医学微生物学PBL病例教学法探讨

针对医学微生物学理论课教学实践中出现的各种问题，我们提出以PBL（Problem based Leanling）教学法为基础，临床病例分析为中心，综合评价为保障的教学方法，对灌输式教学进行改革。

“对分课堂”在高校病理生理学教学中的应用研究

目的研究"对分课堂"教学模式在病理生理学教学中的应用效果。方法选取2018年2～7月成都医学院2016级药学专业218名大二本科生作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组(75名)和实验组(143名),对照组采用传统教学法,实验组采用"对分课堂"教学法。通过期末考试和调查问卷评估教学效果。结果与对照组比较,实验组学生病理生理学课期未考试成绩较高(P<0.01),实验组学生对该教学法持肯定态度,认为它增加了师生、生生互动,可以提高自身的审辨思维以及沟通、表达、合作、创新能力,希望在今后的学习中继续使用(P<0.01)。实验组学生课后学习自主性高于对照组(P<0.01)。结论 "对分课堂"教学方法不仅改善教学效果,培养了学生的核心素养能力,而且建立了教师、学生都满意的课堂,值得在医学院校病理生理学教学中广泛推广应用。

全基因组测序后质粒的组装与鉴定研究进展

全基因组测序(whole genome sequencing,WGS)从1977年发展至今,已成为一种快速、低成本获取生物体全基因组的方法[1]。WGS可发现基因组变异,在微生物的分类鉴定中应用广泛[2]。WGS经历了三代技术革新,二代测序和三代测序的结合已成为目前最广泛的杂交测序方法[3-4]。杂交测序一方面使用长读长跨越重复序列或缺口,另一方面使用短读长纠正测序中错误的碱基[5]。GenBank数据库中完成WGS的菌株越来越多,用传统的DNA文库或PCR扩增的方法无法获得的质粒可由WGS数据进行组装,但组装质粒的正确性和完整性需要进一步鉴定和分析。

Theta复制A类质粒的研究进展

质粒主要存在于古细菌、细菌和真核细菌等领域[1-3],其通过重组或转座来整合和传递基因,促进细菌种群的遗传交换。质粒携带的基因赋予宿主细菌新的表型,让细菌更好地适应生存环境[4]。环状质粒有theta复制、滚环复制与链替换复制3种复制机制。过去观点认为,滚环复制的质粒更多出现在革兰阳性菌中,theta复制的质粒更多出现在革兰阴性菌中。随着测序和质粒提取技术的发展,在革兰阳性菌中不断发现theta复制的质粒。质粒的复制起点可决定其生物学特性[5-7]。质粒大小方面,滚环复制的质粒较小,theta复制的质粒较大;宿主范围方面,具有ColE1类质粒复制起点的质粒,其宿主范围较窄,具有RK2质粒复制起点的质粒,其宿主范围较宽;质粒的拷贝数受复制起点中串联重复序列的重复次数控制。Theta复制质粒的传统分类方法是参考Rep蛋白的氨基酸序列同源性分类[8],也可根据复制起点的共有序列,分为pUCL287[9]家族、pUCL22家族[10]等;但越来越多的theta复制质粒难以分类,如pLP60、pB21AG02等。目前最新的方法是根据复制机制进行分类[11]。本综述将依据最新分类方法,重点讨论theta复制A类质粒的研究进展,包括复制起点、Rep蛋白、复制机制、拷贝数调控及分类。

成都喷泉嗜肺军团菌分离株血清型5型毒力分析

目的对前期分离鉴定的嗜肺军团菌5型(LP5)进行毒力分析。方法构建CD-5感染巨噬细胞模型,瑞士染色后,光镜下观察细胞变化,再行透射电镜进一步观察,开展末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定(TUNEL)实验,研究CD-5是否为毒力株。结果成功构建CD-5感染巨噬细胞模型,光镜观察CD-5能使细胞空泡变性、破裂。透射电镜显示,细胞出现线粒体聚集、胞质空泡化,胞核皱缩,染色质凝集于胞膜周边等凋亡表现,TUNEL实验也检测到DNA断裂的片段。结论分离获得的CD-5为毒力株,有可能对人体致病,应加强对环境中军团菌污染情况的监测和控制,避免军团菌病的爆发和流行。

军团菌野生株与胞内分离株全菌蛋白比较

目的采用蛋白质组学方法,探索军团菌自然水体株与胞内分离株蛋白表达的差异。方法将菌株CD-5感染巨噬细胞16 h后裂解细胞分离军团菌,并命名为CD-5'。将CD-5和CD-5'分别用培养基培养后提取全菌蛋白,蛋白定量后通过SDS电泳和Western blot探索存在差异后,采用双向电泳联合MALDI-TOF-TOF质谱深入研究。结果CD-5全菌蛋白双向电泳图上获得214个蛋白点,CD-5'获得256个蛋白点,二者之间共有96个差异蛋白点。CD-5与CD-5'相比,CD-5有32个蛋白表达上调(编号:A01-A32),CD-5'有64个蛋白表达上调(编号:B01-B64)。对9个具有显著差异蛋白点进行酶解质谱分析,鉴定结果:A22为β-内酰胺酶,A23为苹果酸脱氢酶,A30为核苷酸绑定蛋白,A31为核糖体再循环因子,A32为假想蛋白,B03为30 s核糖体蛋白S1,B17为四型分泌系统蛋白Dot,B23为延伸因子-G片段,B62为烷基过氧化氢复原酶C亚基蛋白。结论胞内外军团菌蛋白表达具有差异,这些蛋白可能在军团菌生理、致病、毒力方面起到一定作用。

人眼结膜吸吮线虫感染漏诊一例

患者男，83岁，四川省彭州市人。右眼视力进行性下降多年，加重1个月为主述，2015年11月12日到我院眼科就诊。检查发现：有眼结膜轻度充血肿胀，角膜透明，晶状体混浊明显，眼前节及眼后段检查未见明显异常。其他相关化验检查正常，综合诊断为老年性白内障，建议手术治疗。左眼无明显症状。

军团菌入胞影响因素及过程

军团菌(Legionella)属于胞内寄生菌,其粘附、侵入细胞是军团致病的第一步,也是关键步骤,多种因素影响这一过程,如Lcl、Flagellin、Pilin、MOMP、MIP、Hsp60、Hsp70等蛋白、rtx A和enh C基因、棘阿米巴和金属离子Zn+等。本文旨在对影响军团菌入胞的因素及方式做简要概述,帮助初步探索军团菌的研究者提供系统的认识,以及通过对入胞机制的认识,利于军团菌病的预防和治疗。