表没食子儿茶素没食子酸酯增强卡莫司汀抗肿瘤作用的体外研究

采用MTT法及Comet assay(彗星实验分析方法)研究了表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与卡莫司汀联用对人肺癌细胞A549的生长抑制率及DNA损伤的影响,结果表明:联合应用EGCG能降低卡莫司汀对人肺癌细胞A549的IC50。卡莫司汀单用对人肺癌细胞A549的IC50为187.46μg/ml,当用无毒浓度25μg/ml和50μg/ml的EGCG与卡莫司汀联用时,卡莫司汀对人肺癌细胞A549的IC50分别下降为139.56μg/ml和154.02μg/ml。EGCG还能增强卡莫司汀引起的人肺癌细胞A549 DNA的损伤,彗星尾矩值由单用时的19.02±14.60上升为联用时的33.07±10.47。结果说明EGCG能增强卡莫司汀对人肺癌细胞A549造成的DNA损伤,从而增强其抗肿瘤活性。

红毛毡提取物体外抗肿瘤的实验研究

目的:探讨红毛毡提取物的体外抗癌作用。方法:用MTT法检测红毛毡提取物对13种肿瘤细胞株体外生长的抑制作用。结果:红毛毡提取物对所试肿瘤细胞株的体外生长均具有较强的抑制作用,其中对急性T细胞白血病细胞Jurkat、人肾癌细胞OS-RC-2、人慢性髓质白血病细胞K562、人肺癌细胞A549和人乳腺导管癌细胞MDA-MB-435s的作用强,半数抑制浓度(IC50)分别为9.25±3.68、10.75±2.40、10.90±3.74、11.21±3.07和12.66±1.19μg.ml-1,其次是对人食管癌细胞Eca-109、人胰腺癌细胞PANC-1、人黑色素瘤细胞A375、人肝癌细胞QGY-7703和人胃癌细胞SGC-7901,半数抑制浓度(IC50)分别为14.36±2.26、15.36±6.73、15.48±1.98、17.21±10.32和19.01±5.95μg.ml-1。结论:红毛毡提取物具有广谱抗肿瘤作用。

表没食子儿茶素没食子酸酯对卡莫司汀处理后张氏肝细胞DNA损伤的保护作用

采用MTT法、Cometassay(彗星实验)和流式细胞分析法研究了表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对卡莫司汀引起的张氏肝细胞DNA损伤的保护作用及其机制。结果表明:EGCG能阻止卡莫司汀所致张氏肝细胞的生长抑制,卡莫司汀单用对张氏肝细胞的IC50为43.31μg/ml,当用无毒浓度25μg/ml和50μg/ml的EGCG与卡莫司汀联用时,对张氏肝细胞的IC50分别提高至52.46μg/ml和46.65μg/ml。彗星分析结果表明EGCG还能减小卡莫司汀引起的张氏肝细胞DNA损伤,彗星Olive尾矩值由单用时的9.07±5.48降为联用时的6.02±2.46。EGCG还能减小卡莫司汀所致张氏肝细胞的早期凋亡率,25μg/ml的EGCG和20μg/ml的卡莫司汀联合处理4、6h和24h时,早期凋亡率分别从4.53±0.64(%)、6.01±0.14(%)、2.27±0.32(%)降至3.04±0.47(%)、5.61±0.10(%)、1.14±0.23(%)。说明EGCG能保护卡莫司汀对正常肝细胞的杀伤,其机理是它能减少这类药物引起的细胞DNA损伤,降低卡莫司汀所致细胞早期凋亡。

表没食子儿茶素没食子酸酯对张氏肝细胞DNA修复基因表达的影响

采用MTT法、Comet assay(彗星实验)和RT-PCR法研究了表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对DNA损伤剂卡莫司汀作用后张氏肝细胞的DNA损伤及相关修复基因表达的影响。结果表明:EGCG能阻止卡莫司汀所致张氏肝细胞的生长抑制,卡莫司汀单用对张氏肝细胞的IC_(50)为43.31μg/mL,当用25μg/mL和50μg/mL.的EGCG与卡莫司汀联用时,对张氏肝细胞的IC_(50)分别提高至52.46μg/mL和46.65μg/mL。彗星分析结果表明,EGCG还能减小卡莫司汀引起的张氏肝细胞DNA损伤,彗星Olive尾矩值由单用时的9.07+5.48降为联用时的6.02±2.46。EGCG还能使卡莫司汀所致张氏肝细胞的DNA修复基因mgmt和alkb的表达下降得到回升,卡莫司汀(20μg/mL)处理张氏肝细胞24h后,mgmt和alkb的mRNA水平(与外参β-actin的比值)比未处理组明显下降(分别由0.451±0.041和0.356±0.120下降至O.323±0.046和0.046±0.017,p<0.05或p<0.01),当EGCG与卡莫司汀联合处理24h后,二者的mRNA水平基本恢复到正常(p>0.05),与外参β-actin的比值分别为0.451±0.041和0.451±0.041。说明EGCG能保护卡莫司汀对正常肝细胞的DNA损伤,因为它能逆转卡莫司汀所致正常肝细胞内DNA修复酶基因mgmt和alkb的表达下降。