Xpert MTB/RIF技术在诊断肺结核及利福平耐药的临床价值

目的评估Xpert MTB/RIF技术在快速诊断肺结核及利福平耐药的临床应用价值。方法收集肺结核患者痰标本420例,同时进行涂片法、MGIT液体培养法(简称"液培法")+微孔板比例法药敏试验((简称"药敏法")及Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌(Mtb)和利福平耐药。分别以液培法和药敏法为金标准,分析Xpert MTB/RIF检测Mtb和利福平耐药的效能,比较不同方法检测Mtb和利福平耐药的阳性检出率。结果 Xpert MTB/RIF和涂片法检测Mtb的灵敏度为84. 80%、30. 40%(P <0. 05),特异度为78. 82%、98. 82%((P <0. 05)。Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的灵敏度为100. 00%,特异度为97. 65%。Xpert MTB/RIF检测Mtb阳性检出率为59. 05%,涂片法为18. 57%(P <0. 05),液培法为59. 52%(P> 0. 05)。Xpert MTB/RIF检测利福平耐药阳性检出率为21. 70%,药敏法为19. 81%(P> 0. 05)。结论与传统涂片法和液培法及药敏试验比,痰标本中Xpert MTB/RIF技术检测Mtb尤其是检测利福平耐药具有较高的敏感度、特异度,时间短,准确性高,一致性较好,对肺结核早期诊断与治疗有重要意义。

基因芯片法在肺结核诊断中的临床应用价值

目的探讨基因芯片技术在肺结核诊断中的应用价值。方法采集641例肺结核患者的痰及纤支镜冲洗液标本,同时进行抗酸染色法、MGIT液体培养法+微孔板比例法药物敏感性试验((简称"药敏试验")及基因芯片法检测,分析不同方法检测结核分枝杆菌(Mtb)及其异烟肼、利福平耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和kappa值。不同方法之间Mtb及耐异烟肼、耐利福平、耐多药阳性检出率的比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果基因芯片法敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和kappa值均较高。基因芯片法Mtb阳性检出率54.91%高于涂片法27.61%,与液体培养法60.06%比较差异无统计学意义。基因芯片法和药敏试验检测Mtb耐异烟肼、耐利福平、耐多药阳性检出率,两者比较差异无统计学意义。结论基因芯片法在检测Mtb及其耐药性方面与传统液体培养法和药敏试验相比,有较高的敏感度和特异度,检测时间短,一致性高,值得临床应用推广。

四川地区结核分枝杆菌katG、inhA和rpoB基因突变位点耐药水平及突变频率特征分析

目的分析基因芯片法(芯片法)检测结核分枝杆菌(Mtb)katG、inhA和rpoB基因突变位点耐药水平、突变频率特征,为临床治疗提供参考依据。方法选取成都市公共卫生临床医疗中心2020年1月—2021年1月收治的四川地区结核病患者118例Mtb分离株,芯片法通过katG、inhA和rpoB基因突变位点检测异烟肼(H)和利福平(R)耐药基因,微孔板比例法(比例法)通过培养+药物敏感性试验检测表型耐药水平,分析基因突变位点与耐药水平关系及突变频率分布特点。结果 H、R耐药株的耐药水平高,耐药相关基因的高耐药率为83.53%(71/85)、77.78%(77/99),基因突变位点与耐药水平关系密切,katG、inhA单基因突变位点的H高耐药率为92.96%(66/71)、30.77%(4/13),两者有统计学差异(χ^(2)=26.28 P<0.05)。rpoB单基因突变位点中rpoB531、rpoB526、rpoB533/516/513/511位点的R高耐药率为93.88%(49/49)、81.82%(18/22)、37.50%(9/24),三者有统计学差异(χ^(2)=29.17 P<0.05)。H耐药相关基因以katG315单基因突变为主,突变形式为(AGC→ACC) Ser→Thr(S315T),突变频率84.43%(71/85);R耐药相关基因以rpoB531单基因突变为主,突变形式为RRDR-531(TCG→TTG) Ser→Leu,突变频率49.50%(49/99)。结论四川地区H、R耐药株的耐药水平高。katG、rpoB531/526与H、R高耐药水平有关,inhA、rpoB511/513/516/533与H、R低耐药水平有关。katG315、rpoB531是H、R耐药相关基因突变的主要形式,临床使用抗结核药物须密切结合药敏检测制定方案。

528例利福平耐药结核病患者一、二线抗结核药物耐药情况

目的分析528例住院利福平耐药结核病(RR-TB)患者对一、二线抗结核药物的耐药情况.方法2635例住院的肺结核患者(其中初治患者1939例、复治患者696例),均行痰结核分枝杆菌(Mtb)培养,进行异烟肼(H)、利福平(R)、乙胺丁醇(E)、链霉素(S)、利福布丁(Rfb)5种一线抗结核药及阿米卡星(Am)、卡那霉素(Km)、氧氟沙星(Ofx)、左氧氟沙星(Lfx)、莫西沙星(Mfx)、卷曲霉素(Cm)、乙硫异烟胺(Eto)、对氨基水杨酸钠(PAS)、氯法齐明(Cfz)9种二线抗结核药物药敏试验,分析其中RR-TB菌株一、二线抗结核药物的耐药情况.结果分离自2635例肺结核患者的2635株Mtb菌株最终培养分离出528株RR-TB菌株.528例中初治患者168例、复治360例,初治、复治RR-TB菌株耐药率分别为8.66%、51.72%.528株RR-TB菌株一线抗结核药物总耐药顺位为:R>H>Rfb>S>E,耐药率分别为100%、90.72%、74.81%、53.60%、38.07%,耐2药、耐≥3药者分别为10.04%、82.19%.与复治者比较,初治者RR-TB菌株H、S、E、耐2药、耐≥3药耐药率降低(P均<0.05).528例RR-TB患者二线抗结核药物总耐药顺位为:Ofx>Mfx>Lfx>Eto>Cm>PAS>Am>Km>Cfz,耐药率分别为46.21%、42.23%、35.04%、11.55%、10.42%、9.85%、8.14%、7.77%、2.27%,耐1药、耐2药、耐≥3药者耐药率分别为7.39%、5.68%、40.15%;与复治者比较,初治者RR-TB菌株Ofx、Mfx、Lfx、耐≥3药耐药率降低(P均<0.05).结论RR-TB菌株对R、H、Ofx及Mfx抗结核药物的耐药率高,初治者RR-TB菌株一、二线抗结核药物的耐药率高,复治患者常出现多重(Rfb、Ofx、Mfx、Lfx)耐药.