雌二醇对骨髓基质细胞核结合因子α_1基因及成骨细胞生成的影响(英文)

目的研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的条件培养体系中,17β-雌二醇(E2)对其核结合因子α1(Cbfα1)基因表达的影响,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。方法取自1只3月龄雌性SD大鼠骨髓基质细胞在生长培养基中传代后,用1,25(OH)2D3和地塞米松(DEX)诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化。应用半定量RT-PCR技术,观察不同浓度E2对骨髓基质细胞分化过程中核结合因子α1mRNA表达的影响,以α-磷酸奈酚为底物,测定细胞碱性磷酸酶的活性,VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1mRNA的表达,且呈剂量依赖性。E2浓度为0,1×10-10,1×10-8和1×10-6mmol/L时,Cbfα1mRNA的表达量分别为23.4%±1.8%,21.8%±2.0%,15.8%±1.5%(t=6.3,P<0.01)和5.8%±0.8%(t=17.8,P<0.01)。Northernblot结果显示Cbfα1mRNA的表达量分别为4.22±0.11,2.51±0.12(t=21,P<0.01),1.88±0.10(t=31,P<0.01)和1.17±0.09(t=41,P<0.01)。ALP活性随E2浓度增加而降低,在上述E2浓度时,ALP活性分别为(42.6±2.5)U/g,(17.9±2.0)U/g(t=15,P<0.01),(10.8±1.5)U/g(t=21,P<0.01)和(3.6±0.7)U/g(t=29,P<0.01)。细胞Ⅰ型胶原的含量随E2浓度增加而降低。结论E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1mRNA的表达。

雌二醇对骨髓基质细胞向成骨细胞分化的影响

目的 研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中 ,17β 雌二醇 (E2 )对其骨形态发生蛋白受体 (BMPR)ⅠA及核结合因子α1(Cbfα1)mRNA表达的影响 ,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。方法 用 1,2 5 (OH) 2 D3和地塞米松(DEX)诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化 ,应用RT PCR和Northernblot技术 ,观察不同浓度E2对骨髓基质细胞分化过程中BMPR ⅠA及Cbfα1mRNA表达的影响 ,以α 磷酸奈酚为底物测定细胞碱性磷酸酶的活性 ,VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果 E2能明显抑制骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中BMPR ⅠA及Cbfα1mRNA的表达 ,且呈剂量依赖性 ,并被Northernblot结果所证实。ALP活性随E2浓度增加而降低 ,细胞Ⅰ型胶原的合成量随E2浓度增加而减少。结论 E2能明显抑制体外培养的骨髓基质细胞分化过程中BMPR ⅠA及Cbfα1mRNA的表达 ,降低成骨细胞生成。

17β-雌二醇对骨髓基质细胞骨形态发生蛋白受体ⅠA、ⅠB mRNA表达的影响

目的 :研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中 ,17β -雌二醇 (E2 )对其骨形态发生蛋白受体(BMPR)ⅠA ,ⅠBmRNA表达的影响 ,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。方法 :用 1,2 5 (OH) 2 D3 和地塞米松 (DEX)诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化 ,应用半定量RT -PCR技术 ,观察不同浓度E2 对骨髓基质细胞分化过程中BMPR -ⅠA ,ⅠBmRNA表达的影响 ,以α-磷酸奈酚为底物测定细胞碱性磷酸酶的活性 ,VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果 :E2 能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中BMPR -ⅠAmRNA的表达 ,且呈剂量依赖性 ,随E2浓度增加 ,BMPR -ⅠAmRNA从 (2 3 7± 1 7) %降至 (16 3± 1 5 ) % (P <0 0 5 )和 (8 3± 1 2 ) % (P <0 0 1) ;BMPR -ⅠBmRNA随E2 浓度增加而增加 ,从 (1 3± 0 6 ) %增至 (5 7± 2 0 ) % (P <0 0 5 )和 (15 3± 3 0 ) % (P <0 0 1)。ALP活性随E2 浓度增加而降低 ,从 (42 6± 2 5 )U·L-1·g-1protein降至 (10 8± 1 5 )U·L-1·g-1protein和 (3 6± 1 7)U·L-1·g-1pro tein(P <0 0 1) ;细胞Ⅰ型胶原的含量随E2 浓度增加而减少。结论 :E2 能明显抑制体外培养的骨髓基质细胞分化过程中BMPR -ⅠAmRNA的表达 ,降低成骨细胞生成。

雌二醇对骨髓基质细胞核结合因子α1基因表达的影响

目的 :研究骨髓基质细胞 (MSCs)在向成骨细胞(OB)分化的条件培养体系中 ,17β 雌二醇 (E2 )对其核结合因子α1(corebindingfactorα1,Cbfα1)基因表达的影响 ,探讨E2对OB生成的作用及绝经后高转换骨代谢的可能机制 .方法 :取自 3mo龄雌性SD大鼠MSCs在生长培养基中传代后 ,用1,2 5 (OH) 2 D3 和地塞米松 (DEX)诱导MSCs向OB分化 .应用半定量RT PCR技术 ,观察不同浓度E2 对MSCs分化过程中Cbfα1mRNA表达的影响 ;以α 磷酸奈酚为底物 ,测定细胞碱性磷酸酶 (ALP)的活性 ;VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量 .结果 :E2 能明显抑制MSCs分化过程中Cbfα1mR NA的表达 ,从 (2 3.4± 1.8) %降至 (15 .8± 1.5 ) %和 (5 .8± 0 .8) % (P <0 .0 5 ) ;细胞ALP活性随E2 浓度增加而降低 ,从(70 6± 37)nkat·g-1(protein)降至 (6 3± 5 )nkat·g-1(P <0 .0 5 ) .E2 降低细胞Ⅰ型胶原的合成 ,用VanGieson染色细胞 ,随着E2 浓度的增加 ,胞质染色由鲜红、淡红到黄色 .结论 :E2能明显抑制MSCs分化过程中Cbfα1mRNA的表达 ,减少OB的生成 .

17β-雌二醇对成骨细胞生成的作用

目的 研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中 ,17β 雌二醇 (E2 )对其核结合因子α1(Cbfα1)及过氧化物酶增殖活化受体γ2 (PPAR γ2 )mRNA表达的影响 ,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。方法 1,2 5 (OH ) 2 D3 和地塞米松 (DEX)诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化 ,应用半定量RT PCR及Northernblot技术 ,观察不同浓度E2对骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1及PPAR γ2mRNA表达的影响 ,以α 磷酸奈酚为底物 ,测定细胞碱性磷酸酶 (ALP)的活性 ,VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果 E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1mRNA的表达 ,E2浓度为 (0 10 -6)mol/L时 ,Cbfα1mRNA的表达量从 (2 5 0± 3 3 ) %降至 (14 5± 1 3 ) % (P <0 0 1)和 (6 5± 1 9) % (P <0 0 1) ;E2能明显促进骨髓基质细胞在分化介质中PPAR γ2mRNA的表达 ,在上述E2浓度时 ,PPAR γ2mRNA的表达从 (1 75± 0 5 ) %增至 (9 5± 2 1) % (P <0 0 1)和 (19 3± 3 0 ) % (P <0 0 1) ;Northernblot结果显示随着E2浓度的增加 ,CbfαlmRNA的表达量从 4 42± 0 3 9降至 1 88± 0 16(P <0 0 1)和 1 2 0± 0 11(P <0 0 1) ;PPAR γ2mRNA的表达量从 1 47± 0 12增至 2 81±0 2 2 (P <0 0 1)和 4 0 2± 0 3 6(P

雌二醇对骨形态发生蛋白受体表达的影响(英文)

目的:研究骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中,雌二醇对其骨形态发生蛋白受体(BMPR)ⅠA,ⅠBmRNA表达的影响,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用,试阐明绝经后高转换骨代谢始动环节的可能机制。方法:SD大鼠骨髓基质细胞在生长培养基中传代培养后,用1,25(OH)2D3和地塞米松(DEX)诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化,17β-雌二醇(E2)处理培养细胞,观察E2对骨髓基质细胞分化过程中骨形态发生蛋白受体ⅠA、ⅠBmRNA、碱性磷酸酶(ALP)活性和Ⅰ型胶原合成的影响,β-actin作内对照半定量RT-PCR分析骨形态发生蛋白受体ⅠA,ⅠBmRNA的表达,以α-磷酸奈酚为底物,测定细胞碱性磷酸酶的活性,VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果:E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中BMPR-ⅠAmRNA的表达,且呈剂量依赖性,随E2浓度增加(0～1×103nmol/L)BMPR-ⅠAmRNA从(27.0±3.4)%降至(17.0±1.8)%(t=5.2,P<0.01)和(9.3±1.6)%(t=9.2,P<0.01);BMPR-ⅠBmRNA随E2浓度增加而增加,从(2.0±0.8)%增至(4.8±1.5)%(t=3.3,P<0.05)和(17.2±2.2)%(t=13,P<0.01)。Northernblot结果显示在上述E2浓度时BMPR-ⅠAmRNA的表达从4.21±0.36降至1.24±0.10(t=18.2,P<0.01);BMPR-ⅠBmRNA的表达从1.72±0.11增至3.73±0.31(t=12.2,P<0.01)。ALP活性随E2浓度增加而?

不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1和PPAR-γ2 mRNA表达的影响(英文)

背景绝经后骨质疏松的病理生理机制尚未完全阐明,研究表明骨丢失与雌激素缺乏相关,后者可导致多种细胞因子生成增加,继而引起成骨细胞和破骨细胞生成增多,骨吸收增强。雌二醇能否改变骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1和PPAR-γ2mRNA的表达进而影响其向成骨细胞分化尚不清楚。目的研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中,17β-雌二醇对其核结合因子α1(Cbfα1)及过氧化物酶增殖活化受体γ2(PPAR-γ2)mRNA表达的影响,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。设计非随机对照研究。地点和对象所有实验均在成都军区总医院检验科和成都百奥生物技术有限公司完成,分离骨髓基质细胞所需大鼠由成都中医药大学实验动物研究中心提供。干预1,25(OH)2D3和地塞米松诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化,用不同浓度[(0～1)×10-6mol/L]雌二醇对细胞分化过程进行干预。主要观察指标应用半定量RT-PCR及Northernblot技术,观察不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1及PPAR-γ2mRNA表达的影响。结果雌二醇能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Cbfα1mRNA的表达,雌二醇浓度为[(0～1)×10-6mol/L]时,Cbfα1mRNA的表达量从(25.0±3.3)%降至(19.8±2.2)%(t=2.62,P<0.05),(14.5±1.3)%(t=5.92,P<0.01)和(6.5±1.9)%(t=9.72,P<0.01);

17β-雌二醇对大鼠骨髓基质细胞PPAR-γ_2 mRNA表达的影响

目的 研究 17β 雌二醇 (E2 )对大鼠骨髓基质细胞过氧化物酶增殖物活化受体γ2 (PPAR γ2 )mRNA表达的影响 ,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。方法 用 1,2 5 (OH) 2 D3 和地塞米松 (DEX)诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化 ,应用半定量RT PCR及Western印迹技术 ,观察不同浓度E2 对骨髓基质细胞分化过程中PPAR γ2 mRNA及蛋白表达的影响 ,这些细胞的碱性磷酸酶 (ALP)活性和Ⅰ型胶原含量也被测定。结果 E2 能显著促进骨髓基质细胞在分化介质中PPAR γ2 mRNA及蛋白的表达 ,且呈剂量依赖性。E2 浓度为 10 -6mol/L时 ,PPAR γ2 mRNA的表达从 (1.3± 0 .5 ) %增至 (17.7± 2 .5 ) % (P <0 .0 1) ;PPAR γ2 蛋白的表达从 (1.16± 0 .10 ) %增至 (4 .0 8± 0 .13 ) % (P <0 .0 1)。细胞ALP活性明显受E2 的抑制 ,在上述E2 浓度时ALP的活性从 (4 2 .6± 2 .5降至 3 .6± 0 .7)mU/mg蛋白 (P <0 .0 0 1)。Ⅰ型胶原含量均随E2 浓度增加而降低。结论 E2 促进体外培养的骨髓基质细胞向脂肪细胞分化而抑制其向成骨细胞分化。