保留指数原理在中药材农药残留快速筛查和定量分析中的研究进展

农药残留影响到了中药的质量安全和国际声誉,逐渐受到民众和监管部门的广泛关注。随着人们对高品质绿色中药产品的需求增多,监管部门对中药产品农药残留的检测频率和检测种类也将明显增多,当务之急是建立具有快速、简便、高通量和低检测成本等特点的农药残留测定方法。笔者概述了中药材中农药残留分析的研究现状,总结了中药材农药残留测定面临的困难,介绍了保留指数原理应用于中药材农药残留分析的优势。重点介绍了保留指数原理结合Smart Database-Pesticides database数据库应用于八角茴香中12种拟除虫菊酯类农药化合物的测定,川芎中74种农药化合物的测定和西洋参中130种农药化合物测定的研究进展。本研究的目的是让保留指数原理在中药材农药残留快速分析中得到更多普及应用。

风寒感冒颗粒质量标准的建立

目的:完善风寒感冒颗粒的药品质量标准,更好地控制产品的质量。方法:建立处方药味葛根、紫苏叶、白芷、防风、陈皮、甘草的TLC鉴别法;建立盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、葛根素含量测定的HPLC法,盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱含量以乙腈-0.02 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺,用磷酸调pH至2.7)(3∶97)为流动相,检测波长:210 nm,柱温:30℃;葛根素含量以甲醇-水(24∶76)为流动相;检测波长:250 nm,柱温:30℃。结果:建立的TLC鉴别图谱均与相应的对照药材或对照品在相同位置上显现相同颜色的斑点,且阴性样品无干扰。HPLC法测定盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量、葛根素含量,进样量分别在0.023~0.451,0.017~0.336,,0.167~1.252μg范围内线性关系良好(r为0.999 8~1.000 0);平均回收率分别为99.91%,99.79%,101.51%,RSD均小于3%(n=9)。结论:新建立的方法专属性强,稳定性好,重复性好,能够有效评价和控制风寒感冒颗粒的质量。

风寒感冒颗粒中含量测定方法研究

目的:建立测定风寒感冒颗粒中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和葛根素含量的HPLC法,制定含量参考限度。方法:盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱含量以Sunfire C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.02 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺,用磷酸调pH至2.7)(3∶97)为流动相,检测波长210 nm,柱温30℃;葛根素含量以Agilent ZORBAX Eclipse plus C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-水(24∶76)为流动相;检测波长250 nm,柱温30℃。结果:三种成分进样量分别在0.0226~0.4514μg、0.0168~0.3359μg、0.1670~1.2524μg范围内线性关系良好(r为0.9999~1.0000);精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于2%;平均回收率分别为99.91%、99.79%、101.51%,RSD均小于3%。结论:新建立的方法专属性强,稳定性好,重复性好,可用于该制剂中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和葛根素的含量测定,测定了280批次样品的数据,拟定了含量参考限度值。

基于多组分含量测定和化学计量学的风寒感冒颗粒整体质量评价研究

目的建立一种超高效液相色谱(UHPLC-UV)波长切换法同时测定风寒感冒颗粒中D-苦杏仁苷、葛根素、橙皮苷等14种化学成分的含量,结合化学计量学分析不同来源样品的质量差异。方法色谱柱为AgilentPoroshell120EC-C18(150 mm×2.1 mm,2.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,切换波长(210、254、310 nm)对5家生产企业68批样品中14种化学成分含量进行测定;并使用雷达图分析、相似度评价、热图聚类分析和主成分分析法对数据进行统计分析。结果 68批样品中各成分质量分数分别为D-苦杏仁苷0.063~3.885 mg/g、3′-羟基葛根素0.012~1.540 mg/g、葛根素0.036~4.017 mg/g、3′-甲氧基葛根素0.016~1.837 mg/g、葛根素-6″-O-木糖苷0.004~0.449 mg/g、芹糖葛根素苷0.021~2.076mg/g、大豆苷0.010~1.527 mg/g、升麻素苷0.007~0.471 mg/g、5-O-甲基维斯阿米醇苷0.062~1.029 mg/g、橙皮苷0.210~8.453 mg/g、迷迭香酸0.001~0.237 mg/g、水合氧化前胡素0.007~0.204 mg/g、甘草酸0.056~1.311 mg/g、氧化前胡素0.002~0.042 mg/g。化学计量学分析表明,同一厂家不同批次样品的整体质量一致性较好,但不同厂家之间样品的整体质量一致性存在较大差异。结论建立的基于UHPLC波长切换法的多组分含量测定方法简便、重复性好、专属性强,可为风寒感冒颗粒的整体质量评控提供方法参考。

续断来源考证、化学成分及药理作用综述

目的:对续断的来源考证、化学成分和药理作用进行综述,回顾续断确定来源的发展历程,并通过化学成分和药理作用的总结,为续断的考证、进一步研究及应用提供参考。方法:以“续断”、“川续断”、“考证”、“化学成分”、“药理作用”等作为关键词,在中国知网、中国生物医学文献服务系统、万方医学网、Pubmed、维普网等数据库进行检索,整理相关文献并进行综述。结果与结论:目前,续断现行版药典来源是川续断科植物川续断Dipsacus asper Wall.Ex Henry的干燥根。川续断化学成分包含三萜皂苷类、环烯醚萜类、生物碱类、酚醛酸类及其他成分,具有预防复发性自然流产、骨保护、神经保护、肝脏保护、抗衰老等药理作用。

沙棘与2种易混淆品的鉴别

目的鉴别沙棘Hippophae rhamnoides L.及其2种混淆品。方法采用传统性状鉴定、光学显微技术、薄层色谱和高效液相色谱,从外观形状、显微特征、化学成分等方面区分沙棘及其2种混淆品。结果在性状特征中,沙棘具短小果梗或果梗痕,种子为褐色,呈斜卵形,中间有一纵沟;2种混淆品无果梗,种子黄棕色,呈狭卵形,上有数个蜂窝状凹陷,先端渐尖,有3条双线形裂缝。在显微特征中,沙棘具盾状毛,果皮表皮细胞无气孔;混淆品具单细胞非腺毛,果皮表皮细胞有气孔;两者均含有黄酮类成分,但在化学成分上存在一定差异。结论该方法可有效区分沙棘与其混淆品,可为相关鉴别提供参考。

UPLC-QQQ-MS/MS法同时测定不同产地知母中10种成分

目的建立UPLC-QQQ-MS/MS法同时测定知母中10种成分的含有量。方法知母50%甲醇提取物的分析采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 7μm);流动相0. 01%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0. 4 m L/min;柱温30℃。质谱采用电喷雾电离源;多反应监测;正负离子交替扫描。结果 10种成分在各自范围内线性关系良好(r>0. 999 6),平均加样回收率97. 1%~101. 3%,RSD 1. 19%~2. 59%。不同产区知母整体质量相对稳定,知母皂苷BⅡ、芒果苷、知母皂苷AⅢ可作为评价知母质量的指标成分。结论该方法简单、灵敏、准确,可用于知母的质量控制。

续断鉴别及川续断皂苷Ⅵ的含量测定

目的:《中国药典》2020版第一部"续断鉴别及含量测定"项下的方法较为复杂,应重新建立续断的薄层鉴别方法及川续断皂苷Ⅵ的含量测定方法。方法:采用薄层鉴别法(TLC)对续断及其有效成分川续断皂苷Ⅵ进行鉴别。建立高效液相色谱法(HPLC)测定川续断皂苷Ⅵ,色谱柱为C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),柱温35℃,流动相为乙腈∶水(30∶70),体积流量1mL/min;检测波长212nm。结果:薄层鉴别方法具有较好的分离度及较强的专属性。川续断皂苷Ⅵ在一定范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为101.74%(RSD=1.16%)。结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于续断的薄层鉴别及川续断皂苷Ⅵ的含量测定。

僵蚕及其附属物中白僵菌素含量研究

目的建立HPLC法测定僵蚕及其附属物中白僵菌素的含量。方法采用Diamonsil C;(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(75∶25)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为215 nm,柱温为30℃。结果白僵菌素在0.01~0.12 mg·mL^(-1)范围内线性关系良好(R^(2)=0.9999)。从整体上看,不同产地僵蚕中白僵菌素含量有一定差异,以云南最高,广西最低;僵蚕附属物(蚕砂、外粉)含有少量的白僵菌素。结论所建立的方法准确、简便、重复性良好,可用于僵蚕的质量评价。僵蚕的质量参差不齐,僵蚕附属物有作为生物防治的潜力。

基于HS-SPME/GC-QQQ-MS/MS的冬虫夏草“腥气”辨识方法建立与应用

目的:建立和应用一种基于顶空-固相微萃取-气相色谱-三重四极杆质谱联用技术的冬虫夏草"腥气"分析方法。方法:采用Inert Cap Pure-WAX毛细管柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),进样口温度250℃,分流比5∶1,载气为高纯氦气,色谱柱流量1.43 mL·min^(-1),线速度43.3 cm·s^(-1),吹扫流量3.0 mL·min^(-1);程序升温(初始温度50℃,保持5 min,以10℃·min^(-1)升温至250℃,保持10 min;柱平衡时间2.0 min)。离子源为电子轰击离子源(EI),离子源温度200℃,质谱监测模式为多反应监测。结果:收集到7批冬虫夏草正品,其中四川3批,青海3批,西藏1批;6批伪品,其中四川3批,贵州2批,新疆1批。在冬虫夏草中共筛查出81种挥发性成分,按化学结构可分为13类(酯类、酮类、醛类、烯类、酚类、酸类、醇类、苯类、醚类、吡嗪类、烃类、含氮杂环类、含氧杂环类),表明冬虫夏草的"腥气"是复合气味。不同产地冬虫夏草中挥发性成分种类无明显差异,提示西藏(那曲),青海(玉树、果洛)和四川(理塘、壤塘、色达)的冬虫夏草中挥发性物质较为一致,即组成"腥气"的化学成分没有质(种类)的差异。但不同产区冬虫夏草中部分挥发性物质的含量存在较大差异,即组成"腥气"的化学成分有量(含量)的差异。筛选出了16个含量差异较大的化学成分,包括丙二醇甲醚乙酸酯,乙酸己酯,丙位辛内酯,2-辛酮,正辛醛,(E)-2-庚烯醛,癸醛,(E)-壬烯醛,(E,E)-2,4-壬二烯醛,异戊酸,正戊酸,正己酸,庚酸,壬酸,正辛醇,2-乙基吡嗪,可作为该药材产地鉴别的标志物进行研究。冬虫夏草正品与伪品之间挥发性成分存在较大的差异,筛查出了34个化学成分,包括乙酸乙酯,苯乙酮,2-乙基己醇,乙酸己酯,2,3-丁二酮,2-辛酮,2-壬酮,2-莰酮,异佛尔酮,甲基壬基甲酮,2-苯基-1-丙烯,4-乙基-2-甲氧基苯酚,芳樟醇,2-异丙基-5-甲基环己醇,3-烯-2-酮,2-茨醇,二甲基二硫,二甲基三硫,正辛醛,苯甲醛,苯乙醛,香草醛,α-蒎烯,β-蒎烯,双戊烯,苯乙烯,4-甲基苯酚,桉叶油醇,乙二醇单丁醚,2-甲基吡嗪,2-甲基萘,1-甲基萘,丙位癸内酯和5-乙基-2-甲基-吡啶,这些化合物可能是该药材真伪鉴别的标志物。结论:建立的冬虫夏草"腥气"辨识方法具有高灵敏度、准确和简便的特点,可为其他中药材的挥发性成分分析提供参考。

一测多评法同时测定补骨脂中16种化学成分的含量

目的建立补骨脂中16个化学成分的一测多评分析方法,结合化学计量学评价不同批次补骨脂药材的质量差异。方法采用高效液相色谱法,以异补骨脂素为内参物,测得待测成分的相对校正因子,在不同色谱仪和色谱柱上考察每个化学成分的相对校正因子的稳定性和耐用性;比较一测多评法和外标法测定结果的差异,以此验证一测多评法在补骨脂中应用的准确性。结果在建立的色谱条件下,补骨脂中15种化学成分相对于异补骨脂素的相对校正因子准确性较高,耐用性较好,且在不同实验条件下重现性良好;2种分析方法所得结果无显著差异。不同批次间补骨脂的化学成分群一致性较好,但不同化学成分的含量差异较大。结论新建立的同时测定补骨脂中16个化学成分的一测多评法,能为更加全面地评价不同来源补骨脂的整体质量提供参考。