云南省蝙蝠携带重要人兽共患病相关病毒病原的研究进展

蝙蝠是一些重要病毒的自然储存宿主。2010-2015年调查研究表明,云南省蝙蝠中广泛存在SARS样冠状病毒(SARS-like CoV)和其它多种类型冠状病毒(α-CoV和β-CoV)的自然感染,还从蝙蝠中分离或检测到新的呼肠孤病毒(Reovirus)、轮状病毒(Rotavirus)、肝炎病毒(Orthohepadnavirus)、丝状病毒(Filovirus)、副粘病毒(Paramyxovirus)、腺病毒(Adenovirus)、博卡病毒(Bocavirus)和圆形病毒(Circovirus)。本文对云南省自然界蝙蝠携带重要人兽共患病相关病毒病原的研究进展及其公共卫生意义做一综述。

羟乙基可溶性止血纱布的止血性能及安全性实验研究

目的:考察羟乙基改性纤维素可溶性纱布的止血效果及安全性。方法:利用小鼠剪尾和兔肝、脾创面止血法,观察其对动物创面的止血效果,通过对凝血时间的影响、对皮肤的刺激和急性毒性试验等考察其安全性。结果:羟乙基改性纤维素可溶性止血纱布能明显缩短创面出血时间,无急性毒性、过敏性和刺激性,对动物凝血时间无显著影响,植入后吸收良好。结论:羟乙基改性纤维素可溶性止血纱布是安全、良好的外科止血材料。

蛇毒神经毒素的研究进展

蛇毒具有广泛的生物活性,国内外对蛇毒神经毒素的镇痛作用的研究越来越多。作者就蛇毒神经毒素的分布及分类?结构和理化性质?毒理机制及应用作一些简要概述。

嗜水气单胞菌分离株的鉴定与菌株肠毒素及致病性研究

目的对嗜水气单胞菌进行鉴定并进行肠毒素检测与致病性分析。方法采用常规法分离培养,电子显微镜观察形态,用法国梅里埃VITEK32全自动微生物鉴定仪进行系统鉴定。乳鼠灌胃法测定热稳定性肠毒素(ST),小白鼠腹腔注射法测定其毒力。结果检出的嗜水气单胞菌均产热稳定性肠毒素(ST),具备较强的致病性。结论分离的嗜水气单胞菌具有较强毒力,与致病性密切相关。

抗金环蛇毒血清生产工艺的研究

目的研制抗金环蛇毒血清,以解决被金环蛇咬伤后的救治问题。方法以金环蛇毒为免疫原免疫马获得免疫血浆,经盐析制备IgG,IgG再经酶解、疏水柱纯化后得到F(ab′)2活性片段,并以免疫扩散、ELISA测定其抗体特异性,以小鼠试验法测定其中和金环蛇毒能力。结果得到的抗血清F(ab′)2冻干品纯度达90%以上。结论研制出了特异性强、效价高的抗金环蛇毒血清。

蛇毒神经毒素研究进展

我国的蛇类资源丰富,从理论意义和长远的经济效益考虑,蛇毒的研究是一个很有价值的方向。近年来,随着蛇毒神经毒素结构的确定、理化性质和药理性质的测定及蛇毒神经毒素的临床应用,其在镇痛功能方面表现出的维持时间长、效价高、无耐受性和无成瘾性等特点而倍受关注。蛇毒具有广泛的生物学活性,论文就蛇毒组分中近年来研究较为深入的神经毒素的结构、理化性质、药理作用及其应用等方面进行了综述。

金属蛋白酶多抗原表位DNA疫苗诱导免疫应答的研究

目的研究信号肽在真核表达系统中对金属蛋白酶多抗原表位DNA疫苗诱导小鼠免疫应答影响。方法人工合成含有金属蛋白酶多个抗原表位的DNA序列,将连接信号肽与不连接信号肽的该序列分别连接pIRESneo表达载体,构建的2种质粒免疫小鼠,ELISA法、出血中和法检测免疫后效价。结果 2种质粒诱导小鼠产生的抗体效价10-2为阳性,均能有效减轻金属蛋白酶引起的出血。结论信号肽的有无对金属蛋白酶DNA疫苗在小鼠体内表达没有影响。

禽流感诊断技术研究进展

近年来,禽流感已严重威胁到人类的健康,快速、准确的诊断技术对于禽流感的预防显得非常重要。作者就禽流感病毒的诊断技术研究进展作一综述,从而为有效预防和控制禽流感的流行和暴发提供简便、高效的检测技术。

我国钩端螺旋体型因子血清研究概况

我国的钩端螺旋体抗原分析和因子血清研究殆与Kmety同时于20世纪50年代末起步。但研究对象和目的大不相同,体会有所不同。现将个人体会结合国内外研究情况作梗概介绍。供同仁参考。

尖吻蝮蛇血凝酶N末端序列测定及其止血活性分析

目的:测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,并对其止血活性进行分析。方法:采用Edm an法测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,采用毛细管电泳估算其等电点,根据纤维蛋白出现时间和全血凝时间研究其止血活性。结果:尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列为VIGGNECDTNEEHFL,等电点为6.59,使用后能明显缩短纤维蛋白出现时间和全血凝时间。结论:尖吻蝮蛇血凝酶具有较强的止血活性。

TEM-116型超广谱β-内酰胺酶对牛奶中抗生素的清除

目的利用TEM-116型超广谱β-内酰胺酶能降解具有β-内酰胺环的抗生素的特性清除牛奶中的此类抗生素。方法DelvotestSP试剂盒检测三个温度条件下所需的TEM-116型酶的剂量。结果37℃,反应0.5h,1.032IU/L的TEM-116型酶能把牛奶中青霉素G清除;23℃,0.5h,1.29IU/L的TEM-116酶能把牛奶中的青霉素G清除;4℃,8～12h,O.22IU/L的TEM-116酶能清除牛奶中的青霉素G。结论TEM-116型超广谱β-内酰胺酶在不苛刻的条件下很容易清除牛奶中残留的青霉素G。

猪瘟与猪圆环病毒2型混合感染检测方法的建立与初步应用

根据GenBank上发表的猪瘟（classical swine fever virus，CSFV）和猪圆环病毒2型（porcine circovirustype2，PCV2）的核苷酸序列，应用NCBI／Primer Blast设计合成分别针对CSFV和PCV2的1对特异性引物，建立了分别用于检测CSFV和PCV2的RT—PCR和PCR方法，并对2008年4月～8月采自昆明8个可疑发病猪场的19份病料进行了CSFV和PCV2检测。结果显示，来自3个猪场的4份检测样品为CSFV阳性，猪场的CSFV阳性率为21．05％；来自2个猪场的2份检测样品为PCV2阳性，猪场的PCV2阳性率为10．53％。CSFV和PCV2混合感染率为10．35％。表明所建立的CSFV和PCV2混合感染检测方法具有特异性，可用于CSFV和PCV2混合感染的辅助诊断和流行病学调查，同时也为CSFV和PCV2混合感染的防制提供科学的依据。

精制抗眼镜王蛇毒血清的制备

目的研制抗眼镜王蛇毒血清,以解决被眼镜王蛇咬伤后的救治问题。方法以眼镜王蛇毒为免疫原免疫马获得免疫血浆,经盐析制备IgG,IgG再经酶解、疏水柱纯化后得到F(ab′)_2活性片段,并以免疫扩散、ELISA测定其抗体特异性,以小鼠实验法测定其中和眼镜王蛇毒能力。结果得到的抗血清F(ab′)_2冻干品纯度达90%以上。结论研制出了特异性强、效价高的抗眼镜王蛇毒血清。

荧光定量PCR检测婴幼儿巨细胞病毒感染情况分析

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测婴幼儿尿液人巨细胞病毒(HCMV)在HCMV感染诊断中的意义。方法采用FQ-PCR检测148例临床疑似HCMV感染婴幼儿尿液中HCMV-DNA水平。同时采用ELISA法检测婴幼儿血清HCMV-IgM抗体。在尿液HCMV-DNA检测阳性患儿中比较血清HCMV-IgM抗体阳性与阴性患儿尿液中HCMV-DNA拷贝数差异。结果 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA的阳性率为35.14%,ELISA检测婴儿血清HCMV-IgM的阳性率为15.54%。两种方法对HCMV感染诊断的阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。在尿液HCMV-DNA检测阳性患儿中,IgM抗体阳性组尿液HCMV-DNA拷贝数显著高于阴性组(P<0.01)。结论 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA是早期诊断婴幼儿HCMV感染的敏感有效的方法。

尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列抗原位点分析及免疫保护效果观察

目的采用生物信息学方法分析尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的关键抗原位点,并观察根据这些位点设计合成的新型免疫原的免疫保护效果。方法扩增尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列,采用Jameson-Wolf方法和ClustalX软件结合的生物信息学方法分析其抗原位点,人工合成筛选的抗原位点序列,并连接到pIRESneo表达载体,3次(0、2、4周)对BALB/c小鼠进行核酸免疫,ELISA法测定免疫后机体抗体水平,出血中和实验和攻毒实验初步观察其免疫保护效果。结果生物信息学方法分析得到6个关键抗原位点(MPA-1～MPA-6);ELISA法检测抗血清结果表明,抗原位点序列诱导小鼠产生的抗血清相对未免疫的小鼠血清稀释100倍后仍能表现出阳性结果;出血中和实验和攻毒实验表明,将抗原位点序列免疫小鼠可以诱导机体产生免疫反应,使体内产生抗体,能有效中和蛇毒,从而对尖吻蝮蛇蛇毒引起的出血有防护作用。结论用生物信息学方法成功获得尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的6个关键抗原位点,针对这些位点设计合成的新型免疫原展示出初步免疫保护效果。

尖吻蝮蛇蛇毒纤溶酶的分离纯化及氨基酸序列测定

目的:从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化出高纯度的纤溶酶并对其进行初步性质研究和氨基酸序列分析。方法:采用DEAE-Sepharose FF离子交换和两次Superdex75PG凝胶过滤,从尖吻蝮蛇蛇毒中纯化出可直接溶解纤维蛋白原的蛋白酶。结果:分离到的纤溶酶相对分子质量为25kD,HPLC分析纯度在97%以上,氨基酸序列分析其N末端为MSTEF QRYME IVVNHS MVKKY NGDSD KIKAW。结论:采用此工艺可从尖吻蛇毒中分离出高比活的纤溶酶,为进一步研究其药理作用奠定了基础。

尖吻蝮蛇蛇毒血凝酶与可溶性止血纱布在创面止血上的联合应用

目的:评价尖吻蝮蛇蛇毒血凝酶与可溶性止血纱布联合应用的止血效果。方法:取84只小鼠及14只日本大耳白兔,分别经静脉注射蛇毒血凝酶或生理盐水0.5 h后手术,以可溶性止血纱布作创面止血材料,同时血凝酶涂布止血纱布,以小鼠剪尾试验法和兔肝脾创面止血法比较各组止血效果。结果:血凝酶无论注射还是外用,联合止血纱布能缩短创面出血时间约56%。结论:尖吻蝮蛇蛇毒血凝酶和可溶性止血纱布联合应用能明显缩短创面出血时间,止血效果优于单独使用。

东北虎致死病原体的分离鉴定及药敏试验

东北虎（Siberian Tiger）也叫西伯利亚虎、阿穆尔虎、阿尔泰虎、乌苏里虎、满洲虎、北亚虎、远东虎、朝鲜虎,属猫科豹属,是我国Ⅰ级保护动物并被列入濒危野生动植物种,也是国际自然与自然资源保护联合会（IUCN）红色名单中列出的全球十大最濒危动物之一。在国内已有狮、虎、豹等大型食肉动物感染大肠杆菌的报道,但还未见其与肺炎克雷伯菌同时感染的报道。