HSV-1 UL-12基因的克隆、表达及产物复性

目的:克隆及表达单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)UL12基因,对其表达产物HSV-1碱性核酸酶(AN)进行复性,为建立抗HSV-1药物的分子筛选模型奠定了基础,对于寻找抗病毒药物具有重要意义。方法:从HSV-1感染的Vero细胞中提取HSV-1基因组DNA,通过PCR克隆出UL12基因并对其测序;然后将HSV-1 UL12基因先克隆至pMD19-T载体,再亚克隆到pET32a表达载体上,并将重组载体转化到E.coli Rosetta菌中进行表达;最后用梯度盐酸胍对表达出的包涵体进行复性。结果:成功构建了pET32a-UL12重组载体,经序列比对,与GenBank上公布的HSV-1国际标准毒株17株的UL12基因序列的同源性达到了99.2%。在E.coli Rosetta菌中以包涵体的形式表达,经复性得到有活性的HSV-1碱性核酸酶(AN)。AN同时具有核酸外切酶和核酸内切酶的活性,与核酸作用60min时酶活性最高。结论:重组载体pET32a-UL12经表达、复性可获得有活性的HSV-1 AN。

Bcl-2与肿瘤转移的研究进展

转移是恶性肿瘤最主要的生物学特性之一,是危及患者生命的主要原因。Bcl-2分子一直以来被认为是抗凋亡的关键因子,但近期研究表明Bcl-2分子在促进肿瘤转移中也发挥重要作用。本文从细胞水平、动物模型和临床样本三个方面,针对Bcl-2分子在调节细胞迁移、侵袭和肿瘤转移中的作用及相关分子机制进行论述,并对以Bcl-2分子为靶标的治疗策略进行展望,期望为抑制肿瘤转移提供依据。