干细胞技术平台建设与发展

针对临床治疗和军事医学需要,建成基础与临床紧密结合的干细胞技术平台,探讨了平台利用与发展模式,建立了一套可持续发展的运行机制,建成了国家、地方干细胞工程技术及转化医学重点实验室。针对干细胞治疗损伤和退变性疾病开展技术研究,获得国家和地方重大科技专项支持,取得了一批具备转化应用条件的成果,培养出了一个具有军地特色的省、市干细胞治疗技术创新团队。目标是创建再生医学研究与应用示范基地,实现干细胞技术在军事医学领域的转化应用。

多次贴壁法高效制备人脐带间充质干细胞

目的建立一套简单、高效、稳定、规范的人脐带间充质干细胞体外制备与鉴定技术,为人脐带间充质干细胞库建设及临床应用提供技术规范。方法改进前期技术方法,重复验证,建立规范化技术方法。无菌采集足月剖宫产分娩胎儿脐带,采用不剥离血管和包膜组织贴壁法培养脐带间充质干细胞。待原代细胞长出时,收集原本换液应丢弃的组织块,进行二次贴壁培养,如此反复,待二次贴壁组织块长出细胞时,收集组织块进行三次贴壁培养。对三次贴壁培养长出的第三代细胞进行生物学特性分析。结果首次组织贴壁后10～12 d可见成纤维样细胞从组织块爬出,二次、三次贴壁后第2 d就可见成纤维细胞样细胞爬出,且生长状况好,细胞形态更为均一。三次贴壁培养的第三代细胞都高表达CD29、CD44、CD90和CD105,不表达CD34和CD45。细胞生长曲线呈＂S＂型,均具有成脂、成骨、成软骨分化的能力。结论采用多次贴壁法制备的人脐带间充质干细胞充分利用了脐带组织块,且得到的原代细胞数量翻倍,其生物学特性稳定。