通过AT1起作用。

HOE642对缺氧/复氧心肌细胞的保护机制

目的观察Na+/H+交换抑制剂HOE642对心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的保护作用,方法原代培养的心肌细胞分为对照组、A/R组、A/R+HOE642组、A/R+尼卡地平(Nic)组、A/R+蛋白激酶(PKC)阻滞剂(H7)组和A/R+丝裂元活化蛋白激酶(MAPK)阻滞剂(PD98059)组。检测各组心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)、细胞活力、ATP含量及孵育液中乳酸脱氢酶(LDH)含量、MAPK和PKC活性。免疫印迹法检测心肌细胞钙蛋白酶(u-calpain和m-calpain)。结果A/R+Nic、A/R+HOE642使心肌细胞[Ca2+]i降低,且m-calpain蛋白表达亦降低。A/R+Nic、A/R+HOE642组心肌细胞孵育液中心肌激酶(LDH、CK)均低于A/R组(P<0.01);细胞活力、ATP含量、PKC和MAPK活性高于A/R组(P<0.05或P<0.01)。PKC抑制剂H7及MAPK抑制剂PD98059组心肌细胞孵育液中心肌激酶(LDH、CK)均高于A/R组(P<0.05),细胞活力、ATP含量明显低于A/R组(P<0.05)。结论HOE642与钙通道阻滞剂一样,可抑制心肌细胞内游离钙超载引起的心肌细胞A/R损伤,阻断PKC和MAPK,使A/R的心肌细胞损伤加剧。

缺氧对乳鼠心肌细胞的损伤作用研究

目的 探讨缺氧对心肌细胞的损伤作用及其机制。方法 原代培养乳鼠心肌细胞 ,使其缺氧 5、10、2 0和 30分钟 ,分别检测各时相组心肌细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)、ATP含量以及孵育液中 L DH含量 ;用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率 ;台盼蓝染色检测细胞活力 ;原位杂交检测 bcl- 2基因表达。结果 各缺氧组心肌细胞 [Ca2 + ]i、孵育液 L DH含量、凋亡率及活力明显增加 ,ATP含量明显降低 ,缺氧 10分钟组心肌细胞 bcl- 2 m RNA表达明显降低 ,与对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 1)。结论 缺氧可引起乳鼠心肌细胞严重受损 ,bcl-