成都市459例先天性聋患儿基因检测分析及c.109G>A阳性人群听力随访

目的通过对成都市2020年出生的459例先天性聋患儿进行高通量测序,分析该人群耳聋基因突变情况,探讨如何对遗传性耳聋进行有效防控。方法采集新生儿干血斑提取基因组DNA,采用高通量测序技术检测18个耳聋基因上的101个位点。结果共检出阳性携带者241例,GJB2、SLC26A4是成都市排名前2位的常见致聋基因,其阳性携带率分别为49.46%、0.65%。241例阳性携带者中携带了GJB2基因上c.109G>A突变219例,突变频率最高。结论通过高通量测序技术对更多的耳聋突变位点进行检测,能为更多的患儿明确耳聋的遗传学病因,有助于更好地采取听力语言干预措施、遗传咨询及健康生活指导等,GJB2基因上c.109G>A在成都市的阳性检出率显著高于全国其他地区,临床上要予以重点关注。

成都地区471994例新生儿耳聋基因筛查突变情况分析

目的调查分析成都地区不同区域新生儿耳聋基因携带的流行病学情况,为耳聋出生缺陷防控干预提出建议和数据参考。方法采集全市22个区(市)县的新生儿足跟血,采用微阵列芯片法对GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体12SrRNA四个常见致聋基因上的15个突变热点进行筛查分析,同时按照新生儿出生地对致聋基因进行地域分布特征分析。结果2016年7月-2019年6月,成都地区共筛查新生儿471994例,耳聋基因阳性突变携带者19016人,阳性突变携带率4.03%,其中GJB2单基因突变携带率2.20%,SLC26A4单基因突变携带率1.27%,GJB3单基因突变携带率0.20%,线粒体12SrRNA基因突变携带率0.33%,多基因突变携带率0.04%。结论成都地区的GJB2突变携带率最高,突变谱和北京一致;SLC26A4突变携带率次之,突变谱具有地域特异性,c.1229 C>T突变频率仅次于c.919-2A>G,高于c.2168A>G。成都地区耳聋基因包括线粒体12SrRNA突变携带率在不同区(市)县分布不平衡,在今后的耳聋出生缺陷防控工作中针对高突变携带率的区(市)县更应加强健康教育,阳性人群婚配、生育指导及耳毒性药物的合理使用。

分子生物学技术在病原微生物检验中的应用研究

目的探析分子生物学技术在病原微生物检验中的应用效果。方法将2022年7月至2023年6月间在该公司进行病原微生物检验的患者作为试验对象,计入100例,均予以实施荧光RT-PCR法检验、常规反转录RT-PCR法检验,分别计入试验组、对照组,对比两组检验效果。结果试验组阳性检出率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在病原微生物检验中,分子生物学技术的应用可有效提升阳性检出率,特别是分子生物学技术的合理选用,可为临床后续治疗方案的设定提供更充分、可靠的参考依据。

3328例新生儿听力与耳聋基因联合筛查分析

目的应用二十三项遗传性耳聋基因突变微流控诊断芯片技术联合听力筛查分析张家港市新生儿耳聋基因携带情况以及基因突变者的听力情况,为张家港市出生缺陷防治政策提供科学依据。方法采集张家港市助产机构分娩的新生儿足跟血,采用微流控诊断芯片法对GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体12S rRNA基因23个突变热点进行筛查,联合听力筛查进而分析新生儿耳聋基因携带及听力情况。结果2022年5月至2022年12月,张家港市共采集3328例新生儿足跟血,耳聋基因阳性携带者465例,阳性突变携带率13.97%,GJB2基因阳性检出率最高,为11.81%,SLC26A4基因阳性检出率1.44%,线粒体12S rRNA基因阳性检出率0.24%,多基因突变携带率0.27%。各基因型中,GJB2基因c.109 G>A阳性检出率最高,为9.74%,其次为GJB2基因c.235 del C阳性检出率2.04%。通过听力学诊断为听力损失12例,GJB2基因c.109 G>A纯合突变5例、GJB2基因c.109 G>A复合杂合突变3例、GJB2基因c.235 del C纯合突变1例、GJB2基因c.235 del C复合杂合突变1例、GJB2基因c.235 del C杂合突变2例。结论张家港市新生儿GJB2基因突变携带率最高,其次为SLC26A4基因突变携带率。GJB2基因c.109G>A突变频率最高,其次为c.235delC突变频率。各基因型突变携带率在新生儿中不平衡,在今后的出生缺陷防治工作中应有侧重点,对高危人群应重点关注其听力情况,有效做到早发现、早诊断、早干预。

婴儿会阴部软纤维瘤合并副阴囊1例

婴儿软纤维瘤少见，副阴囊则更为罕见，作者近期收治1例会阴部软纤维瘤合并副阴囊的患儿，现报告如下。

17000名新生儿遗传性耳聋基因突变筛查

目的应用遗传性耳聋基因芯片对新生儿进行致聋基因突变筛查，评估成都地区新生儿中常见遗传性耳聋基因的突变频率和类型。方法收集成都地区2012年8月至2013年6月送检的17000名新生儿足跟血制成干血斑，应用微阵列芯片法检测中国人常见的4个致聋基因的9个突变位点，包括GJB2基因（35delG、176dell6、235delC、299delAT）、GJB3基因（538C〉T）、SLC26A4基因（IVS7—2A〉G、2168A〉G）、线粒体DNA12SrRNA基因（1555A〉G、1494c〉T）。对所有阳性结果和随机抽取2％的阴性结果进行测序验证。结果17000名新生儿中检出突变者542例，其中GrJB2235delC254例、176del1615例、299delAT55例，GJB3538C〉T23例，SLC26A42168A〉G17例、IVS7—2A〉G128例，线粒体12SrRNA1494C〉T4例、1555A〉G42例（含2例复合性突变中有1555A〉G均质突变）；另外检出复合性突变6例，分别为GJB2235delC杂合突变伴有SLC26A4IVS7—2杂合突变和线粒体DNA12SrRNA1555A〉G均质突变各1例，GJB2299delAT杂合突变伴有GJB3538C〉T杂合突变和线粒体DNA12SrRNA1555A〉G均质突变各1例、伴SLCg6A4IVS7—2A〉G杂合突变2例。测序结果与芯片结果一致。在受检的新生儿中，耳聋基因GJB2，GJB3，SLC26A4和12SrRNA突变总携带率达到3．19％；致药物性耳聋的线粒体DNA基因突变率达到0．27％；GJB2基因与SLCg6A4基因突变携带率达2．76％，占基因突变携带人群的86．5％。结论在无耳聋家族史的新生儿中，4个致聋基因突变均有携带者，GJB2基因突变高于SLC26A4基因突变，两者占比最大。致药物性耳聋的线粒体DNA12SrRNA基因突变在新生儿用药前及时发现，并终生避免接触氨基糖苷类药物，将有利于防止“一针致聋”的发生。在新生儿中开展耳聋基因筛查，对遗传性耳聋的早期诊断和预防，以及成年后的婚育指导具有重要意义。

微流控芯片在遗传性耳聋基因热点突变检测分析中的应用

目的探索将微流控芯片用于遗传性耳聋基因热点突变的分型检测。方法将专门设计加工的微流控芯片与KASP扩增整合,借助激光共聚焦荧光扫描仪实现遗传性耳聋常见4个相关基因的23个热点突变分型检测,采集276例(听障组:成都市2019年出生并诊断为听力损失的131例新生儿;对照组:成都市2020年出生且听力筛查结果为双耳通过的145例新生儿)新生儿的足跟血斑样品验证其结果准确性和临床应用可行性。结果微流控芯片通过聚类分析对全部质控品均实现准确分型,其最低检测限可达1 mg/L。276例新生儿血斑样品的微流控芯片分型结果全部通过复核确认。听障组131例新生儿,检出66例阳性携带者,阳性携带率50.4%;对照组145例新生儿,检出40例阳性携带者,阳性携带率27.6%。其中携带率最高的突变热点为GJB2基因c.109G>A,在听障组和对照组中阳性携带率分别为46.6%(61/131)和23.4%(34/145)。结论微流控芯片可用于遗传性耳聋相关热点突变的分型检测,具有准确性高、防污染能力强、操作简单、用时短等优势,能更好地满足新生儿耳聋基因筛查等遗传性耳聋基因检测需求。