Caveolin-1的低表达与乙型肝炎病毒感染相关肝细胞癌的关系研究

目的研究小窝蛋白-1(Caveolin-1)的表达与乙型肝炎病毒(HBV)感染以及相关肝细胞癌(HCC)的关系。方法免疫组化法检测HBV相关HCC中Caveolin-1表达量。构建Caveolin-1重组质粒,用Western blot检测转染了重组质粒的HepG2.2.15细胞中Caveolin-1表达量,并用ELISA法检测转染后培养上清中的HBsAg。结果免疫组化结果显示Caveolin-1在95%HBV相关HCC组织中表达低于癌旁组织(P<0.05)。Caveolin-1重组质粒构建成功并在HepG2.2.15中成功表达。ELISA检测发现用Caveolin-1重组质粒转染HBV感染稳定模型HepG2.2.15细胞48、72 h后,细胞培养上清中的HBsAg浓度相对未转染细胞分别下降了46.2%和48.8%(P<0.05)。重组质粒转染HBV感染急性细胞模型48、72 h后,HBsAg浓度相对未转染细胞分别下降了41%和50%(P<0.05)。结论 Caveolin-1在HBV相关HCC中呈低表达,Caveolin-1的高表达抑制了HBV HBsAg的分泌。

亲和共沉淀从红芸豆中提取红细胞凝集素及其性质研究

目的研究一种从红芸豆中提取红细胞凝集素(PHA-E)的新方法。方法红芸豆经过粗提,然后和甲状腺球蛋白的粗提取液进行共沉淀,利用超滤制得PHA-E产品,采用电泳和质谱进行鉴定,并研究其凝血活力。结果所获样品的纯度高,其亚基相对分子质量为32 000,等电点为6.5。经质谱鉴定,纯化产品为PHA-E。使兔红细胞50%凝集的PHA-E的最低浓度为2.45μg/mL,单糖不影响PHA-E凝血活力,EDTA抑制其凝血活力,Zn2+促进其凝血。结论通过亲和共沉淀的方法能快速简便的提取活力高的PHA-E。

PTEN基因调控口腔鳞癌细胞TCA-8113增殖及凋亡

目的评估PTEN基因在人口腔鳞癌细胞系TCA-8113中的增殖抑制和促凋亡功能。方法利用PTEN真核表达质粒转染TCA-8113细胞,另设PBS处理作为空白组,转染pcDNA3.1质粒和Lipofectamine处理作为对照组。采用MTT和克隆形成实验检测细胞增殖情况,采用流式细胞术、TUNEL和Western blot法检测细胞凋亡。结果 pcDNA3.1-PTEN转染TCA-8113细胞得到高效的外源性表达。克隆形成实验结果表明,空白组、Lipofectamine处理组、空载体质粒组和PTEN转染组的克隆数分别为(107.34±4.62)、(79.27±3.71)、(72.03±2.38)和(19.73±1.02),PTEN转染组抑制率为72.60%,与空载体质粒组相比,差异有统计学意义(P<0.05);MTT实验结果显示PTEN基因的表达对TCA-8113细胞的抑制率在48 h和72 h分别为18.16%和42.74%,PTEN转染组与空载体质粒组比较有统计学差异(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,PTEN基因能引起62.12%的细胞死亡;TUNEL检测PTEN基因高表达能引起(45.67±2.31)%的细胞凋亡;Western blot检测结果表明,PTEN能抑制Bcl-2的表达并激活Bax的表达。结论 PTEN在TCA-8113细胞中的表达能显著抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。