EDS-40玻璃化冻存小鼠卵母细胞的研究

目的设计研究玻璃化液EDS-40对冻贮小鼠卵母细胞的效果。方法①按随机分组原则,分为实验组和对照组,实验组(a)采用自行设计的EDS-40玻璃化液进行玻璃化冷冻(其配方为:40%乙二醇+18%葡聚糖),对照组(b)采用国际上已证实效果较好的EFS-40玻璃化溶液进行玻璃化冷冻,对照组(c)采用以PROH为基础的程序冷冻液进行程序冷冻。首先对EDS-40和EFS-40玻璃化溶液,行玻璃化测试;再随机选用小鼠卵母细胞,在室温25℃下分别加入EDS-40和EFS-40玻璃化溶液,玻璃化后装管并迅速投入液氮中。对照组(c)置于程序冷冻仪中进行程序化冷冻。各组均冻存2mo～3mo后,在25℃的水浴中复温后,用培养液反复洗涤后移入培养孔板培养,观察卵母细胞的成活率。将成活的卵母细胞行体外受精,观察其受精率。结果①两种玻璃化溶液能达到玻璃化效果;②EDS-40、EFS-40及对照组冷冻复温后的存活率依次为:79.34%、67.94%、56.34%;③EDS-40、EFS-40及对照组冻卵的受精率分别:79.17%、66.29%、51.25%。结论①EDS-40可以用来玻璃化冷冻小鼠卵母细胞;②EDS-40较EFS-40玻璃化溶液冻存小鼠卵母细胞效果更好;③玻璃化技术比传统冷冻法效果更好。