circ_0005230通过靶向miR-548c-3p影响胆管癌细胞增殖和凋亡的机制

目的:探讨环状RNA(circRNA)circ_0005230对miR-548c-3p的靶向调控和对胆管癌细胞增殖和凋亡的作用与机制。方法:实时定量PCR(qPCR)检测胆管癌组织中circ_0005230和miR-548c-3p表达。将人胆管癌细胞RBE分为si-NC组、si-circ_0005230组、pcDNA-NC组、pcDNA-circ_0005230组、miR-NC组、miR-548c-3p组、si-circ_0005230+anti-miR-NC组、si-circ_0005230+anti-miR-548c-3p组,分别通过Lipofectamine 2000转染si-NC、si-circ_0005230、pcDNA-NC、pcDNA-circ_0005230、miR-NC、miR-548c-3p mimic、si-circ_0005230和anti-miR-NC、si-circ_0005230和miR-548c-3p inhibitor。以CCK-8法、克隆形成实验、免疫印迹实验(Western blot)和流式细胞术分别进行细胞的增殖、克隆形成、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)表达及细胞凋亡测定。双荧光素酶报告实验分析circ_0005230与miR-548c-3p靶向关系。结果:30例胆管癌组织中circ_0005230表达量高于癌旁组织,miR-548c-3p表达量低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。si-circ_0005230组或miR-548c-3p组RBE细胞的活性、克隆形成数、增殖蛋白CyclinD1和p21表达量减少,凋亡蛋白Caspase-3、Bax表达量和凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。circ_0005230靶向调控miR-548c-3p的表达。pcDNA-circ_0005230组比pcDNA-NC组降低miR-548c-3p表达量,si-circ_0005230组较si-NC组提高miR-548c-3p表达量,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-circ_0005230+anti-miR-NC组比较,si-circ_0005230+anti-miR-548c-3p组RBE细胞的活性、克隆形成数、增殖蛋白CyclinD1和p21表达量升高,凋亡蛋白Caspase-3、Bax表达量和凋亡率降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:circ_0005230在胆管癌组织中高表达,抑制circ_0005230表达通过靶向miR-548c-3p减弱胆管癌细胞的增殖和诱导其凋亡。