重症急性胰腺炎病程后期残余脓肿的微创治疗

目的观察微创治疗重症急性胰腺炎病程后期残余脓肿的效果。方法选取16例重症急性胰腺炎病程后期发生残余脓肿的患者,首先在B超引导下行经皮穿刺置管引流,3～5d后拔除引流管,用扩皮器将其窦道适当扩开后,再放置一粗引流管进行引流。再经1周后拔除粗引流管,用胆道镜深入感染灶内进行清创。观察并记录患者治疗前后的体温、血象等变化情况。结果全部患者腹膜后和(或)腹腔内残余脓肿均得到有效治疗。随着对脓肿的充分引流及胆道镜反复清创,患者体温及血象逐渐降至正常,动态CT或B超检查显示脓肿范围逐渐缩小直至完全消失。全部患者均痊愈出院。结论采用超声引导穿刺置管引流结合胆道镜清创治疗重症急性胰腺炎病程后期的残余脓肿,方法简单,临床效果可靠。

高压氧对模拟高原急性缺氧条件下脓毒症大鼠肝损伤的保护作用

目的观察高压氧(HBO)对模拟高原急性缺氧条件下脓毒症(SEP)大鼠肝损伤的保护作用。方法 56只雄性SD大鼠,随机选取40只,于低压氧舱中模拟海拔5000m高原环境3d,建立急性缺氧模型,随机分为:高原对照组,高原SEP组,高原SEP+HBO组,高原SEP+头孢吡肟(CEF)组,高原SEP+HBO+CEF组,每组8只。除高原对照组行假手术处理外,其余各高原组均行盲肠结扎穿孔术(CLP)建立SEP大鼠模型,CLP后分别行HBO(2个绝对大气压)或(和)CEF(50mg/kg,腹腔注射)处理。剩余16只大鼠,在平原条件下随机分为平原对照组和平原SEP组,每组8只。各组均在建模24h后径心脏取血后处死,分别取肝组织测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性并检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,光镜下观察肝脏组织学变化。结果与平原对照组(ALT 57.0±6.7U/L,AST 194.6±8.0U/L,MDA 0.95±0.13nmol/mg prot,SOD 74.1±7.8U/mg prot)比较,高原对照组(ALT 76.5±12.2U/L,AST 204.4±11.5U/L,MDA 1.18±0.11nmol/mg prot,SOD 59.5±6.6U/mg prot)的ALT、MDA含量明显升高(P<0.05)。与平原SEP组(ALT 103.6±5.8U/L,AST 218.6±11.0U/L,MDA 1.38±0.14nmol/mgprot,SOD 55.5±6.4U/mg prot)比较,高原SEP组(ALT 142.8±7.2U/L,AST 307.5±11.3U/L,MDA 1.75±0.21nmol/mg prot,SOD 44.5±4.4U/mg prot)的ALT、AST水平及MDA含量均明显升高,SOD活性明显降低(P<0.05);与高原SEP组比较,高原SEP+HBO+CEF组(ALT 81.1±14.2U/L,AST 214.2±16.3U/L,MDA 1.23±0.13nmol/mg prot,SOD 72.4±5.7U/mg prot)中ALT、AST、MDA含量升高,SOD活性下降明显(P<0.05),但高原SEP+HBO组与高原SEP组之间无显著性差异。HE染色观察,各SEP组均可见肝细胞浊肿变性,部分呈空泡样变,伴大量炎性细胞浸润,以高原SEP组肝细胞变性及炎细胞浸润最为明显;各处理组中,高原SEP+HBO组与高原SEP组相比,肝细胞变性及炎细胞浸润改变不明显,高原SEP+CEF+HBO组肝细胞浊肿及炎性细胞浸润减轻最为明显。结论在模拟高原急性缺氧条件下,可加重SEP大鼠的肝损伤;HBO能改善缺氧条件下SEP大鼠的氧化应激损伤,减轻其肝组织的炎症损伤。

胃转流术对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制探讨

目的观察胃转流术对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏的保护作用,并探讨其可能机制。方法 40只SD大鼠随机分为正常对照组(n=8)和糖尿病模型组(n=32),模型组注射STZ(35mg/kg),血糖稳定后确定成模30只,再将其分为糖尿病对照组(n=8)、假手术组(n=8)、手术组(n=14)。手术组大鼠行Roux-en-Y胃转流术。术后8周检测各组大鼠空腹血糖、肾重指数(肾重/体重)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)水平,肾组织总超氧化物歧化酶(TSOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)活性及脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)含量,肾组织醛糖还原酶(AR)活性及AR mRNA的表达,并行HE染色观察肾组织病理变化。结果与正常对照组比较,糖尿病对照组和假手术组大鼠空腹血糖、肾重指数明显升高,肾功能相关指标BUN、Cr亦显著升高(P<0.05),肾组织TSOD、GSH-PX活性低下,MDA含量增加(P<0.05),肾脏AR活性增强,AR mRNA表达增加(P<0.05)。与糖尿病对照组和假手术组相比,手术组大鼠空腹血糖、肾重指数、BUN、Cr均明显降低(P<0.05),同时肾组织TSOD、GSH-PX活性增强,MDA含量减少(P<0.05),肾脏AR活性降低,AR mRNA表达下调(P<0.05)。HE染色显示正常对照组肾组织病理结构无异常,糖尿病对照组和假手术组肾小球明显增大,系膜明显增生,系膜区扩张,手术组病变明显轻于糖尿病对照组和假手术组。结论胃转流术可能通过减轻肾脏氧化应激损伤,抑制肾脏AR活性及AR mRNA表达而抑制多元醇通路的过度激活,从而发挥肾脏保护作用。

早期生长反应基因-1在大鼠急性胰腺炎合并肺损伤中的作用

目的探讨早期生长反应基因-1(EGR-1)在急性胰腺炎(AP)合并肺损伤中的作用。方法将24只雄性Wistar大鼠随机均分为4组,分别于胆管内逆行注入生理盐水或不同浓度牛磺胆酸钠溶液,3h后处死动物,留取血清、胰腺及肺组织。检测血清TNF-α、IL-1β水平,进行胰腺组织病理评分,测定肺组织湿重/干重比,并对肺组织进行EGR-1免疫组化染色。另将原代培养的肺泡巨噬细胞(AM)分别采用不同浓度胰弹性蛋白酶进行刺激,通过免疫细胞化学染色检测EGR-1在AM的表达,并检测培养液中TNF-α、IL-1β的浓度。结果肺组织免疫组化染色显示,EGR-1表达随AP病情加重而增强,并与TNF-α、IL-1β、胰腺组织病理评分及肺组织湿重/干重比均呈显著正相关,且表达细胞类型也有所不同。AM表达EGR-1程度与培养液TNF-比、IL-1β水平呈显著正相关,EGR-1在AM中的表达有ERK1/2信号途径的参与。结论EGR-1可能在AP合并肺损伤中起重要作用,其机制可能与其介导炎性细胞因子生成有关。

表皮生长因子改善移植小肠黏膜屏障功能的实验研究

目的了解表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)对移植小肠通透性及细菌易位的作用。方法以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体行异位全小肠移植,并以环孢素A(CsA,6mg.kg-1.d-1,im)抑制排斥反应。表皮生长因子组(EGF组)用微量输液泵持续均匀输入EGF200μg.kg-1.d-1;对照组输入等量生理盐水。第7天以乳果糖及甘露醇行移植肠灌注并收集尿液行高效液相色谱仪分析乳果糖及甘露醇含量,第8天采集移植肠系膜淋巴结及门静脉血行细菌培养。结果对照组尿液中乳果糖含量[(0.093±0.008)vs(0.015±0.002),P=0.0001]及乳果糖/甘露醇比值[(0.132±0.021)vs(0.020±0.005),P=0.0001]明显高于基准,EGF组乳果糖含量[(0.043±0.008)vs(0.015±0.002),P=0.0054]及乳果糖/甘露醇比值[(0.060±0.017)vs(0.020±0.005),P=0.0029]也较基准增加,EGF组乳果糖含量[(0.043±0.008)vs(0.093±0.008),P=0.0067)及乳果糖/甘露醇比值[(0.060±0.017)vs(0.132±0.021),P=0.0116]显著低于对照组。EGF组移植肠系膜淋巴结细菌阳性率为10%,对照组阳性率为60%,明显高于EGF组(P=0.028)。EGF组与对照组门静脉血培养阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究提示EGF能够降低同种移植小肠的通透性及细菌易位率,改善肠黏膜屏障功能。

1,6-二磷酸果糖对大鼠肝脏创伤救治的影响及其作用机制

目的观察1,6-二磷酸果糖(FDP)在大鼠肝脏创伤救治中的作用并探讨其可能的机制。方法选取健康SD大鼠49只,建立肝脏撞击破裂伤模型。先取42只建模后大鼠,随机分为对照组、葡萄糖组、FDP组(n=14),分别于致伤10min后静脉注射0.9%氯化钠、5%葡萄糖及15%FDP注射液2ml(均在10min内静注完),各组再按处死取材时相点随机均分为缺血前和再灌注4h两个亚组(n=7)。剩余7只建模后大鼠为再灌注4h假手术组。测定各组动物外周血谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平,肝组织丙二醛(MDA)、糖原含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果在缺血前时相点,肝糖原含量对照组<葡萄糖组<FDP组(P<0.05),余各指标各组间比较无显著差异。与缺血前比较,再灌注4h时相点各组肝糖原含量均明显降低,除假手术组外,各组外周血ALT、AST水平及肝组织MDA含量均明显增高,肝组织SOD活性均明显降低(P<0.01)。再灌注4h时相点,外周血ALT水平对照组>葡萄糖组>FDP组>假手术组(P<0.01或P<0.05),AST水平对照组>葡萄糖组/FDP组>假手术组(P<0.01或P<0.05),FDP组与葡萄糖组比较无显著差异;肝组织SOD活性对照组<葡萄糖组<FDP组<假手术组(P<0.01或P<0.05),MDA含量对照组>葡萄糖组>FDP组>假手术组(P<0.01或P<0.05)。结论与葡萄糖比较,FDP对大鼠肝脏撞击破裂伤有更好的保护作用,其机制可能为在应激条件下肝脏能更有效地以FDP为底物合成糖原,增加肝脏缺血前糖原贮备,从而减轻肝脏创伤救治中的热缺血再灌注损伤。

GSK-3抑制剂对大鼠肝脏创伤的保护作用

目的探讨糖原合成酶激酶-3（glycogen synthase kinase-3，GSK-3）抑制剂和葡萄糖联合应用对大鼠肝脏创伤救治的影响及其机制。方法健康SD大鼠49只，全部建立大鼠肝脏撞击破裂伤模型。先取42只建模大鼠随机分为三组，即对照组（氯化钠组）、葡萄糖组、GGI组（葡萄糖＋GSK-3抑制剂联合应用组）（n=14）。各组再随机分为缺血前和再灌注4h两个亚组（n=7）。剩余7只建模大鼠为再灌注4b假手术组。测定各组外周血中AST及ALT含量、肝组织糖原及ATP含量、Ca^2＋ -ATP酶活性及Ca^2＋浓度。结果与缺血前比较，再灌注4h各组肝糖原和ATP含量均明显降低（P〈0.01）；而除假手术组外，各组外周血ALT、AST水平及肝组织Ca^2＋浓度均明显增高，肝组织Ca^2＋ -ATP酶活性均明显降低（P〈0.01）。缺血前，肝组织糖原含量：对照组〈葡萄糖组〈GGI组（P〈0.01）；ATP含量：对照组〈葡萄糖组／GGI组（P〈0.01或P〈0.05），葡萄糖组和GGI组间差异均无统计学意义；余指标差异无统计学意义。再灌注4h，肝脏糖原含量：对照组／葡萄糖组〈GGI组〈假手术组（P〈0.01），对照组和葡萄糖组间差异无统计学意义；外周血ALT、AST含量和肝脏组织Ca^2＋浓度：对照组〉葡萄糖组〉GGI组〉假手术组（P〈0.01或P〈0.05）；肝脏组织ATP含量和Ca^2＋ -ATP酶活性：对照组〈葡萄糖组〈GGI组〈假手术组（P〈0.01或P〈0.05）。结论联合应用GSK-3抑制剂和葡萄糖能加强葡萄糖对大鼠肝脏撞击破裂伤的保护作用，其机制可能与GSK-3抑制剂能在肝脏缺血前有效地增强肝脏以葡萄糖为底物的糖原合成作用，短时间内快速地提高肝糖原贮备，从而减轻大鼠创伤后肝脏的热缺血／再灌注损伤。

肝细胞生长因子对大鼠移植小肠粘膜结构的保护作用

目的 探讨肝细胞生长因子 (HGF)对大鼠移植小肠粘膜结构的保护作用。方法 近交系Wistar (RT1k)大鼠行异位全小肠移植后第 2天开始给予肠外营养至第 10天 ,对照组 (n =10 )行常规TPN支持 ,HGF组 (n =10 )行常规TPN支持的同时加用人胎肝细胞生长因子 15 0 μg/ (kg·d) ,观察移植肠粘膜结构的形态学参数如绒毛高度、绒毛宽度、隐窝深度、粘膜厚度及绒毛表面积的变化 ,以及移植肠上皮细胞超微结构变化及移植肠粘膜蛋白质和DNA含量的改变。结果 移植前两组肠粘膜形态学参数差异无显著性意义 ,行移植及TPN后对照组各参数较移植前明显减小 (P<0 .0 5 ) ;而HGF组各参数与移植前比较变化不明显 (P>0 .0 5 ) ,但明显高于对照组 ,分别是绒毛高度为 ( 2 98.79± 2 2 .3 1) μmvs ( 176.45± 14 .62 ) μm ,P=0 .0 0 1;绒毛宽度为 ( 10 7.46± 12 .3 4) μmvs ( 74.2 0± 16.85 ) μm ,P =0 .0 0 4;隐窝深度为 ( 10 4.5 6± 11.17) μmvs ( 74.45± 8.3 4)μm ,P =0 .0 0 0 5 ;粘膜厚度为 ( 4 0 9.5 3± 3 5 .83 ) μmvs( 2 5 9.3 8± 2 4.65 ) μm ,P =0 .0 0 3 ;绒毛表面积为 ( 0 .10 1± 0 .0 11)mm2 vs ( 0 .0 41± 0 .0 0 5 )mm2 ,P =0 .0 0 1。HGF组蛋白质含量明显高于对照组 (P =0 .0 12 )

胃转流术对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激及蛋白激酶C活性的影响

目的观察胃转流术对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激及蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法40只SD大鼠随机分为正常对照组(8只),糖尿病模型组(32只),模型组注射STZ(35 mg/kg),血糖稳定后确定成模30只,再将其分为糖尿病对照组(8只),假手术组(8只),手术组(14只)。术后8周检测各组大鼠空腹血糖、肾重指数(肾重/体重)、尿素氮(BuN)、血肌酐(Cr),测定各组大鼠肾组织总超氧化物歧化酶(TSOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSHPX)活性,脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)含量及PKC的活性,HE染色观察肾组织病理变化。结果与糖尿病对照组和假手术组相比,手术组能明显降低空腹血糖、改善肾重指数、BUN、Cr等指标(P<0.05),同时肾组织抗氧化酶TSOD、GSH-PX活性增强,MDA含量减少,肾脏PKC活性降低(P<O.05)。HE染色显示手术组病变也明显轻于糖尿病对照组和假手术组。结论胃转流术可能通过抑制2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激及PKC活性增强发挥肾脏保护作用。