妊娠期高血压疾病患者胎盘组织叶酸代谢基因MTR的表达水平及其作用机制研究

目的研究叶酸代谢相关基因甲硫氨酸合成酶(methionine synthase,MTR)在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的差异表达以及对于人绒毛滋养层细胞HTR8迁移及侵袭能力调控的机制研究。方法2018年1月~2020年12月在成都市龙泉驿区妇幼保健院分娩的30例妊娠期高血压,28例子痫前期和20例重度子痫前期患者及25例正常产妇作为研究对象,分娩时采集研究对象胎盘组织。使用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR detecting system,qPCR)及蛋白质印迹法(western blotting,WB)检测了各组胎盘组织中MTR,上皮型钙黏附蛋白(E-Cadherin,E-Cad),锌指E盒结合蛋白-1(zinc finger E-box binding protein1,ZEB1)基因转录及蛋白表达情况。进一步通过siRNA敲减人绒毛滋养层细胞HTR8中MTR基因的表达,研究MTR对于E-Cadherin和ZEB1基因的调控作用。通过Transwell迁移及侵袭实验验证敲减MTR后对于HTR8细胞迁移和侵袭的影响。结果与对照组相比,随着妊娠期高血压疾病分期的进展,子痫前期与重度子痫前期患者胎盘组织中E-Cadherin的表达增加(1.14±0.35,1.53±0.41 vs 1.00±0.30),胎盘组织中MTR mRNA的表达量逐渐增加(1.72±0.17,2.58±0.13 vs 1.00±0.33),妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中ZEB1的表达量下降(0.48±0.10,0.13±0.06 vs 1.00±0.22),差异具有统计学意义(F=13.28,67.1,65.41,均P<0.01)。随着疾病分期进展,MTR及E-Cadherin的蛋白表达量明显增加,而ZEB1的蛋白表达量明显降低。siRNA可以显著抑制HTR8中MTR基因mRNA的表达,敲低MTR基因后可显著抑制上皮相关标志物E-Cadherin基因mRNA的表达,可以显著促进间充质相关标志物ZEB1基因mRNA的表达,差异具有统计学意义(t=5.906,6.715,9.777,均P<0.01)。敲减HTR8细胞中MTR基因可显著促进迁移能力,侵袭实验结果显示敲减MTR基因可促进HTR8细胞的侵袭能力,差异具有统计学意义(t=6.241,22.37,均P<0.01)。结论妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中MTR基因表达上调,MTR可通过调节HTR8细胞EMT相关基因E-Cadherin,ZEB1表达,从而抑制其迁移及侵袭能力。MTR可能成为妊娠期高血压疾病潜在的治疗靶点之一。

血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF对早发型重度子痫前期的预测价值

目的探讨血清血小板反应蛋白1(TSP-1)、血管内皮生长因子(VEGF)及TSP-1/VEGF对早发型重度子痫前期(EOSP)的预测价值。方法选取2019年8月至2020年8月成都市龙泉驿区第一人民医院/四川大学华西医院龙泉医院收治的孕28~33周EOSP孕妇38例作为病例组,同期门诊正常产检的孕28~33周健康孕妇40例作为对照组,以及行孕中期唐氏筛查(孕15~20周)并分娩的孕妇90例为验证组。分析TSP-1、VEGF、TSP-1/VEGF对EOSP的预测价值及其与不良妊娠结局的相关性。结果病例组血清TSP-1水平及TSP-1/VEGF均高于对照组(P<0.001),血清VEGF水平低于对照组(P<0.001);受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清TSP-1、VEGF、TSP-1/VEGF均对EOSP有一定预测价值,截断值分别为2.44 ng/mL、319.21 pg/mL、9.13,TSP-1/VEGF预测EOSP的曲线下面积(AUC)最大,为0.750。相关性分析显示,血清TSP-1水平与VEGF水平呈负相关(r=-0.265,P<0.001),TSP-1水平与不良妊娠结局(新生儿出生体重、Apgar 1 min评分、Apgar 5 min评分)呈负相关(r=-0.588、-0.621、-0.593,均P<0.001),而血清VEGF水平与不良妊娠结局呈正相关(r=0.728、0.700、0.712,均P<0.001),TSP-1/VEGF与不良妊娠结局呈负相关(r=-0.817、-0.834、-0.823,均P<0.001)。验证组中,EOSP组TSP-1水平及TSP-1/VEGF高于非EOSP组,VEGF水平低于非EOSP组,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论TSP-1/VEGF对EOSP有较高的预测价值,TSP-1/VEGF与不良妊娠结局呈负相关。

SMG1在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的探讨生殖器形成抑制基因-1(SMG1)蛋白在卵巢癌(OC)组织中的表达及临床意义。方法收集2018年2月至2020年2月在成都市龙泉驿区妇幼保健院通过手术切除的116例OC组织,110例卵巢良性上皮肿瘤组织及120例因子宫肌瘤切除的正常卵巢组织。SMG1蛋白水平通过免疫组织化学法评估;生存分析行Kaplan-Meier法评估;影响预后的相关因素通过Cox法进行。结果SMG1蛋白在OC组织中高表达率明显低于卵巢良性上皮肿瘤组织和正常卵巢组织中的阳性表达率(P<0.05)。SMG1蛋白水平与TNM分期、肿瘤分化程度以及淋巴结转移有关(P<0.05)。OC组织中SMG1蛋白高表达组患者3年生存率为69.44%,高于SMG1蛋白低表达组患者(36.25%)(P<0.05)。SMG1蛋白、淋巴结转移、肿瘤分化程度、TNM分期均是OC患者死亡的影响因素(P<0.05)。结论SMG1蛋白在OC患者组织中低表达,是预测OC患者预后的可靠辅助指标。