Notch信号通路介导血小板源生长因子AA诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移

目的探讨Notch信号通路在血小板源生长因子AA（PDGF-AA）诱导血管平滑肌细胞（VSMC）增殖和迁移中的作用及机制。方法脱臼处死1～2月龄雄性SD大鼠,无菌取腹主动脉,剥弃外膜及去除内皮后,贴块法培养VSMC,α-SM-actin染色鉴定。实验分为四组：对照组、γ-secretase抑制剂组（DAPT组）、PDGF-AA组和PDGFAA＋γ-secretase抑制剂组（PDGF-AA＋DAPT组）。实时荧光定量PCR（Real-time q PCR）检测Notch信号分子mRNA表达;Cell Titer96 Aqueous One Solution试剂盒检测细胞增殖活性;采用细胞划痕实验检测VSMC的迁移能力。结果腹主动脉VSMC表达Notch信号通路Jagged1、Jagged2、Notch1～3等几种主要的配体及受体;PDGF-AA刺激24h和48 h后分别导致Jagged2和Jagged1 mRNA表达显著增强（P〈0.01,n=4）;与0 h相比,PDGF-AA刺激72 h后,Notch1、Notch3 mRNA表达显著增高（P〈0.01,n=4）,而刺激24 h后Notch2 mRNA表达显著降低。PDGF-AA显著促进HES1（P〈0.05,n=4）、HEY2（P〈0.05,n=4）和转录因子Rbp-jКmRNA（P〈0.05,n=4）表达,DAPT抑制PDGF-AA介导的HES1、HEY2 mRNA表达增强（P〈0.01,n=4）,但是进一步促进PDGF-AA诱导的Rbp-jКmRNA表达（P〈0.05,n=4）;PDGF-AA刺激促进VSMC增殖（P〈0.01,n=5）和减少划痕余留面积（P〈0.01,n=4）,两种效应均可被DAPT显著阻抑（P〈0.01,n=4）。结论 PDGF-AA调节了VSMC Notch信号分子表达,PDGF-AA部分通过激活Notch信号通路调节VSMC的增殖和迁移。