成都市858例不育男性精液质量分析

目的分析成都市不育男性精液情况，了解成都地区不育男性精液质量现状。方法用计算机辅助精子分析（CASA）技术，按照《WHO人类精液及精子一宫颈粘液相互作用实验室检验手册》，使用北京伟力公司WLJY9000仪器，对2008年7月-2009年4月到我院生殖与不孕研究所就诊的858例不育男性精液进行分析。结果858例不育男性精液量（2．62±0．94）ml，pI{值（7．45±0．18），精子密度（69．71±56．72）×10^6／ml，精子活率（55．48±25．62）％，a级精子（23．95±14．85）％，a＋b级精子（39．94±19．50）％。其中原发不育490例，继发不育368例；精液正常338例（39．39％），精液异常520例（60．61％），依次为a＋b级异常占62．35％，a级异常占51．17％，活率异常占48．48％，密度异常占17．37％，精液量异常占14．45％，液化异常占8．16％，pH值异常1．28％。结论我市不育男性精液质量与同期育龄男性精液质量相比，精液质量明显下降，表现为60．61％的不育男性患者存在精液质量异常，精子活力异常所占比例最高，提示精液质量下降是导致男性不育的主要因素。多种精子质量检测技术的应用将使男性不育特异性病因诊断变为可能。

836例成都市育龄男性精子质量分析

目的了解成都市正常育龄男性精子质量状况,促进优生优育工作。方法对836例育龄男性完整精液标本进行分析,并根据年龄分为〈25岁、25-29岁、30-35岁、36-39岁、〉40岁5组,分析比较各组精液参数。结果836名育龄男性精液量（2.85±0.92）ml,pH值（7.46±0.16）,精子密度（77.15±53.88）×10^6/ml,精子活率（67.36±18.41）%,a级精子（30.08±12.90）%,a＋b级精子（49.81±14.92）%。其中正常组515例（61.60%）,异常组321例（38.40%）。异常组中,225例精子活力异常（70.09%）,215例精子活率异常（66.98%）,86例精液量异常（26.79%）,54例精子密度异常（16.82%）,8例pH值异常（2.49%）,7例无精子（2.18%）。结论我市育龄男性精子质量基本处于WHO规定的标准内,但精子活力下降比例较高。在不同年龄分组研究中25-29岁年龄组精子质量好于其他年龄组,随着年龄增加精子质量呈下降趋势,在育前保健中应重点针对精子活力下降状况,开展保健服务,以利于优生优育。

哺乳动物精子质量评定方法研究进展

哺乳动物精子质量的评估,对于人工授精技术和体外受精技术的应用具有重要意义。目前,可用于反映精子质量的指标和评估方法有:精子活力、精子活率、顶体膜完整性检测、顶体状态与获能的检测、精子线粒体活性、受精能力检测以及其他一些相关的精子质量检测方法。在生产上,进行多指标联合检测,是目前评定精子质量有效的方法。随着技术的进步,更加快速、准确、安全和高效的精子质量检测的新方法将被应用到人类生殖临床和畜牧生产中。

外源性物质提高精子受精能力研究进展

受精是一个复杂的生物学过程,精子必须具备良好的运动功能,同时需经获能和顶体反应才能实现受精。通过添加外源性物质,来改善精子体外存活时间,提高精子的运动能力,尤其是冷冻保存精子解冻后的受精能力,被认为是借助实验手段在体外改善精子功能,从而提高受精率的一个有效途径。可添加的外源性生物活性物质种类很多,通常有咖啡因、氨基多糖类物质、己酮可可碱、生殖激素类物质、细胞因子、维生素、抗氧化剂、牛黄酸和一些酶类物质等。本文对精子常用的外源性添加物质的研究进展进行了总结,在此基础提出了寻找新的外源添加物质的思路和途径。

计算机职业与男性精液质量关系研究

目的通过对计算机从业人员的精液质量分析,探讨计算机职业对男性精液质量的影响。方法应用计算机辅助精子分析（CASA）技术,按照《WHO人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》,使用北京伟力公司WLJY9000仪器,对2007年7月~2009年6月到我院生殖与不孕研究所就诊的221例以长期使用计算机为职业的男性精液从精液量、精子密度、精子活率、精子活力等参数进行分析。结果①221例计算机职业男性精液量（2.74±0.86）m1,精子密度（74.66±52.47）×106/ml,精子活率（58.42±22.47）%,精子活力a＋b级精子（42.54±18.34）%,a级精子（26.07±14.69）%,其中正常组102例（46.15%）,异常组119例（53.85%）。②与同期育前检查组比较,各项精液质量参数差异无统计学意义,但精子活率和活力呈现下降趋势;与同期育前检查正常组比较,精子活率,a＋b级精子和a级精子呈现极显著的下降（P〈0.01）。③计算机职业不育组与同期不育检查组比较,精子密度、精子活率、精子活力等参数呈现下降趋势,但差异无统计学意义。结论计算机职业可能引起男性精液质量的异常。应重视计算机从业人员自我防护,从而改善精液质量,提高生育力。

鲤鱼HSP70基因组织表达差异研究(英文)

1材料与方法 1．1材料 供试鲤鱼购自成都市洗面桥市场。主要试剂：TR—Iaol总RNA提取试剂盒购自Invitrogen公司，反转录试剂盒、pMD-18T载体、D12000DNA和如DNA聚合酶购自大连宝生物工程有限公司；琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒购自Axygen公司；DEPC原液（Sigma分装）、JM-109感受态细胞购自大连宝生物工程有限公司，其他试剂均为国产分析纯。

大熊猫精浆蛋白的SDS-PAGE电泳研究

本试验采用SDS-PAGE对大熊猫精浆进行电泳并对电泳条带进行分析,探讨特异条带与大熊猫精液质量的关系。结果显示:大熊猫精浆SDS-PAGE电泳共分离得到12条蛋白谱带,其中6个条带为所有个体大熊猫精浆样品所共有,共有条带的相对量在不同个体之间不存在差异(P>0.05)。试验中部分大熊猫精浆出现的特异蛋白带和共有带蛋白含量与精液质量无相关性。

大熊猫精子低渗膨胀试验与其他精子质量评估试验相关性研究

利用解冻后的大熊猫冷冻精液,分别进行体外存活试验、顶体反应试验、异种穿卵试验和低渗膨胀试验,并对低渗膨胀试验与其他试验作相关性分析。结果显示:各试验之间存在一定的相关性。精子低渗膨胀率与精子的体外37℃存活时间呈显著正相关,r=0.79(P<0.05);与体外异种受精率呈极显著正相关,r=0.90(P<0.01)。说明大熊猫精子的低渗膨胀试验可以作为精子质量评价的重要指标。

齐口裂腹鱼和鲤鱼H-FABP基因的克隆及其表达谱

心型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid binding protein,H-FABP)的水平与影响肉质性状的肌内脂肪含量有关,鱼类H-FABP的表达水平对其肌内脂肪含量是否相关仍未见报道.本研究获得齐口裂腹鱼和鲤鱼心脏型脂肪酸结合蛋白基因序列,利用半定量RT-PCR分析其表达特性并测定肌内脂肪含量,比较H-FABP基因在不同生活环境的2种鲤科鱼肌内脂肪沉积中的作用.结果显示,齐口裂腹鱼和鲤鱼H-FABP基因的ORF为402 bp,编码133个氨基酸,它们的氨基酸序列相同,与人、猪、小鼠、斑马鱼、大西洋鲑、虹鳟等的同源性为71.3%～90%;H-FABP基因在2种鲤科鱼的心、肌肉、脂肪、肝、脑、脾、肾和鳃等组织中均有表达,肝中的表达量显著高于其它组织(P<0.05),H-FABP基因的肌肉表达谱在齐口裂腹鱼和鲤鱼中存在明显差异:齐口裂腹鱼中的表达随生长发育呈上升趋势,在大体重鱼(500 g)中的表达显著高于小体重鱼(P<0.05),其表达与肌内脂肪含量呈显著正相关(R=0.370,P<0.05);H-FABP基因在鲤鱼生长发育中呈下降趋势,而小体重鱼(50～60 g)中的表达显著高于其它大体重鱼(P<0.05),其表达与肌内脂肪含量呈显著负相关(R=-7.083,P<0.01).据此推测,齐口裂腹鱼和鲤鱼肌肉组织H-FABP基因表达与肌内脂肪关联性的差异可能与2种鱼的生活环境不同有关.

己酮可可碱和血小板激活因子对冷冻保存的大熊猫精子受精能力的影响

在Ham’s F-10培养液中,添加了不同剂量的己酮可可碱(PF)或血小板激活因子(PAF),与大熊猫冷冻保存后解冻的精子在37℃水浴中孵育,通过测量孵育不同时间精子的活力、存活时间、顶体反应率、质膜完整率和异种穿卵率,来探讨PF、PAF对大熊猫冷冻精子体外受精能力的影响,结果显示:己酮可可碱、血小板激活因子均能影响大熊猫冷冻精子体外受精能力。其中:己酮可可碱以1 mg/mL处理剂量对提高大熊猫冷冻精子体外受精能力效果较好,总存活时间达(15.33±4.73)h,培养4h时体外异种穿卵率达51.44%,培养6 h时体外异种穿卵率为7.49%,与对照组差异极显著(P<0.01),并优于其它处理组;PAF 50 ng/mL处理剂量下的各质量评估指标优于100 ng/mL处理,但用PAF处理精液的时间超过2 h后即引起精子质量的显著下降。

大熊猫精浆中谷草转氨酶活性影响因素的初步探讨

在2004年度大熊猫繁殖季节(2～5月),对5只不同年龄雄性大熊猫的精浆中谷草转氨酶(GOT)活性进行测定,并初步探讨其含量高低的影响因素。结果显示:大熊猫精浆的GOT平均活性为194.89±77.40IU/100mL,GOT含量高低与精子活力呈极显著负相关(r=-0.66,P<0.01);随着年龄增加,GOT活性有升高趋势;在繁殖季节,GOT有下降趋势。

大熊猫精浆中PAF-AH和GOT水平与精液质量的关系

本研究检测了大熊猫精浆血小板激活因子乙酰水解酶(PAF-AH)和谷草转氨酶(GOT)活性,初步探讨了这些物质与大熊猫精液质量的关系。结果显示,大熊猫精浆存在PAF-AH和GOT,其平均水平分别为(56.76±60.86)mmol.min-1.mL-1和(1 948.9±774.0)IU/L,PAF-AH含量高低与精子活力呈高度负相关(R=-0.73,P<0.001),与精子运动状态呈负相关(R=-0.58,P<0.05);GOT含量高低与精子活力显著负相关(R=-0.66,P<0.01)。这些结果表明,大熊猫精浆PAF-AH和GOT活性之高低可作为评价大熊猫精液质量的参照指标。

精液质量参数与反复自然流产及胎儿发育停滞的相关性探讨

目的探讨男性精液质量参数与反复自然流产及胎儿发育停滞的相关性。方法筛选189例配偶不明原因反复自然流产或胎儿发育停滞两次以上的男性精液标本,参照WHO标准分析精子密度、精子活率和活力,涂片采用苏木清伊红染色后按照WIO严格标准进行精子形态学分析,与同期育龄男性精液质量参数进行比较。结果①复发性流产及胎儿发育停滞组年龄平均(33.72±5.55)岁,精液量(2.674±0.95)ml,精子密度(62.134±54.44)×106/ml,精子活率(50.90±26.74.)%,a级精于(21.704±l5.30)%,a+b级精子(36.87±20.35)%,正常形态精子百分率(12.56±5.68)%。其中精子活率、a级精子、(a+b)级精子及正常形态精子百分率低于WHO正常值参考标准。②与同期育龄男性比较,复发性流产及胎儿发育停滞组精液质量呈现下降趋势,但差异无统计意义。结论男性精液质量参数与反复自然流产及胎儿发育停滞之间的相关性尚不明确,男性精液质量对反复自然流产及胎儿发育停滞的影响作用尚需进一步研究。

齐口裂腹鱼PGC-1α基因编码区的克隆及其在肌肉组织中的表达

目的：获得齐口裂腹鱼过氧化物酶体增殖物激活受体Y辅助活化因子1a（PGC-1a）cDNA序列，探讨其在齐口裂腹鱼肌肉组织中的表达规律。方法：根据斑马鱼基因PGC-1a序列设计引物，提取齐口裂腹鱼肌肉组织总RNA，经RT-PCR扩增PGC-1a仪基因序列；利用半定量RT-PCR分析齐口裂腹鱼PGC-1a基因在红肌和白肌中的mRNA表达特性。结果：获得齐口裂腹鱼PGC-1a基因序列2633bp，GenBank登陆号为JNl95738，其中ORF为2631bp，编码876个氨基酸残基，与同鲤科的斑马鱼、草鱼和金鱼的同源性较高，为88％～93％，但与哺乳动物和禽类如人、小鼠、大鼠、猪、牛和鸡的同源性较低，为49％～50％。在基础状态下，PGC-1a在齐口裂腹鱼红肌中的表达显著高于白肌，禁食可显著诱导PGC-1a在红肌和白肌中的表达水平。结论-首次克隆得到齐口裂腹鱼PGC-1a基因序列，其在红肌中的表达显著高于白肌中，禁食可显著诱导其在红肌和白肌中的表达，为研究PGC-1a在齐口裂腹鱼肌肉中的作用提供了理论依据。

精液质量与季节关系探讨

目的探讨季节变化与精液量、pH值、精子密度、活率及活力的关系。方法用计算机辅助精子分析（CASA）技术,按照《WHO人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》,使用北京伟力公司WLJY9000仪器,对1386例育龄男性完整精液标本进行分析,并分为春季（3-5月）、夏季（6-8月）、秋季（9-11月）、冬季（12-2月）4组,分析比较各组精液参数。结果 1386名育龄男性精液量（2.78±0.89）ml,pH值（7.46±0.15）,精子密度（73.59±50.62）×10^6/ml,精子活率（65.71±19.39）%,a级精子（29.89±13.26）%,a＋b级精子（48.47±15.64）%。其中正常组924例（66.67%）,异常组462例（33.33%）。各组精液量、pH值、精子密度、活率及活力差异没有统计学意义。结论季节变化对精液参数没有显著影响。

计算机辅助分析精子运动能力在试管婴儿术中的应用

目的 用计算机辅助分析方法 (CASA)评价精子的运动能力 ,并探讨各参数与试管婴儿术成功率的关系 ,从男性方面确立临床上用于试管婴儿术预后的定量参数。方法 根据卵的受精情况分为受精率≥ 5 0 %组、受精率 <5 0 %组和受精率为 0三组 ;根据胚胎移植后妊娠情况分为妊娠组和非妊娠组 ,以代表试管婴儿术成功率的高低。对与精子运动有关的参数进行定量测定 ,用 t检验法确定与试管婴儿术的成功率高低有关的参数。结果 本试验共进行了 6 9个周期 ,实际完成了 6 4个 ,妊娠 2 0例 (包括生化妊娠和临床妊娠 )。体外受精率≥ 5 0 %组的精子活力、VAP、VSL 和 VCL 值四项精子运动参数以及正常形态精子百分比与体外受精率 <5 0 %组和体外受精率为 0组比较有高度显著性差异 (P<0 .0 1) ;妊娠组与非妊娠组上述各项参数的比较也有高度显著性差异 (P<0 .0 1) ,并且洗涤后的精子运动参数和正常形态精子百分比较洗涤前有显著提高 (P<0 .0 5 )。结论 试管婴儿术的成功率与精子的运动能力有关 ,定量参数 VAP、VSL、VCL 值和正常形态精子百分比可用于试管婴儿术的临床预后判断 ,精子的洗涤处理会改善精子的运动参数 。

人合子原核构型及早期卵裂与胚胎发育潜能的关系

目的:探讨胚胎早期卵裂及原核构型能否指导移植胚胎的选择及与胚胎发育潜力之间的关系。方法:根据早期卵裂时间及原核构型不同进行筛选而移植的129个体外受精(IVF)、卵胞浆内单精子注射(ICSI)周期,共1 032个正常受精卵为资料。根据受精卵原核构型的不同分为四组,结合构型类型及早期卵裂与否进行选择性移植,通过观察优质胚胎率、囊胚形成率、种植率和怀孕率,来评估合子原核构型和早期卵裂与胚胎发育潜力的关系。结果:最常见的原核构型为PN1(29.58%)及PN2(27.67%),接着是PN3(22.38%)和PN4(20.37%),而且这些构型与受精方式及精子穿卵的位点无关;与其它种类的原核构型相比,源于PN1和PN4原核构型的合子发育到优质胚胎及囊胚的比例显著增高(P<0.05);PN1和PN4原核构型的合子发育成的胚胎,其种植率和怀孕率亦显著升高(P<0.05);早期卵裂胚胎与晚卵裂胚胎相比,发育到优质胚及囊胚的胚胎数与种植率、怀孕率均显著增高(P<0.05)。结论:合子原核构型与胚胎早期卵裂时间能够指导移植胚胎的选择,对种植率及怀孕率的提高有一定的临床意义。

前列腺素PGF2α对冷冻保存的大熊猫精子受精能力的影响

以Ham′s F-10为基础液,添加了不同浓度的前列腺素PGF2α与大熊猫冷冻保存后解冻的精子在37℃水浴中孵育不同时间,通过检测精子的活力、存活时间、精子质膜完整性、顶体反应率和异种穿卵率来评估其对大熊猫冷冻精子体外受精能力的影响,结果显示:PGF2α能影响大熊猫冷冻精子体外受精能力。50μg/LPGF2α对大熊猫冷冻精子体外功能没有较大影响,较高浓度的PGF2α则会造成精子活力的损伤和精子顶体反应率降低,导致精子受精能力下降。

原发性无精子症患者遗传学病因分析

目的 :应用染色体分析对无精子症患者进行遗传学分析 ,并探讨其遗传效应及其对辅助生殖技术的影响。方法 :采用外周血培养对 37例无精子症患者进行染色体核型分析。结果 :37例无精子症患者中 47,XXY 8例 ;46 ,XX男性 2例 ;46 ,XY 2 2例 ;46 ,XY(Y =18) 3例 ;46 ,XY/4 7,XXY/4 8,XXXY 1例 ,47,XXY/4 6 ,XY 1例。结论 :对无精子症患者进行染色体及AZF基因诊断是可行的 。

添加抗氧化物维生素E对人类胚胎体外发育的影响

目的:探讨抗氧化物维生素E添加与人类胚胎体外发育潜力之间的关系。方法:选择2009年10月至2010年5月在我院进行常规体外受精-胚胎移植和卵胞浆内单精子注射的不孕患者106例,116个周期,共432个正常受精2个原核(2PN)来源的废弃胚胎,随机分为对照组和维生素E组,在维生素E组受精后第3天(D3)废弃胚胎的培养液中添加100μmol维生素E,对照组不添加,观察两组囊胚的形成情况,并通过荧光染料Hoechst33342对胚泡进行染色,检测囊胚的总细胞数。结果:维生素E组的早期囊胚、扩张囊胚、孵化囊胚发育率均高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);维生素E组孵化囊胚细胞总数(80.42±0.60)%高于对照组(76.11±0.82)%,差异有统计学意义(t=-7.365,P<0.05)。结论:添加维生素E能提高人类胚胎的体外发育率和胚胎质量。