长非编码RNA-p53诱导转录本通过靶向miR-1297调控高糖处理HK-2细胞的迁移和上皮间质转化

目的探讨长非编码RNA-p53诱导转录本(long intergenic non-protein coding RNAp53 induced transcript,LINC-PINT)对高糖(high glucose,HG)处理人肾小管上皮细胞HK-2迁移和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其分子机制。方法分别用5.5 mmol/L、30 mmol/L葡萄糖处理HK-2细胞,记为正常糖(normal glucose,NG)组、高糖(high glucose,HG)组。将HG组HK-2细胞分为HG+si-NC组、HG+si-LINC-PINT组、HG+miR-NC组、HG+miR-1297组、HG+si-LINC-PINT+anti-miR-NC组、HG+si-LINC-PINT+anti-miR-1297组。RT-qPCR检测LINC-PINT和miR-1297的表达水平,采用Transwell和Western blot检测HK-2细胞迁移和相关蛋白的表达,双荧光素酶报告实验鉴定LINC-PINT和miR-1297的靶向关系。结果与NG组比较,HG组HK-2细胞中,LINC-PINT[(1.00±0.05)比(2.87±0.19)]和miR-1297[(1.02±0.07)比(0.43±0.04)]的表达水平分别显著升高和降低,迁移细胞数[(89.37±4.56)比(212.35±13.28)]以及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)[(0.31±0.02)比(0.79±0.07)]、Vimentin[(0.22±0.01)比(0.58±0.03)]、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth actin,α-SMA)[(0.19±0.02)比(0.53±0.05)]和纤维粘连蛋白(fibrimine,FN)[(0.12±0.01)比(0.34±0.04)]的表达水平显著升高,E-钙黏蛋白(E-cadherin)[(0.69±0.07)比(0.27±0.02)]的表达水平显著降低(P<0.05)。抑制LINC-PINT表达或过表达miR-1297显著降低迁移细胞数[(197.28±10.25)比(137.53±7.59),(216.58±13.87)比(145.29±6.82)]、MMP-2[(0.83±0.05)比(0.47±0.04),(0.78±0.05)比(0.42±0.04)]、波形蛋白[(0.62±0.05)比(0.36±0.02),(0.56±0.04)比(0.32±0.03)]、α-SMA[(0.51±0.03)比(0.28±0.02),(0.56±0.03)比(0.30±0.02)]和FN[(0.37±0.03)比(0.23±0.03),(0.36±0.03)比(0.25±0.02)]的表达水平,显著升高E-cadherin[(0.24±0.02)比(0.58±0.03),(0.23±0.02)比(0.55±0.04)]的表达水平(P<0.05)。LINC-PINT靶向调控miR-1297的表达(P<0.05)。下调miR-1297逆转了抑制LINC-PINT表达对HG处理HK-2细胞迁移和EMT的影响(P<0.05)。结论LINC-PINT通过靶向miR-1297调控HG处理HK-2细胞的迁移和EMT。